Badanie naprawy tkanek w zapalnych jelit. (ORGANOIDS)

Choroby zapalne jelit (IBD) są przewlekłym stanem zapalnym przewodu pokarmowego. Niezależnie od etiologii, wspólną cechą patogenezy IBD jest uszkodzenie zapalne zadane na błonie śluzowej jelit i utrata integralności bariery nabłonkowej jelit. Dlatego zrozumienie mechanizmów regulujących zdolność IEC do utrzymywania funkcji barierowych i organizowania gojenia błony śluzowej jest uważane za główny cel w badaniach translacyjnych. Jesteśmy zainteresowani zrozumieniem, w jaki sposób środowisko zapalne występuje w błonie śluzowej jelit, pacjentów z IBD wpływa na zdolność komórek nabłonkowych do zarządzania naprawą. Złożoność cytokiny i środowiska metabolicznego obecnego u pacjentów z IBD sprawiają, że badanie udziału każdej cytokiny, metabolitu i szlaku wewnątrzkomórkowego jest wyjątkowo skomplikowane. Dlatego większość procesów rządzących regeneracją tkanek jest badana przy użyciu modeli myszy, które podsumowują jedną lub wiele cech IBD i pozwala na genetyczne modyfikacje genu i szlaku zainteresowania. Podczas gdy modele myszy są jednoznacznie przystosowane do badania złożonego przesłuchu między układem odpornościowym, mikroflorem i nabłonkiem jelitowym, wprowadzają ważny problem różnic specyficznych dla gatunku, który może utrudniać translacyjną wartość badań myszy.

Aby przezwyciężyć te niedociągnięcia, proponujemy zbadanie wpływu cytokin i metabolitów w organie trawiennych pochodzących od pacjentów i kontroli. Co ważne, wykazano, że ekspresja genów i wrodzone odpowiedzi immunologiczne są zmieniane w pierwotnych organoidach pochodzących od pacjentów z IBD, w tym zmienionej zdolności do proliferacji, reagowania na cytokiny, zdolność metaboliczną i skutecznie tworząc organy sugerujące, że główne różnice między komórką nabłonkową pacjenta i kontroli kontroli i kontroli kontrolnej Biologię można wiernie powtórzyć w tym systemie.

Biorąc pod uwagę te przesłanki, proponujemy następujące cele:

Podstawowy cel:

Głównym celem tego badania jest ustalenie, że komórki nabłonkowe pacjenta z zapalnych błotów błony śluzowe mają zmniejszoną zdolność do naprawy błony śluzowej jelit, w porównaniu z komórkami nabłonkowymi z regionów nieinfałowanych u tego samego pacjenta, lub kontrolować osobę bez zapalnych chorób trawiennych.

Zbadamy to pytanie, zarówno wyprowadzającym organoidy z próbek klinicznych, jak i narażanie ich na pro cytokiny zapalne i metabolity in vitro, a także analizując odpowiedzi naprawy wyżej wymienionych próbek klinicznych ex vivo.

Cel wtórny

Drugorzędne cele tego badania to:

-Aby porównać organoidy pochodzące z: nabłonka w zapalenie błony śluzowej pacjentów z IBD, nabłonka w błonie śluzowej nieinfałowanej pacjentów z IBD i nabłonka z błony śluzowej kontroli nie-IBD w ich zdolności do zamontowania odpowiedzi naprawczej w odpowiedzi na cytokiny zapalne lub luminalne Metabolity.

Mianowicie ocenimy następujące parametry:

• Ich zdolność do rozprzestrzeniania się.
• Ich zdolność do przeżycia leczenia cytokinami prozapalnymi
• Aktywacja szlaków wewnątrzkomórkowych związanych ze śmiercią komórki.
• Ich ogólna aktywność metaboliczna.
• Równowaga między typami komórek nabłonkowych i zróżnicowanych.
• Aktywacja transkrypcji szlaków ochronnych, takich jak te związane z proliferacją, migracją, różnicowaniem i przeżyciem komórek.
• Aby ocenić cechy naprawy tkanki w biopsjach pochodzących z nabłonka u zapalonej błony śluzowej pacjentów z IBD, nabłonka w błonie śluzowej nieinfałowanej pacjentów z IBD i nabłonki z błony śluzowej kontroli nie-IBD i korelacja ich z poziomem cytokin zapalnych, Metabolity światła i ogólne nasilenie choroby. Mianowicie ocenimy następujące parametry:
• Obfitość komórek proliferujących.
• Aktywacja szlaków wewnątrzkomórkowych związanych ze śmiercią komórek i przeżyciem.
• Ich ogólna aktywność metaboliczna.
• Równowaga między typami komórek nabłonkowych i zróżnicowanych.
• Aktywacja transkrypcji szlaków ochronnych, takich jak te związane z proliferacją, migracją, różnicowaniem i przeżyciem komórek.