Muistuttaa kohortin kohorttia Välimeren alueella. Maksasairauksien seuranta (NutriHep 3). (Nutrihep3)

Maksasairaudet edustavat merkittävää kansanterveysongelmaa, jolla on suuri esiintyvyys ja kasvava esiintyvyys maailmanlaajuisesti, ja merkittävä vaikutus globaaliin sairastuvuuteen ja kuolleisuuteen, aiheuttaen noin 2 miljoonaa kuolemaa vuodessa. Kuolemat johtuvat suurelta osin maksakirroosin ja hepatosellulaarisen karsinooman komplikaatioista. Maailmanlaajuisen maksakirroosin yleisimmät syyt liittyvät virushepatiittiin, alkoholiin ja alkoholittomiin rasvamaksasairauksiin, jotka aiheuttavat huonojen ruokavalion tapojen aiheuttamat. Hepatotrooppiset virukset ovat etiologinen tekijä useimmissa akuutin hepatiitin tapauksissa, mutta lääkkeen aiheuttama maksavaurio edustaa yhä enemmän merkittävää prosenttia tapauksista.

Italiassa maksasairauksien esiintyvyys on tutkittu viime vuosina. Näiden tietojen perusteella Italia on tunnistettu "hyper-endeemiseksi" alueeksi, jolla sekä virus- että metaboliset etiologiat ovat vastuussa kroonisten maksasairauksien korkeasta esiintyvyydestä ja esiintyvyydestä. Lisäksi on havaittu virushepatiitin esiintyvyyden asteittaista kasvua pohjoisesta eteläiseen Italiaan. Viime vuosikymmeninä näiden sairauksien etiologia on tapahtunut merkittävästi.

Hepatiitti B -viruksen (HBV) osalta rokotusohjelma sekä parannetut sosioekonomiset sairaudet ja suurempi väestötietoisuus ovat vähentäneet tämän virussairauden esiintyvyyttä ja esiintyvyyttä. Hepatiitti C -virukseen (HCV) liittyvä krooninen hepatiitti 1980- ja 1990 -luvun lisääntymisen jälkeen on nyt vähenevä suuntaus, etenkin nuorempien ikäryhmien keskuudessa. Vaikka muut tutkimukset ovat keskittyneet metabolisen alkuperän maksasairauksiin (ASLD, Metal, ALD jne.), Jotka on osoitettu yhdeksi yleisimmistä maksasairauksien syistä maailmanlaajuisesti ja Italiassa, viimeisimmät epidemiologiset tiedot Italian väestöstä kerättiin 1990 -luvun lopulla. Kun vuosikymmen on nyt kulunut, ajateltiin, että voi olla mielenkiintoista kerätä uusia tietoja maksasairauksien esiintyvyydestä, etenkin Etelä -Italiassa, etenkin kunnassa, joka on maantieteellisesti tasainen sekä rannikosta että sisämaasta.

Siksi tämän havainnollisen tutkimuksen tavoitteena on analysoida maksasairauksien kehitystä palauttamalla Reserranan alueella jo tunnistettujen potilaiden ryhmän. Kohortti koostuu Putignanon kunnassa asuvista henkilöistä, joille on jo tehty maksan toiminnan, yhdistelmätapojen ja ruokavaliotapojen arviointi, geneettisen tiedon lisäämisen lisäksi genomin laajuisen assosiaation (GWAS) analyysin avulla, joka on hyödyllinen geneettisten variaatioiden välisten assosiaatioiden tunnistamisessa geneettisten variaatioiden välillä, jotka voivat liittyä takeiden geneettisten koriaatioiden väliseen assosiaatioon, joka voi liittyä sairauksien havaitsemiseen. sairaudet ja niihin liittyvät lisävaikutukset käyttämällä edustavaa populaationäytettä.

Kerättyjen tietojen analyysin tavoitteena on tunnistaa riskitekijät ja maksasairauden etenemisen ennustavat biomarkkerit, joiden tavoitteena on optimoida ehkäisy- ja hallintastrategiat. Tulokset tarjoavat hyödyllistä tietoa kliinisen seurannan parantamiseksi ja henkilökohtaisten toimenpiteiden edistämiseksi maksasairauksien henkilöillä. Analyysit suoritetaan käyttämällä edistynyttä bioinformatiikkaa ja tilastollisia menetelmiä tulosten kestävyyden varmistamiseksi.

Tämä palautus suoritetaan melkein 20 vuotta ensimmäisen jälkeen. Koehenkilöiden palauttaminen mahdollistaa taudin etenemistekijöiden pitkittäisen arvioinnin tai taudin puhkeamisen.

