Rückruf an eine Kohorte von Probanden im Mittelmeerraum. Überwachung von Lebererkrankungen (Nutrihep 3). (Nutrihep3)

Lebererkrankungen sind ein erhebliches Problem der öffentlichen Gesundheit mit hoher Prävalenz und wachsender Inzidenz weltweit sowie erhebliche Auswirkungen auf die globale Morbidität und Mortalität, was jährlich ungefähr 2 Millionen Todesfälle verursacht. Todesfälle sind hauptsächlich auf Komplikationen von Zirrhose und hepatozellulärem Karzinom zurückzuführen. Die häufigsten Ursachen für Zirrhose weltweit hängen mit viraler Hepatitis, Alkohol und nichtalkoholischen Fettlebererkrankungen zusammen, die durch schlechte Ernährungsgewohnheiten verursacht werden. Hepatotrope Viren sind in den meisten Fällen von akuter Hepatitis der ätiologische Faktor, aber die medikamenteninduzierte Leberverletzung stellt zunehmend einen signifikanten Prozentsatz der Fälle dar.

In Italien war die Inzidenz von Lebererkrankungen in den letzten Jahren Gegenstand von Studien. Basierend auf diesen Daten wurde Italien als "hyper-endemische" Region identifiziert, in der sowohl virale als auch metabolische Ätiologien für eine hohe Prävalenz und Inzidenz chronischer Lebererkrankungen verantwortlich sind. Darüber hinaus wurde eine fortschreitende Zunahme der Inzidenz von viraler Hepatitis von Nord nach Süditalien beobachtet. In den letzten Jahrzehnten hat die Ätiologie dieser Krankheiten eine signifikante Veränderung durchlaufen.

In Bezug auf das Hepatitis -B -Virus (HBV) haben das Impfprogramm zusammen mit verbesserten sozioökonomischen Erkrankungen und einem größeren Bevölkerungsbewusstsein die Inzidenz und Prävalenz dieser Viruserkrankung schrittweise verringert. Chronische Hepatitis im Zusammenhang mit dem Hepatitis -C -Virus (HCV) nach einem Anstieg in den 1980er und 1990er Jahren zeigt nun einen abnehmenden Trend, insbesondere in jüngeren Altersgruppen. Während sich andere Studien auf Lebererkrankungen metabolischer Herkunft (ASLD, Metald, ALD usw.) konzentriert haben, die als eine der häufigsten Ursachen für Lebererkrankungen weltweit und in Italien angezeigt wurden, wurden Ende der neunziger Jahre die jüngsten epidemiologischen Daten in Bezug auf die italienische Bevölkerung erfasst. Da ein Jahrzehnt jetzt vergangen ist, wurde angenommen, dass es interessant sein könnte, neue Daten über das Prävalenzmuster von Lebererkrankungen zu sammeln, insbesondere in Süditalien, insbesondere in einer Gemeinde, die geografisch sowohl aus der Küste als auch aus dem Hinterland geografisch gleichmäßig ist.

Daher zielt diese Beobachtungsstudie darauf ab, die Entwicklung von Lebererkrankungen zu analysieren, indem eine Kohorte von Patienten erinnert, die bereits im Mittelmeerraum identifiziert wurden. The cohort consists of individuals residing in the municipality of Putignano (BA) who have already undergone evaluation of liver function, comorbidities, and dietary habits, in addition to adding genetic information through genome-wide association (GWAS) analysis, useful for identifying associations between genetic variants and specific phenotypic characteristics with the aim of discovering genetic correlations that can contribute to the molecular understanding of liver diseases und verwandte Komorbiditäten unter Verwendung einer repräsentativen Bevölkerungsstichprobe.

