Estudio de reparación de tejidos en la enfermedad inflamatoria intestinal que explota la tecnología organoide (ORGANOIDS)

Las enfermedades inflamatorias intestinales (EII) son inflamaciones crónicas del tracto gastrointestinal. Independientemente de la etiología, un rasgo común de la patogénesis de la EII es el daño inflamatorio infligido en la mucosa intestinal y la pérdida de la integridad de la barrera epitelial intestinal. Por lo tanto, comprender los mecanismos que rigen la capacidad de IEC para mantener la función de barrera y para orquestar la curación de la mucosa se considera un objetivo importante en la investigación traslacional. Estamos interesados ​​en comprender cómo el entorno inflamatorio presente en la mucosa intestinal, de los pacientes con EII influye en la capacidad de las células epiteliales para gobernar la reparación. Las complejidades de la citocina y el medio metabólico presentes en pacientes con EII hacen que el estudio de la contribución de cada citocina, metabolito y vía intracelular sea extremadamente complicada. Por lo tanto, la mayoría de los procesos que rigen la regeneración de tejidos se estudian con el uso de modelos de ratones que recapitulan una o múltiples características de la EII y permiten modificaciones genéticas del gen y la vía de interés. Si bien los modelos de ratones son únicos para estudiar la diafonía compleja entre el sistema inmune, la microbiota y los epitelios intestinales, introducen el importante problema de las diferencias específicas de la especie, lo que puede obstaculizar el valor de traducción de los estudios de ratones.

Para superar estas deficiencias, proponemos explorar la influencia de las citocinas y los metabolitos en los organoides digestivos derivados de pacientes y controles. Es importante destacar que se demostró que la expresión génica y las respuestas inmunes innatas se alteran en los organoides primarios derivados de pacientes con EII, incluida la capacidad alterada para proliferar, responder a las citocinas, la capacidad metabólica y formar organoides de manera eficiente que sugieren que las diferencias importantes entre las células epiteliales de los pacientes y el control del control La biología se puede replicar fielmente en este sistema.

Dadas estas premisas, proponemos los siguientes objetivos:

Objetivo principal:

El objetivo principal de este estudio es establecer que las células epiteliales del paciente de las mucosa inflamadas tienen una capacidad disminuida para reparar la mucosa intestinal, en comparación con las células epiteliales de las regiones no inflamadas en el mismo paciente, o para controlar el sujeto sin enfermedades digestivas inflamatorias.

Exploraremos esta pregunta que derivan los organoides de las muestras clínicas y los expondremos a citocinas y metabolitos pro inflamatorios in vitro, así como mediante el análisis de respuestas de reparación de las muestras clínicas mencionadas anteriormente ex vivo.

Objetivo secundario

Los objetivos secundarios de este estudio son:

-Para comparar los organoides derivados de: epitelios en mucosa inflamada de pacientes con EII, epitelios en mucosa no inflamada de pacientes con EII y epitelios de la mucosa de los controles no EBD en su capacidad para montar una respuesta de reparación en respuesta a citoquinas inflamatorias o luminal metabolitos.

A saber, evaluaremos los siguientes parámetros:

• Su capacidad para proliferar.
• Su capacidad para sobrevivir al tratamiento con citocinas proinflamatorias
• La activación de las vías intracelulares asociadas con la muerte celular.
• Su actividad metabólica general.
• El equilibrio entre los tipos de células epiteliales STEM y diferenciadas.
• La activación transcripcional de vías protectoras, como las asociadas con la proliferación, migración, diferenciación y supervivencia celular.
• Evaluar las características distintivas de la reparación de tejidos en biopsias derivadas de los epitelios en mucosa inflamada de pacientes con EII, epitelios en mucosa no inflamada de pacientes con EII y epitelios a partir de la mucosa de los controles no TIBD, y para corregirlos a los niveles de citocinas inflamatorias, metabolitos luminales y gravedad general de la enfermedad. A saber, evaluaremos los siguientes parámetros:
• La abundancia de células proliferantes.
• La activación de las vías intracelulares asociadas con la muerte celular y la supervivencia.
• Su actividad metabólica general.
• El equilibrio entre los tipos de células epiteliales STEM y diferenciadas.
• La activación transcripcional de vías protectoras, como las asociadas con la proliferación, migración, diferenciación y supervivencia celular.