Tämän kohorttitutkimuksen tavoitteena ei ole vain muistettava henkilöitä, jotka ovat aikaisemmin mukana NutriHep 1- ja NutriHep2 -tutkimuksissa, vaan kuten kaikki kohorttitutkimukset, arvioida altistumisen ja tuloksen välistä yhteyttä yksilöiden ryhmässä. Lisäksi aikaisemmin harkittujen parametrien (verikokeet, ruokavaliokysely ja fyysinen aktiivisuus) sen lisäksi, jotta voidaan tutkia niiden variaatiota, ja koko genomin genotyyppi suoritetaan kokonaisen genomin genotyyppien määrittämisessä yhden nukleotidipolymorfismien (SNPS) käyttämällä SNP-taksin tekniikkaa. Tämä tekniikka mahdollistaa tuhansien/miljoonien geneettisten varianttien analysoinnin tasaisesti koko genomiin, jolle on karakterisoitu aikaisemmin eri esivanhempien populaatioissa ja läsnä 1000 genomien projektivaiheen 3 tietokannassa.

Näiden geneettisten varianttien (SNP) karakterisointi antaa meille mahdollisuuden laskea kullekin henkilölle tutkimuskohortissa, geneettiset ja polygeeniset riskipisteet, jotka määritetään useiden geneettisten varianttien yhdistetyn vaikutuksen perusteella.

Erityisesti geneettisten ja polygeenisten riskipisteiden määrittäminen suoritetaan käyttämällä genomin laajuisista assosiaatiotutkimuksista (GWAS) saatuja tietoja ja käyttämällä hienostuneita biostatistisia ja matemaattisia algoritmeja painostamaan alleelien määrää MAFLD-patologiaan liittyviä variantteja. Seuraavissa vaiheissa geneettisiä ja polygeenisiä riskipisteitä käytetään tutkimaan assosiaatioita huonosti henkilöiden kliinisiin ominaisuuksiin, jotta voidaan tunnistaa potilaiden alaryhmät, joilla on erottuvat kliiniset ominaisuudet ja ennustaa patologian alkamisriskin.

NutriHep-kohortti (Putignano) perustettiin ensimmäisen kerran vuosina 2006-2007, ja se käsitti 2300 koehenkilön kohortin, joka palautettiin Putignanon kunnan yleislääkärien luetteloista (BA) 1: 3-askeleella.

Vuosina 2015-2018 samat koehenkilöt palautettiin, ja seurannan tarttuminen oli 65,60%. Lisäksi 102 kuolemaa kirjattiin vuosina 2007 - 2014.

Muistutus harkitsee 2300: ta ensimmäisestä aallosta, josta kuolemantapaukset arvioitiin kuoleman rekisteröiden kautta alueellisen edottojärjestelmän kautta ja muille alueille muuttaneet vähennetään.

Lisäksi luodaan sulautettu kohortti tutkimuspopulaation edustavuuden ylläpitämiseksi, joka on otettu 1: 3 -vaiheella yleislääkäreiden rekisteröintien perusteella. Tämä lähestymistapa on hyödyllinen, koska alkuperäinen kohortti on ikääntynyt, joten siihen ei enää sisällä nuorempiin ikäryhmiin kuuluvia henkilöitä, jotka olivat läsnä tutkimuksen alussa, mutta ovat ajan myötä ikääntyneet. Tämä antaa meille mahdollisuuden ylläpitää alkuperäisen ikäryhmän jakautumista, estäen kohortin muuttuvan asteittain vinoutumaan kohti vanhempia ikäryhmiä, samoin kuin vähentämään puolueellisuutta itse kohortin ikääntymisen vuoksi ja tulosten yleistävyyden parantamiseksi. Sen avulla voimme myös säilyttää tutkimuksen tilastollisen voiman, koska etenkin jotkut vanhemmat ikäryhmät ovat kriittisiä altistumisen vaikutusten analysoimiseksi lopputulokseen.

Samanlaisten tapojen kanssa kuin aiemmat, tämä havainnointi keskittyy pääasiassa seuraaviin vaiheisiin:

Alkuvaihe

• Luettelon luominen aiheista, joita kutsutaan, piirtäen sekä NutriHep 1 -tutkimuksen osallistujien nimet että Putignanon kunnan asukkaat yleislääkäreiden luettelon kautta korvaamaan nuoremman ikäryhmän;
• Kohteiden uudelleenytkentäminen edelleen elossa heidän kotiinsa ja puheluihin lähetettyjen kirjeiden kautta;
• Aikataulut.

V1:

• Tietoisen suostumuksen allekirjoittaminen;
• Maksan terveyden arviointi ei-invasiivisella tutkimuksella fibroscanilla;
• Anamnesis, joka perustuu epidemiologisiin parametreihin (ikä, sukupuoli, tulot, patologinen ja maksaan liittyvien sairauksien perhehistoria);
• Antropometristen parametrien, kuten paino, korkeus, vyötärön ympärysmitta, lonkan ympärysmitta, kaulan ympärysmitta, ympärysmieliset, keräys. Lisäksi verenpaineparametrit (systolinen ja diastolinen) ja fyysinen kuntotila tallennetaan seuraavien kenttäkokeiden kautta: kädensija, istu ja saavuta testi, yhden jalan jalusta, 30 '' istua seisomaan, Ruffier -testi, VO2 Max.

Ilmoittautuneille koehenkilöille annetaan kiihtyvyysanturi, joka tarjoaa objektiivista ja luotettavaa tietoa fyysisestä toiminnasta (kiihtyvyydet, liikkeet ...) ja unen laadusta. Se annetaan rekrytointipäivänä ja palautetaan 7 päivän kuluttua.