Die Analyse der gesammelten Daten zielt darauf ab, Risikofaktoren und prädiktive Biomarker für das Fortschreiten der Lebererkrankung zu identifizieren, um die Präventions- und Managementstrategien zu optimieren. Die Ergebnisse liefern nützliche Informationen, um die klinische Überwachung zu verbessern und personalisierte Interventionen bei Personen mit Lebererkrankungen zu fördern. Die Analysen werden unter Verwendung fortschrittlicher Bioinformatik und statistischer Methoden durchgeführt, um die Robustheit der Ergebnisse sicherzustellen.

Dieser Rückruf wird fast 20 Jahre nach dem ersten durchgeführt. Der Rückruf von Probanden ermöglicht eine Längsschnittbewertung von Krankheitsverlaufsfaktoren oder den Einsetzen der Krankheit.

Ziel dieser Kohortenstudie ist es nicht nur, an Probanden zu erinnern, die zuvor an den Studien von Nutrihep 1 und Nutrihep2 beteiligt waren, sondern wie alle Kohortenstudien den Zusammenhang zwischen einer Exposition und einem Ergebnis bei einer Gruppe von Personen bewerten. Darüber hinaus werden zusätzlich zur Neubewertung der zuvor betrachteten Parameter (Blutuntersuchungen, Ernährungsfragebogen und körperlicher Aktivität) ihre Variation untersucht, und die Genotypisierung des gesamten Genoms wird die Genotypisierung von Einzelnukleotidpolymorphismen (SNPs) mit Hochthroughpuse-Genom-Technologien (SNPs) durch die Genotypen von Hochthroughpuse-Technologien durchgeführt. Diese Technologie ermöglicht die Analyse von Tausenden/Millionen von genetischen Varianten, die gleichmäßig über das gesamte Genom verteilt sind, zuvor in verschiedenen Vorfahren charakterisiert und in der Projektbank der 1000 Genome Project -3 -Datenbank vorhanden sind.

Die Charakterisierung dieser genetischen Varianten (SNPs) ermöglicht es uns, für jedes Subjekt in unserer Studienkohorte, genetische und polygene Risikowerte durch den kombinierten Einfluss mehrerer genetischer Varianten zu berechnen.

Insbesondere wird die Bestimmung der genetischen und polygenen Risikobewertungen unter Verwendung von Daten aus genomweiten Assoziationsstudien (GWAS) und mit ausgefeilter biostatistischer und mathematischer Algorithmen durchgeführt, um die Allelzahlen zu den Varianten, die mit der MAFLD-Pathologie assoziiert sind, basierend auf dem angesammelten Ursprung unserer Patientenzusammenlage zu gewichten. In nachfolgenden Phasen werden die genetischen und polygenen Risikowerte verwendet, um die Assoziationen mit den klinischen Merkmalen der kranken Probanden zu untersuchen, um Untergruppen von Patienten mit charakteristischen klinischen Merkmalen zu identifizieren und das Risiko eines Beginns und der Entwicklung der Pathologie vorherzusagen.

Die Nutrihep-Kohorte (Putignano) wurde erstmals in den Jahren 2006-2007 gegründet, die eine Kohorte von 2300 Probanden umfasste, die aus den Listen der Allgemeinmediziner in der Gemeinde Putignano (BA) mit einem 1: 3-Schritt zurückgerufen wurden.

In den Jahren 2015-2018 wurden dieselben Probanden mit einer Nachbefehle von 65,60%zurückgerufen. Darüber hinaus wurden 102 Todesfälle von 2007 bis 2014 verzeichnet.

Der Rückruf wird den 2300 aus der 1. Welle betrachten, aus dem die Todesfälle durch die Konsultation der Todesregister über das regionale Edotto -System bewertet wurden und diejenigen, die in andere Regionen umgezogen sind, abgezogen werden.

