Lembre -se de uma coorte de indivíduos na área do Mediterrâneo. Monitoramento de doenças hepáticas (nutrihep 3). (Nutrihep3)

As doenças hepáticas representam um problema significativo de saúde pública, com alta prevalência e uma incidência crescente em todo o mundo, e um impacto significativo na morbimortalidade global, causando aproximadamente 2 milhões de mortes anualmente. As mortes são amplamente atribuíveis às complicações de cirrose e carcinoma hepatocelular. As causas mais comuns de cirrose em todo o mundo estão relacionadas à hepatite viral, álcool e doença hepática gordurosa não alcoólica causada por maus hábitos alimentares. Os vírus hepatotrópicos são o fator etiológico na maioria dos casos de hepatite aguda, mas a lesão hepática induzida por drogas representa cada vez mais uma porcentagem significativa de casos.

Na Itália, a incidência de doenças hepáticas tem sido objeto de estudos nos últimos anos. Com base nesses dados, a Itália foi identificada como uma região "hiper-endêmica", onde as etiologias virais e metabólicas são responsáveis ​​por uma alta prevalência e incidência de doenças hepáticas crônicas. Além disso, foi observado um aumento progressivo na incidência de hepatite viral do norte para o sul da Itália. Nas últimas décadas, a etiologia dessas doenças está passando por uma mudança significativa.

Em relação ao vírus da hepatite B (HBV), o programa de vacinação, juntamente com condições socioeconômicas aprimoradas e maior consciência populacional, reduziu progressivamente a incidência e a prevalência dessa doença viral. A hepatite crônica relacionada ao vírus da hepatite C (HCV), após um aumento nas décadas de 1980 e 1990, agora está mostrando uma tendência decrescente, principalmente entre as faixas etárias mais jovens. Enquanto outros estudos se concentraram em doenças hepáticas de origem metabólica (ASLD, Metald, ALD etc.), que são indicadas como uma das causas mais comuns de doença hepática em todo o mundo e no Itália, os dados epidemiológicos mais recentes sobre a população italiana foram coletados no final dos anos 90. Como já passou uma década, pensava -se que poderia ser interessante coletar novos dados sobre o padrão de prevalência de doenças hepáticas, especialmente no sul da Itália, particularmente em um município geograficamente equidistante da costa e do interior.

Portanto, este estudo observacional visa analisar a evolução das doenças hepáticas, lembrando uma coorte de pacientes já identificados na área do Mediterrâneo. The cohort consists of individuals residing in the municipality of Putignano (BA) who have already undergone evaluation of liver function, comorbidities, and dietary habits, in addition to adding genetic information through genome-wide association (GWAS) analysis, useful for identifying associations between genetic variants and specific phenotypic characteristics with the aim of discovering genetic correlations that can contribute to the molecular understanding of liver diseases and related Comorbidades, usando uma amostra de população representativa.

A análise dos dados coletados visa identificar fatores de risco e biomarcadores preditivos da progressão da doença hepática, com o objetivo de otimizar estratégias de prevenção e gerenciamento. Os resultados fornecerão informações úteis para melhorar a vigilância clínica e promover intervenções personalizadas em indivíduos com doenças hepáticas. As análises serão realizadas usando bioinformática avançada e metodologias estatísticas para garantir a robustez dos resultados.

Este recall será realizado quase 20 anos após o primeiro. O recall dos sujeitos permitirá uma avaliação longitudinal dos fatores de progressão da doença ou o início da doença.

O objetivo deste estudo de coorte não é apenas recordar os sujeitos anteriormente envolvidos nos estudos NUTRIHEP 1 e NUTRIHEP2, mas, como todos os estudos de coorte, para avaliar a associação entre uma exposição e um resultado em um grupo de indivíduos. Além disso, além de reavaliar os parâmetros considerados anteriormente (exames de sangue, questionário dietético e atividade física), a fim de estudar sua variação e a genotipagem de genoma inteiro executará o genotipagem de todo o genotipagem de polimorfismos de nucleotídeos únicos. Essa tecnologia permite a análise de milhares/milhões de variantes genéticas distribuídas uniformemente em todo o genoma, anteriormente caracterizadas em diferentes populações ancestrais e presentes no banco de dados da fase 3 do 1000 Genomes Project.