Ymmärtääksesi paremmin ennen projektin alkamista, näkökohdat, jotka voisivat häiritä ehdotettujen interventioiden onnistumista, koehenkilöt täyttävät lisäkyselyn:

Lisäksi suoritetaan testit unen laadun ja kinesofobian, Pittsburghin unen laatuindeksin (PSQI) ja kinesiofobian (TSK) Tampa -asteikon arvioimiseksi. Sarkopenian luokittelua varten annetaan lyhyt fyysisen suorituskyvyn akku (SPPB); - Verinäytteet rutiinianalyyseihin. Seuraava mitataan näytteillä: täydellinen veren lukumäärä, CRP, kokonaisproteiinit, ceruloplasmiini, alfa 1 -antitryspsiini, glukoosi, hemoglobiini A1C (HBA1C), urea, kreatiniini, arvioitu glomerular -suodatusnopeus (EGFR), kokonais- ja suora bilirubiini, albumiini, aspartti -aminotraanit (asp), aspartini, astfraanit. Aminotransferaasi (ALT/GPT), gamma-glutamyylitransferaasi (GGT), natrium, kalium, kalsium, fosfori, rauta, kolesteroli, korkean tiheyden lipoproteiini (HDL), matalatiheyksinen lipoproteiini (LDL), triglyseridit, cortisol, c-peptidi, vitamiinia, ferritiini, ferritiini B12, parathyroid hormone, Thyroid-Stimulating Hormone (TSH), Free Triiodothyronine (FT3), Free Thyroxine (FT4), Insulin-like Growth Factor 1 (IGF-1), high-sensitivity C-reactive protein (hsCRP), pro-B-type Natriuretic Peptide (proBNP), zinc, magnesium, HBV ja HCV; Seerumin alikvootit, jotka ovat mahdollisesti jäljellä rutiininomaisten verikemian analyysien jälkeen, tallennetaan biopankkiin myöhempiä analyysejä varten ja mahdollisesti kohteen suostumuksella käytetään muihin tutkimuksiin, joita IRCC: t "Saverio de Bellis" aktivoituu.

Genotyyppianalyysit suoritetaan kokoveren alikvooteilla, jotka ovat mahdollisesti myös rutiinianalyysien jälkeen. Nimettömyys taataan määrittämällä potilaalle yksilöivä koodi ilmoittautumishetkellä.

-Itsensä täydentävien kyselylomakkeiden toimittaminen: elintarvikekysely (eeppinen), fyysinen aktiivisuus (IPAQ, pitkä muoto) ja kyselylomakkeet psykologisen terveyden arvioimiseksi: PSS-10 (havaittu stressiasteikko), H.A.D.S. (Sairaalan ahdistus ja masennusasteikko), TMI-I (testaa muisti).

V2 (7 päivää myöhemmin):

• Verikemian testien kerääminen;
• Jakkaran ja virtsanäytteiden toimittaminen. Fekaalinen kalproteektiini ja okkulttinen veri mitataan ulostenäytteissä; Jakkara- ja virtsanäytteet säilytetään myöhemmin biopankissa. Jakkaranäytteitä käytetään suoliston mikrobiotan ja ulosteen metabolin arviointiin. Virtsanäytteitä käytetään metabolomien mittauksiin; Suoliston mikrobiotan arviointia varten kokonaisbakteerien metagenominen DNA uutetaan ulostenäytteistä käyttämällä Qiaamp Fast DNA -jakkarapakkausta (Qiagen, Hilden, Saksa). Mikrobiome -karakterisointi suoritetaan käyttämällä DNA -metabarkoodausta ja haulikko -metatranscriptics -lähestymistapaa. DNA: n metabarkoodausanalyysi suoritetaan käyttämällä 16S rRNA: n V5-V6-hypervariaalialuetta bakteereille (Miseq-Illumina-alusta). Näytteet, jotka ovat merkittäviä DNA: n metabarkoodausanalyysissä, suoritetaan MetaTranScriptics -analyysille (NextSeq 500 - Illumina -alusta). Metagenomiikka- ja metatranscriptics -tiedot analysoidaan bioinformatiikan putkistoilla.

Metabolomitestien suorittamiseksi näytteitä analysoidaan haihtuvien orgaanisten yhdisteiden (VOC) suhteen, jotka desorboivat termisesti siirtämällä kuitu välittömästi Clarus 680: n (Perkin Elmer, Beaconsfield UK) lämmitettyyn injektioporttiin (220 ° C), joka on varustettu RTX-wax-paksun (30 m x 0,25 MM I.D. Yhdistettynä Clarus SQ8MS: ään (Perkin Elmer) lähde- ja siirtolinjan lämpötilaan, jota ylläpidetään vastaavasti 250 ja 210 ° C: ssa.

• Kiihtyvyysmittarin kokoelma;
• Kyselylomakkeiden toimittaminen ja niistä keskustelu väärinkäsitysten ja puuttuvien tietojen välttämiseksi.