Estudo do reparo de tecidos na doença inflamatória intestinal que explora a tecnologia orgânica (ORGANOIDS)

As doenças inflamatórias intestinais (DII) são inflamações crônicas do trato gastrointestinal. Independentemente da etiologia, uma característica comum da patogênese da DII é o dano inflamatório infligido à mucosa intestinal e a perda da integridade da barreira epitelial intestinal. Portanto, entender os mecanismos que governam a capacidade da IEC de manter a função da barreira e orquestrar a cura da mucosa é considerada um objetivo importante na pesquisa translacional. Estamos interessados ​​em entender como o ambiente inflamatório presente na mucosa intestinal, de pacientes com DII, influencia a capacidade das células epiteliais de governar o reparo. As complexidades da citocina e do meio metabólico presentes em pacientes com DII tornam o estudo da contribuição de cada citocina, metabólito e via intracelular extremamente complicada. Portanto, a maioria dos processos que governam a regeneração tecidual é estudada com o uso de modelos de camundongos que recapitulam um ou vários recursos de DII e permitem modificações genéticas do gene e da via de interesse. Enquanto os modelos de camundongos são adequados para estudar de maneira única a interferência complexa entre o sistema imunológico, a microbiota e os epitélios intestinais, eles introduzem o importante problema das diferenças específicas de espécies, que podem dificultar o valor de translação dos estudos de camundongos.

Para superar essas deficiências, propomos explorar a influência de citocinas e metabólitos em organoides digestivos derivados de pacientes e controles. É importante ressaltar que foi demonstrado que a expressão gênica e as respostas imunes inatas são alteradas em organoides primários derivados de pacientes com DII, incluindo a capacidade alterada de proliferar, responder a citocinas, capacidade metabólica e eficientemente formam organoides, sugerindo que as principais diferenças entre as células epiteliais do paciente e controle A biologia pode ser fielmente replicada neste sistema.

Dadas essas premissas, propomos os seguintes objetivos:

Objetivo Primário:

O principal objetivo deste estudo é estabelecer que as células epiteliais do paciente de mucosas inflamadas tenham uma capacidade reduzida de reparar a mucosa intestinal, em comparação com células epiteliais de regiões não inflamadas no mesmo paciente ou para controlar o sujeito sem doenças digeridas inflamatórias.

Exploraremos essa questão derivar organoides de amostras clínicas e expor -as a citocinas e metabólitos inflamatórios pró -Pro, bem como analisando as respostas de reparo das amostras clínicas acima mencionadas ex vivo.

Objetivo secundário

Os objetivos secundários deste estudo são:

-Para comparar os organoides derivados de: epitélios em mucosa inflamada de pacientes com DII, epitélios em mucosa não inflamada de pacientes com DII e epitélios da mucosa de controles não IBD em sua capacidade de montar uma resposta de reparo em resposta a citoquinas inflamatórias ou luminal metabólitos.

Ou seja, avaliaremos os seguintes parâmetros:

• Sua capacidade de proliferar.
• Sua capacidade de sobreviver ao tratamento com citocinas pró-inflamatórias
• A ativação de vias intracelulares associadas à morte celular.
• Sua atividade metabólica geral.
• O equilíbrio entre os tipos de células epiteliais diferenciadas e diferenciadas.
• A ativação transcricional de vias de proteção, como as associadas à proliferação, migração, diferenciação e sobrevivência celular.
• Para avaliar as características do reparo tecidual em biópsias derivadas de epitélios em mucosa inflamada de pacientes com DII, epitélios em mucosa não inflamada de pacientes com DII e epitélios da mucosa de controles não IBD e corrializam-os para os níveis de citoquinas inflamatórias, Metabólitos luminais e gravidade geral da doença. Ou seja, avaliaremos os seguintes parâmetros:
• A abundância de células em proliferação.
• A ativação de vias intracelulares associadas à morte celular e sobrevivência.
• Sua atividade metabólica geral.
• O equilíbrio entre os tipos de células epiteliais diferenciadas e diferenciadas.
• A ativação transcricional de vias de proteção, como as associadas à proliferação, migração, diferenciação e sobrevivência celular.