Tilbakekall av en årskull av forsøkspersoner i Middelhavsområdet. Overvåking av leversykdommer (Nutrihep 3). (Nutrihep3)

Leversykdommer representerer et betydelig folkehelseproblem, med høy forekomst og en økende forekomst over hele verden, og en betydelig innvirkning på global sykelighet og dødelighet, og forårsaker omtrent 2 millioner dødsfall årlig. Dødsfall tilskrives i stor grad komplikasjoner av skrumplever og hepatocellulært karsinom. De vanligste årsakene til skrumplever over hele verden er relatert til viral hepatitt, alkohol og ikke-alkoholisk fet leversykdom forårsaket av dårlige kostholdsvaner. Hepatotropiske virus er den etiologiske faktoren i de fleste tilfeller av akutt hepatitt, men medikamentindusert leverskade representerer i økende grad en betydelig prosentandel av tilfellene.

I Italia har forekomsten av leversykdommer vært gjenstand for studier de siste årene. Basert på disse dataene har Italia blitt identifisert som en "hyper-endemisk" region der både virale og metabolske etiologier er ansvarlige for høy forekomst og forekomst av kroniske leversykdommer. Videre har det blitt observert en progressiv økning i forekomsten av viral hepatitt fra Nord -til Sør -Italia. De siste tiårene har etiologien til disse sykdommene gjennomgått en betydelig endring.

Når det gjelder hepatitt B -virus (HBV), har vaksinasjonsprogrammet, sammen med forbedrede sosioøkonomiske forhold og større befolkningsbevissthet, gradvis redusert forekomsten og utbredelsen av denne virale sykdommen. Kronisk hepatitt relatert til hepatitt C -viruset (HCV), etter en økning på 1980- og 1990 -tallet, viser nå en synkende trend, spesielt blant yngre aldersgrupper. Mens andre studier har fokusert på leversykdommer av metabolsk opprinnelse (ASLD, Metald, ALD, etc.), som er indikert som en av de vanligste årsakene til leversykdom over hele verden og i Italia, ble de siste epidemiologiske dataene angående den italienske befolkningen samlet på slutten av 1990 -tallet. Som et tiår nå har gått, trodde man at det kan være interessant å samle nye data om utbredelsesmønsteret av leversykdommer, spesielt i Sør -Italia, spesielt i en kommune som er geografisk like fra både kysten og innlandet.

Derfor har denne observasjonsstudien som mål å analysere utviklingen av leversykdommer ved å huske en kohort av pasienter som allerede er identifisert i Middelhavsområdet. Kohorten består av individer som er bosatt i Putignano (BA) kommune som allerede har gjennomgått evaluering av leverfunksjon, komorbiditeter og kostholdsvaner, i tillegg til å legge til genetisk informasjon gjennom genom-bredt tilknytning (GWAS), nyttig for å identifisere assosiasjon mellom genetisk korrektning og spesifikk genotypisk analyse med å identifisere lytteren som er mulig å identifisere til å Sykdommer og relaterte komorbiditeter ved bruk av en representativ populasjonsutvalg.

Analysen av de innsamlede dataene tar sikte på å identifisere risikofaktorer og prediktive biomarkører for progresjon av leversykdommer, med målet om å optimalisere forebyggings- og styringsstrategier. Resultatene vil gi nyttig informasjon for å forbedre klinisk overvåking og fremme personlige intervensjoner hos personer med leversykdommer. Analysene vil bli utført ved bruk av avanserte bioinformatikk og statistiske metodologier for å sikre robustheten til resultatene.

Denne tilbakekallingen vil bli utført nesten 20 år etter den første. Tilbakekalling av forsøkspersoner vil gi rom for en langsgående vurdering av sykdomsprogresjonsfaktorer eller begynnelsen av sykdommen.

Målet med denne kohortstudien er ikke bare å huske personer som tidligere er involvert i Nutrihep 1 og Nutrihep2 -studiene, men som alle kohortstudier, for å evaluere assosiasjonen mellom en eksponering og et resultat i en gruppe individer. Videre, i tillegg til å vurdere parametrene som tidligere ble vurdert (blodprøver, kostholdsspørreskjema og fysisk aktivitet) for å studere deres variasjon, og genomgenotyping vil utføre hel-genom-genotyping av enkelt nukleotidpolymorfismer (SNPs) som SNP-teknologi som SNP-teknologi. Denne teknologien gir mulighet for analyse av tusenvis/millioner genetiske varianter jevnt fordelt over hele genomet, tidligere karakterisert i forskjellige forfedrespopulasjoner og til stede i 1000 Genomes Project Phase 3 -databasen.

Karakteriseringen av disse genetiske variantene (SNP) vil tillate oss å beregne, for hvert individ i vår studiekohort, genetiske og polygeniske risikoscore bestemt av den kombinerte påvirkningen av flere genetiske varianter.

Spesifikt vil bestemmelsen av genetiske og polygeniske risikoscore bli utført ved bruk av data oppnådd fra genomomfattende assosiasjonsstudier (GWAS) og ved bruk av sofistikerte biostatistiske og matematiske algoritmer for å vektet allelen teller på variantene assosiert med MAFLD-patologi basert på forfedres opprinnelse til vår pasient kohort. I påfølgende faser vil de genetiske og polygeniske risikoscore bli brukt til å studere assosiasjonene til de kliniske egenskapene til de syke forsøkspersonene for å identifisere undergrupper av pasienter med særegne kliniske egenskaper og forutsi risikoen for begynnelse og utvikling av patologien.

Nutrihep-kohorten (Putignano) ble først opprettet i 2006-2007, og omfattet en kohort på 2300 fag, husket fra listene over allmennleger i kommunen Putignano (BA) med et 1: 3-trinn.

