Undersøgelse af vævsreparation i inflammatorisk tarmsygdom, der udnytter organoidteknologi (ORGANOIDS)

Inflammatoriske tarmsygdomme (IBD) er kroniske inflammationer i mave -tarmkanalen. Uanset etiologien er en almindelig egenskab ved IBD -patogenese den inflammatoriske skade påført tarmslimhinden og tabet af tarmepitelbarriereintegritet. Derfor betragtes forståelse af de mekanismer, der styrer IECs kapacitet til at opretholde barrierefunktion og til at orkestrere slimhindeheling som et vigtigt mål i translationel forskning. Vi er interesseret i at forstå, hvordan det inflammatoriske miljø, der er til stede i tarmslimhinden, af IBD -patienter påvirker epitelceller kapacitet til at styre reparation. Kompleksiteten af ​​det cytokin og metaboliske miljø, der er til stede i IBD -patienter, gør undersøgelsen af ​​bidraget fra hvert cytokin, metabolit og intracellulær vej ekstremt kompliceret. Derfor studeres de fleste af de processer, der styrer vævsregenerering, ved anvendelse af musemodeller, der rekapitulerer en eller flere træk ved IBD og giver mulighed for genetiske modifikationer af genet og interessen for interesse. Mens musemodeller er unikt egnede til at studere det komplekse krydstale mellem immunsystemet, mikrobiotaen og tarmepithelia, introducerer de det vigtige problem med artsspecifikke forskelle, som kan hæmme den translationelle værdi af musestudier.

For at overvinde disse mangler foreslår vi at undersøge påvirkningen af ​​cytokiner og metabolitter i fordøjelsesorganoider, der stammer fra patienter og kontroller. Det er vigtigt, at det blev demonstreret, at genekspression og medfødte immunresponser ændres i primære organoider, der stammer fra patienter med IBD, herunder ændret evne til at proliferere, reagere på cytokiner, metabolisk kapacitet og effektivt danne organoider, der antyder, at store forskelle mellem patientens og kontrolens epitelcelle Biologi kan trofast replikeres i dette system.

I betragtning af disse lokaler foreslår vi følgende mål:

Primært mål:

Hovedmålet med denne undersøgelse er at konstatere, at patientens epitelceller fra betændte slimhinde har reduceret evnen til at reparere tarmslimhinden sammenlignet med epitelceller fra ikke-påvirkede regioner hos den samme patient eller til at kontrollere individ uden inflammatoriske fordøjelsessygdomme.

Vi vil udforske dette spørgsmål, der både uddeler organoider fra kliniske prøver og udsætter dem for pro -inflammatoriske cytokiner og metabolitter i vitro, samt ved at analysere reparationsresponser fra de førnævnte kliniske prøver ex vivo.

Sekundært mål

De sekundære mål for denne undersøgelse er:

-At sammenligne organoider, der stammer fra: epithelia i betændt slimhinde hos IBD-patienter, epithelia i ikke-påvirket slimhinde hos IBD-patienter og epithelia fra slimhinden af ​​ikke-IBD-kontroller i deres evne til at montere en reparationsrespons som respons på inflammatoriske cytokiner eller luminal metabolitter.

Nemlig vil vi evaluere følgende parametre:

• Deres kapacitet til at proliferere.
• Deres evne til at overleve behandling med pro-inflammatoriske cytokiner
• Aktiveringen af ​​intracellulære veje forbundet med celledød.
• Deres samlede metaboliske aktivitet.
• Balancen mellem STEM og differentierede epitelcelletyper.
• Den transkriptionelle aktivering af beskyttende veje, såsom dem, der er forbundet med proliferation, migration, differentiering og celleoverlevelse.
• For at evaluere kendetegn for vævsreparation i biopsier afledt af epithelia i betændt slimhinde hos IBD-patienter, epithelia i ikke-påvirket slimhinde af IBD-patienter og epithelia fra slimhinden af ​​ikke-IBD-kontroller og at korrelere dem til niveauerne af inflammatoriske cytokiner, Luminale metabolitter og generel sygdomsgrad. Nemlig vil vi evaluere følgende parametre:
• Forekomsten af ​​prolifererende celler.
• Aktiveringen af ​​intracellulære veje forbundet med celledød og overlevelse.
• Deres samlede metaboliske aktivitet.
• Balancen mellem STEM og differentierede epitelcelletyper.
• Den transkriptionelle aktivering af beskyttende veje, såsom dem, der er forbundet med proliferation, migration, differentiering og celleoverlevelse.