Darüber hinaus wird eine eingebettete Kohorte geschaffen, um die Repräsentativität der Studienpopulation aufrechtzuerhalten, die mit einem 1: 3 -Schritt auf der Grundlage der Registrierungen von Allgemeinärzten extrahiert wird. Dieser Ansatz ist nützlich, da die anfängliche Kohorte gealtert ist und daher keine Personen mehr umfasst, die zu den jüngeren Altersgruppen gehören, die zu Beginn der Studie vorhanden waren, sondern im Laufe der Zeit gealtert sind. Dies ermöglicht es uns, die Altersverteilung ähnlich wie die anfängliche Aufrechterhaltung beizubehalten, um zu verhindern, dass die Kohorte zunehmend gegenüber älteren Altersgruppen verzerrt wird, sowie die Verzerrung aufgrund der Alterung der Kohorte selbst und die Verbesserung der Generalisierbarkeit der Ergebnisse zu verringern. Es ermöglicht uns auch, die statistische Kraft der Studie zu bewahren, da insbesondere einige ältere Altersgruppen für die Analyse der Auswirkungen der Exposition auf das Ergebnis von entscheidender Bedeutung sind.

Bei ähnlichen Modalitäten wie die vorherigen wird sich diese Beobachtungsstudie hauptsächlich auf die folgenden Phasen konzentrieren:

Anfangsphase

• Schaffung einer Liste von Themen, die angerufen werden sollen, stammen beide Namen der Teilnehmer der Studie Nutrihep 1 und der Bewohner der Gemeinde Putignano über die Liste der Allgemeinmediziner, um die jüngere Altersgruppe auszugleichen.
• Neukontakte der noch lebenden Themen durch Briefe, die an ihr Haus geschickt und Anrufe gesendet wurden;
• Terminplanung.

V1:

• Unterzeichnung der Einverständniserklärung;
• Bewertung der Lebergesundheit durch nicht-invasive Untersuchung mit Fibroscan;
• Anamnesis basierend auf epidemiologischen Parametern (Alter, Geschlecht, Einkommen, pathologische und familiäre Geschichte von Krankheiten im Zusammenhang mit Leber);
• Sammlung anthropometrischer Parameter wie Gewicht, Größe, Taillenumfang, Hüftumfang, Halsumfang, Handgelenksumfang und Wadenumfang. Darüber hinaus werden die Blutdruckparameter (systolisch und diastolisch) und der physikalische Fitnessstatus über die folgenden Feldtests aufgezeichnet: Handgriff, Sit und Reichweite, einbeiner Ständer, 30 '' Sit to Stand, Ruffier Test, Vo2 Max.

Angemeldete Probanden erhalten ein Beschleunigungsmesser, das objektive und zuverlässige Informationen zur körperlichen Aktivität (Beschleunigungen, Bewegungen ...) und Schlafqualität liefert. Es wird am Tag der Rekrutierung gegeben und nach 7 Tagen zurückgekehrt.

Um vor Beginn des Projekts Aspekte, die den Erfolg der vorgeschlagenen Interventionen beeinträchtigen könnten, besser zu verstehen, werden die Probanden einen zusätzlichen Fragebogen ausfüllen:

Darüber hinaus werden Tests abgeschlossen, um die Schlafqualität und Kinesophobie, den Pittsburgh Sleep Quality Index (PSQI) und die Tampa -Skala von Kinesiophobia (TSK) zu bewerten. Für die Klassifizierung von Sarkopenie wird der SPPB -Test (Short Physical Performance Battery) durchgeführt. - Blutprobenahme für Routineanalysen. Das Folgende wird an den Proben gemessen: vollständige Blutanzahl, CRP, Gesamtproteine, Ceruloplasmin, Alpha -1 -Antitrypsin, Glukose, Hämoglobin A1c (Hba1c), Harnstoff, Creatinin, geschätzte glomeruläre Filtrationsrate (EGFR), Total und Direct Biliruubin, Alloubin, Alkoholin, Albumin, Albumin, Asspartat -Aminotransase (EGFR) (Total- und Directing Biliruubin, Albumin, Asspartierung Aminotransferase (ALT/GPT), Gamma-Glutamyl Transferase (GGT), sodium, potassium, calcium, phosphorus, iron, cholesterol, High-Density Lipoprotein (HDL), Low-Density Lipoprotein (LDL), triglycerides, cortisol, c-peptide, vitamin D, insulin, ferritin, folate, vitamin B12, parathyroid hormone, Thyroid-Stimulating Hormone (TSH), Free Triiodothyronine (FT3), Free Thyroxine (FT4), Insulin-like Growth Factor 1 (IGF-1), high-sensitivity C-reactive protein (hsCRP), pro-B-type Natriuretic Peptide (proBNP), zinc, magnesium, HBV und HCV; Serumaliquots, möglicherweise nach den routinemäßigen Blutchemieanalysen, werden in der Biobank für nachfolgende Analysen und möglicherweise mit Zustimmung des Probanden für andere Studien verwendet, dass die IRCCs "Saverio de Bellis" aktivieren werden.

