"Ät mig inte"-signal i hematologiska maligniteter: CD24 som nytt mål för att förbättra immuniteten mot cancer.

MCL är en aggressiv B-NHL med dyster prognos med hög sannolikhet för återfall efter konventionell immunokemoterapeutisk regim. KLL är istället en obotlig kronisk B-cellsmalignitet med högre sannolikhet för återfall efter flera rader av konventionella terapier och en icke försumbar risk för progression till ett aggressivt lymfom. Ytterligare tillvägagångssätt behövs för att tillhandahålla giltiga alternativ för dessa återfallande och refraktära sjukdomar. I dessa två miljöer är TME känt för att vara involverat i cancercellöverlevnad och ger en negativ inverkan på standardbehandlingseffektivitet och adoptiv T-cellsimmunitet, för vilka nya immunterapeutiska medel kan vara ett alternativt tillvägagångssätt vid dåliga prognostiska inställningar. Inom TME är TAM involverade i att förbättra tumörtillväxtöverlevnaden vid MCL och KLL, vilket också dämpar immunterapi. Anti-CD47 mAb visade sig vara en konsekvent DEM som, när den väl blockerats, kan förbättra fagocytos och eliminering av tumörceller i blodcancer. CD24 har nyligen validerats som en annan DEM i preklinisk analys vid solid cancer. Eftersom CD24 uttrycks under den tidiga fasen av B-cellsdifferentiering, kan MCL och CLL dra fördel av blockaden av denna signal, eftersom TAM och NCL är strikt sammankopplade med sina motsvarande tumörceller, vilket ger tumörcellsproliferation och immunflykt.

För att uppfylla syftena med detta projekt kommer insamling av överblivna patient-härledda prover att utföras rutinmässigt vid tidpunkten för diagnosen och vid tidpunkten för återfall av sjukdomen, i det senare fallet med syfte att kontrollera eventuella CD24, CD47 och CD20 ytor. expressionsmodifiering på B-cellsblaster (t.ex. klonselektion med CD24/CD47-uppreglering efter konventionell regim), SIRP-α och Siglec-10-expression på patienthärledda Monocyt/Macrophage-system (som uttrycker högre nivåer av DEMs-ligander som potentiell resistensmekanism efter konventionell terapi).

Vidare kommer fagocytosanalyser med prover som erhållits vid tidpunkten för återfall att jämföras med motsvarande experiment utförda med proverna som samlats in vid tidpunkten för diagnosen för att utvärdera eventuella skillnader.

Som tidigare beskrivits kommer fagocytosanalys att baseras på en samodlingsprocess som involverar användning av anti-CD24-antikroppen (ensam eller i kombination med andra antikroppar som beskrivs i den sekundära endpointen) inkubering med makrofager (från frisk donator eller från patient) och patienttumörceller (MCL eller CLL), dessa senare märkta med en fluorescerande substans (dvs CFSE). Makrofagfärgning (med anti-CD11b-PE-antikropp) och efterföljande flödescytometrisk analys kommer att utföras: förhållandet mellan dubbelfärgade makrofager (CD11b-PE+/CFSE+) och enkelfärgade makrofager (CD11b-PE+) kommer att tillhandahålla entiteten av fagocytos, vilket kommer att jämföras med den negativa kontrollen och de andra experimentella betingelserna (antikroppskombinationer som beskrivs senare i de sekundära ändpunkterna). Den dubbla färgningen av makrofager ger indirekta resultat av fagocytos (om makrofagen fagocyter CFSE+-celler, kommer den också att förvärva denna färgning utöver den som beror på anti-CD11b-PE-antikroppen).

Slutligen kommer givare-härledda makrofager att isoleras från PBMC erhållet från överblivet perifert blod som förblev inom kretsen som används för blodplättsferes hos friska donatorer. Faktum är att restblod (nästan 15 ml) kan hittas i reservoaren i denna krets som normalt slängs i papperskorgen efter proceduren. Givare kommer att underteckna informerat samtycke för användning av överblivet material för forskningsändamål och detta projekt i synnerhet.