A caracterização dessas variantes genéticas (SNPs) nos permitirá calcular, para cada sujeito em nossa coorte de estudo, escores de risco genéticos e poligênicos determinados pela influência combinada de múltiplas variantes genéticas.

Especificamente, a determinação dos escores de risco genética e poligênica será realizada usando dados obtidos de estudos de associação em todo o genoma (GWAs) e usando algoritmos bioestatísticos e matemáticos sofisticados para ponderar a contagem de alelos com as variantes associadas à patologia mafld baseada na origem ancestral de nossa coordenação de pacientes. Nas fases subsequentes, os escores de risco genético e poligênico serão usados ​​para estudar as associações com as características clínicas dos indivíduos doentes, a fim de identificar subgrupos de pacientes com características clínicas distintas e prever o risco de início e evolução da patologia.

A coorte Nutrihep (Putignano) foi criada pela primeira vez em 2006-2007, compreendendo uma coorte de 2300 indivíduos, lembrada das listas de clínicos gerais no município de Putignano (BA) com uma etapa de 1: 3.

Em 2015-2018, os mesmos indivíduos foram lembrados, com uma adesão de acompanhamento de 65,60%. Além disso, 102 mortes foram registradas de 2007 a 2014.

O recall considerará o 2300 da 1ª onda, da qual as mortes avaliadas através da consulta dos registros de morte pelo sistema regional de Edotto e aqueles que se mudaram para outras regiões serão subtraídos.

Além disso, uma coorte incorporada será criada para manter a representatividade da população do estudo, extraída com uma etapa de 1: 3 com base nos registros de profissionais gerais. Essa abordagem é útil porque a coorte inicial envelheceu e, portanto, não inclui mais indivíduos pertencentes às faixas etárias mais jovens, que estavam presentes no início do estudo, mas envelheceram ao longo do tempo. Isso nos permite manter a distribuição etária semelhante à inicial, impedindo que a coorte se tornasse progressivamente inclinada para as faixas etárias mais velhas, além de reduzir o viés devido ao envelhecimento da própria coorte e melhorar a generalização dos resultados. Também nos permite preservar o poder estatístico do estudo, porque especialmente algumas faixas etárias mais velhas são críticas para a análise dos efeitos da exposição no resultado.

Com modalidades semelhantes às anteriores, este estudo observacional se concentrará principalmente nas fases a seguir:

Fase inicial

• Criação de uma lista de sujeitos a serem chamados, extraindo dos dois nomes dos participantes do estudo Nutrihep 1 e dos moradores do município de Putignano através da lista de clínicos gerais para compensar a faixa etária mais jovem;
• Re-contactar os assuntos ainda vivos, através de cartas enviadas para sua casa e ligações;
• Agendamento de compromissos.

V1:

• Assinando consentimento informado;
• Avaliação da saúde do fígado através de exame não invasivo com fibroscano;
• Anamnese baseada em parâmetros epidemiológicos (idade, sexo, renda, histórico patológico e familiar de doenças relacionadas ao fígado);
• Coleta de parâmetros antropométricos, como peso, altura, circunferência da cintura, circunferência do quadril, circunferência do pescoço, circunferência do pulso e circunferência da panturrilha. Além disso, os parâmetros da pressão arterial (status sistólicos e diastólicos) e de aptidão física serão registrados nos seguintes testes de campo: Handgrip, sentar e alcançar o teste, suporte de perna única, 30 '' para ficar de pé, teste mais rufado, VO2 máx.

Os sujeitos inscritos receberão um acelerômetro que fornece informações objetivas e confiáveis ​​sobre atividade física (acelerações, movimentos ...) e qualidade do sono. Será dado no dia do recrutamento e retornará após 7 dias.

