Untersuchung der Gewebereparatur bei entzündlichen Darmerkrankungen zur Nutzung der Organoid -Technologie (ORGANOIDS)

Entzündliche Darmerkrankungen (IBD) sind chronische Entzündungen des Magen -Darm -Trakts. Unabhängig von der Ätiologie ist ein häufiges Merkmal der IBD -Pathogenese die entzündliche Schädigung, die der Darmschleimhaut verursacht wird, und der Verlust der Integrität der Darmepithelbarriere. Daher wird das Verständnis der Mechanismen, die die Fähigkeit des IEC zur Aufrechterhaltung der Barrierefunktion und zur orchestrierten Schleimhautheilung bestimmen, als Hauptziel in der translationalen Forschung angesehen. Wir sind daran interessiert zu verstehen, wie die entzündliche Umgebung in der Darmschleimhaut von IBD -Patienten die epitheliale Zellenkapazität zur Verwaltung der Reparatur beeinflusst. Die Komplexität des in IBD -Patienten vorhandenen Zytokin- und Stoffwechsel -Milieu liefert die Untersuchung des Beitrags jedes Zytokin-, Metaboliten- und intrazellulären Weges extrem kompliziert. Daher werden die meisten Prozesse, die die Geweberegeneration regeln, unter Verwendung von Mausmodellen untersucht, die ein oder mehrere Merkmale von IBD rekapitulieren und genetische Modifikationen des Gens und des Interesses ermöglichen. Während Mausmodelle einzigartig geeignet sind, um das komplexe Übersprechen zwischen dem Immunsystem, der Mikrobiota und der Darmpithelie zu untersuchen, führen sie das wichtige Problem der speziesspezifischen Unterschiede ein, die den Translationswert von Mausstudien behindern können.

Um diese Mängel zu überwinden, schlagen wir vor, den Einfluss von Zytokinen und Metaboliten in Verdauungsorganoiden zu untersuchen, die von Patienten und Kontrollpersonen stammen. Wichtig ist, dass es gezeigt wurde, dass die Genexpression und angeborene Immunantworten in primären Organoiden verändert werden, die von Patienten mit IBD abgeleitet wurden, einschließlich veränderter Fähigkeit zur Verbreitung, Reaktion auf Zytokine, Stoffwechselkapazität und effiziente Formen -Organoide, die die wesentlichen Unterschiede zwischen den Epithelzellen des Patienten und der Kontrolle der Kontrolle haben Die Biologie kann in diesem System treu repliziert werden.

Angesichts dieser Räumlichkeiten schlagen wir die folgenden Ziele vor:

Hauptziel:

Das Hauptziel dieser Studie ist es, festzustellen, dass die Epithelzellen des Patienten aus entzündeten Schleimhäuten im Vergleich zu Epithelzellen von nicht inflahmten Regionen bei demselben Patienten eine verminderte Fähigkeit zur Reparatur der Darmschleimhaut haben oder das Subjekt ohne entzündliche Verdauungskrankheiten kontrollieren.

Wir werden diese Frage beide untersuchen, die Organoide aus klinischen Proben abgeben und in vitro entzündlichen Zytokinen und Metaboliten aussetzen sowie Reparaturreaktionen aus den oben genannten klinischen Proben ex vivo analysieren.

Sekundäres Ziel

Die sekundären Ziele dieser Studie sind:

-Um Organoide zu vergleichen, die aus: Epithelie bei entzündeten Schleimhaut von IBD-Patienten, Epithelien bei nicht inflahmter Schleimhaut von IBD-Patienten und Epithelien aus der Schleimhaut von Nicht-IBD Metaboliten.

Wir werden nämlich die folgenden Parameter bewerten:

• Ihre Fähigkeit, sich zu vermehren.
• Ihre Fähigkeit, die Behandlung mit entzündungshemmenden Zytokinen zu überleben
• Die Aktivierung von intrazellulären Wegen, die mit dem Zelltod assoziiert sind.
• Ihre allgemeine Stoffwechselaktivität.
• Das Gleichgewicht zwischen Stamm und differenzierten epithelialen Zelltypen.
• Die Transkriptionsaktivierung von Schutzpfaden wie diejenigen, die mit Proliferation, Migration, Differenzierung und Zellüberleben verbunden sind.
• Um die Kennzeichen der Gewebereparatur in Biopsien aus Epithelie bei entzündeten Schleimhaut von IBD-Patienten, Epithelien bei nicht inflamiertem Schleimhaut von IBD-Patienten und Epithelien aus der Schleimhaut von Nicht-IBD-Kontrollpersonen zu bewerten, und sie mit den Niveaus der Inflammatory-Zytokine zu korrelieren Luminalmetaboliten und Schweregrad der Gesamtkrankheit. Wir werden nämlich die folgenden Parameter bewerten:
• Die Fülle an proliferierenden Zellen.
• Die Aktivierung von intrazellulären Wegen, die mit Zelltod und Überleben verbunden sind.
• Ihre allgemeine Stoffwechselaktivität.
• Das Gleichgewicht zwischen Stamm und differenzierten epithelialen Zelltypen.
• Die Transkriptionsaktivierung von Schutzpfaden wie diejenigen, die mit Proliferation, Migration, Differenzierung und Zellüberleben verbunden sind.