Genotypisierungsanalysen werden an Vollblut -Aliquots durchgeführt, die möglicherweise auch nach Routineanalysen verbleiben. Die Anonymität wird garantiert, indem zum Zeitpunkt der Aufnahme einen eindeutigen Code zugewiesen wird.

-Abgabe von Fragebögen zur Selbstvervollständigung: Fragebogen für Lebensmittel (episch), körperliche Aktivität (IPAQ, Langform) und Fragebögen zur Bewertung der psychischen Gesundheit: PSS-10 (wahrgenommene Stressskala), H.A.D.S. (Skala im Krankenhausangst und Depression), TMI-I (testen Sie Ihr Gedächtnis).

V2 (7 Tage später):

• Sammlung von Blutchemiestests;
• Lieferung von Stuhl- und Urinproben. Fäkal -Calprotektin und okkultes Blut werden an den Stuhlproben gemessen. Anschließend werden Stuhl- und Urinproben in der Biobank gespeichert. Stuhlproben werden zur Bewertung des Darmmikrobiotas und des Fäkalmetaboloms verwendet. Urinproben werden für Metabolomikmessungen verwendet. Zur Bewertung der Darmmikrobiota wird die gesamte bakterielle metagenomische DNA unter Verwendung des QIAAMP -Schnell -DNA -Stuhl -Mini -Kits (Qiagen, Hilden, Deutschland) aus Stuhlproben extrahiert. Die mikrobiome Charakterisierung wird unter Verwendung eines DNA -Metabarcoding- und Schrotflinten -Metatranskriptomik -Ansatzes durchgeführt. Die DNA-Metabarkodierungsanalyse wird unter Verwendung der V5-V6-hypervariablen Regionen von 16S-rRNA für Bakterien (Miseq-Illumina-Plattform) durchgeführt. Proben, die in der DNA -Metabarkodierungsanalyse signifikant sind, werden einer Metatranskriptomik -Analyse (NextSQ 500 - Illumina -Plattform) unterzogen. Metagenomik- und Metatranskriptomikdaten werden unter Verwendung von Bioinformatik -Pipelines analysiert.

Um Metabolomik-Tests durchzuführen, werden die Proben auf flüchtige organische Verbindungen (VOCs) analysiert, die thermisch desorbiert werden, indem die Faser sofort in den erhitzten Injektionsanschluss (220 ° C) einer Clarus 680 (Perkin Elmer, Beaconsfield uk) mit einem RTX-WAX-Säulen (30 m × 0,25 mm, 0,25 mm, 0,25 mm, 0,25 mm, 0,25 mm, 0,25 mm, 0,25 mm, 0,25 ° C), übertragen wird. und gekoppelt mit einem Clarus SQ8Ms (Perkin Elmer) mit Quellen- und Übertragungsleitentemperaturen bei 250 bzw. 210 ° C.

• Sammlung des Beschleunigungsmessers;
• Abgabe von Fragebögen und Diskussionen, um Missverständnisse und fehlende Daten zu vermeiden.