Para entender melhor, antes do início do projeto, aspectos que podem interferir no sucesso das intervenções propostas, os sujeitos concluirão um questionário adicional:

Além disso, os testes serão concluídos para avaliar a qualidade do sono e a cinepofobia, o Índice de Qualidade do Sono de Pittsburgh (PSQI) e a escala de Kinesiofobia de Tampa (TSK). Para a classificação da sarcopenia, o teste de bateria de desempenho físico curto (SPPB) será administrado; - Amostragem de sangue para análises de rotina. The following will be measured on the samples: complete blood count, CRP, total proteins, ceruloplasmin, alpha 1 antitrypsin, glucose, Hemoglobin A1c (Hba1C), urea, creatinine, Estimated Glomerular Filtration Rate (eGFR), total and direct bilirubin, albumin, Aspartate Aminotransferase (AST/GOT),Alanine Aminotransferase (ALT/GPT), Gamma-Glutamyl Transferase (GGT), sodium, potassium, calcium, phosphorus, iron, cholesterol, High-Density Lipoprotein (HDL), Low-Density Lipoprotein (LDL), triglycerides, cortisol, c-peptide, vitamin D, insulin, ferritin, folate, vitamin B12, Hormônio da paratireóide, hormônio estimulante da tireóide (TSH), triiodotironina livre (FT3), tiroxina livre (FT4), fator de crescimento do tipo insulina (Igf-1), proteína de alta sensibilidade, hscrping (hscrp), provedora-b-b-sinemina, PEC-T-T-Typpen NATRIACTive. HCV; As alíquotas séricas, possivelmente restantes após as análises de química do sangue de rotina, serão armazenadas no biobank para análises subsequentes e, possivelmente, com o consentimento do sujeito, usado para outros estudos que os IRCCs "Saverio de Bellis" serão ativados.

As análises de genotipagem serão realizadas em alíquotas de sangue total, possivelmente permanecendo após análises de rotina. O anonimato será garantido atribuindo um código exclusivo ao paciente no momento da inscrição.

-Entrega de questionários de auto-conclusão: Questionário de alimentos (EPIC), atividade física (IPAQ, forma longa) e questionários para avaliar a saúde psicológica: PSS-10 (Escala de Estresse Percebida), H.A.D.S. (Escala de Ansiedade e Depressão do Hospital), TMI-I (Teste sua memória).

V2 (7 dias depois):

• Coleta de testes de química no sangue;
• Entrega de amostras de fezes e urina. A calprotectina fecal e o sangue oculto serão medidos nas amostras de fezes; As amostras de fezes e urina serão posteriormente armazenadas no biobank. As amostras de fezes serão usadas para a avaliação da microbiota intestinal e do metaboloma fecal. Amostras de urina serão usadas para medições de metabolômica; Para a avaliação da microbiota intestinal, o DNA metagenômico bacteriano total será extraído de amostras de fezes usando o Kit Mini do DNA Fast DNA Qiaamp (Qiagen, Hilden, Alemanha). A caracterização do microbioma será realizada usando uma abordagem de metabarcódio de DNA e metatranscriptômica de espingarda. A análise de metabarcodos do DNA será realizada usando as regiões hipervariáveis ​​V5-V6 do 16S rRNA para bactérias (plataforma MiSeq-ilumina). As amostras que são significativas na análise de metabarcodos do DNA serão submetidas à análise metatranscriptômica (NextSeq 500 - Illumina Platform). Os dados de metagenômica e metatranscriptômica serão analisados ​​usando pipelines de bioinformática.

Para realizar testes de metabolômica, as amostras serão analisadas quanto a compostos orgânicos voláteis (VOCs), que serão desorutos termicamente transferindo imediatamente a fibra para a porta de injeção aquecida (220 ° C) de uma coluna de Clarus 680 (Perkin Elmer, beconsfield) equipada com uma coluna de Wax-Wax (30 mm @lmer, uk). (Restek) e acoplado a um Clarus SQ8MS (Perkin Elmer) com temperaturas de fonte e linha de transferência mantidas a 250 e 210 ° C, respectivamente.

• Coleção do acelerômetro;
• Entrega de questionários e discussão sobre eles para evitar mal -entendidos e dados ausentes.