I 2015-2018 ble de samme forsøkspersonene tilbakekalt, med en oppfølging på 65,60%. Videre ble 102 dødsfall registrert fra 2007 til 2014.

Tilbakekallingen vil vurdere 2300 fra den første bølgen, hvorfra dødsfallene evaluert gjennom konsultasjon av dødsregistrene via det regionale Edotto -systemet, og de som flyttet til andre regioner vil bli trukket fra.

Videre vil det bli opprettet en innebygd kohort for å opprettholde representativiteten til studiepopulasjonen, trukket ut med et 1: 3 -trinn basert på registreringer av allmennleger. Denne tilnærmingen er nyttig fordi den innledende kohorten har eldet og derfor ikke lenger inkluderer individer som tilhører de yngre aldersgruppene, som var til stede i begynnelsen av studien, men har eldet over tid. Dette gjør at vi kan opprettholde aldersfordelingen som ligner på den første, og forhindrer at kohorten blir gradvis skjev mot eldre aldersgrupper, samt reduserer skjevheten på grunn av aldring av selve kohorten og forbedrer resultatene av resultatene. Det lar oss også bevare den statistiske kraften til studien, fordi spesielt noen eldre aldersgrupper er kritiske for analysen av effekten av eksponering på utfallet.

Med lignende modaliteter som de tidligere, vil denne observasjonsstudien hovedsakelig fokusere på følgende faser:

Innledende fase

• Opprettelse av en liste over emner som skal kalles, og trekker fra begge navnene på deltakerne i Nutrihep 1 -studien og innbyggerne i kommunen Putignano gjennom listen over allmennleger for å kompensere for den yngre aldersgruppen;
• Omtale motivene som fortsatt er i live, gjennom brev sendt til hjemmet og samtalene;
• Planlegging av avtaler.

V1:

• Signerer informert samtykke;
• Evaluering av leverhelse gjennom ikke-invasiv undersøkelse med Fibroscan;
• Anamnesis basert på epidemiologiske parametere (alder, kjønn, inntekt, patologisk og familiehistorie med leverrelaterte sykdommer);
• Innsamling av antropometriske parametere som vekt, høyde, midjeomkrets, hofteomkrets, nakkeomkrets, håndleddsomkrets og leggomkrets. Videre vil blodtrykksparametere (systolisk og diastolisk) og fysisk kondisjonsstatus bli registrert gjennom følgende feltprøver: håndtak, sit og rekkevidde, enkelt benstativ, 30 '' sitte til å stå, ruffier test, vo2 maks.

Påmeldte fag vil få et akselerometer som gir objektiv og pålitelig informasjon om fysisk aktivitet (akselerasjoner, bevegelser ...) og søvnkvalitet. Det vil bli gitt på rekrutteringsdagen og returneres etter 7 dager.

For bedre å forstå, før prosjektets start, aspekter som kan forstyrre suksessen med de foreslåtte intervensjonene, vil forsøkspersonene fylle ut et ekstra spørreskjema:

Videre vil tester bli fullført for å evaluere søvnkvalitet og kinesofobi, Pittsburgh Sleep Quality Index (PSQI) og Tampa -skalaen til Kinesiophobia (TSK). For klassifisering av sarkopeni vil den korte fysiske ytelsesbatteriet (SPPB) -testen bli administrert; - Blodprøvetaking for rutinemessige analyser. Følgende vil bli målt på prøvene: fullstendig blodtelling, CRP, totale proteiner, ceruloplasmin, alfa 1 antitrypsin, glukose, hemoglobin A1c (HBA1c), urea, kreatinin, estimert, alomerulær filtrasjon (EGFR), Total og Direct Bilirubin, Albalanulary Filtration Aminotransferase (ALT/GPT), gamma-glutamyltransferase (GGT), natrium, kalium, kalsium, fosfor, jern, kolesterol, høy tetthet, lipoprotein (hdl), Folat, k-tetthet, c-pptidin (LDL), trigin, kortisol, k-peptein B12, parathyroid hormone, Thyroid-Stimulating Hormone (TSH), Free Triiodothyronine (FT3), Free Thyroxine (FT4), Insulin-like Growth Factor 1 (IGF-1), high-sensitivity C-reactive protein (hsCRP), pro-B-type Natriuretic Peptide (proBNP), zinc, Magnesium, HBV og HCV; Serumalikvoter, muligens igjen etter rutinemessige blodkjemi -analyser, vil bli lagret i biobanken for påfølgende analyser og muligens, med motivets samtykke, brukt til andre studier som IRCCS "Saverio de Bellis" vil aktivere.

Genotypinganalyser vil bli utført på helblods alikvoter, også muligens igjen etter rutinemessige analyser. Anonymitet vil bli garantert ved å tilordne en unik kode til pasienten på påmeldingstidspunktet.

-Levering av spørreskjemaer for selvkontrollering: Food Questionnaire (EPIC), fysisk aktivitet (IPAQ, lang form) og spørreskjemaer for å vurdere psykologisk helse: PSS-10 (opplevd stressskala), H.A.D.S. (Hospital Angst and Depression Scale), TMI-I (Test minnet).

V2 (7 dager senere):

• Innsamling av blodkjemi -tester;
• Levering av avføring og urinprøver. Fekalt kalprotectin og okkult blod vil bli målt på avføringsprøvene; Avføring og urinprøver vil deretter lagres i biobanken. Avføringsprøver vil bli brukt til evaluering av tarmmikrobiota og fekal metabolom. Urinprøver vil bli brukt til metabolomics målinger; For evaluering av tarmmikrobiota vil total bakteriell metagenomisk DNA bli trukket ut fra avføringsprøver ved bruk av QIAamp Fast DNA -avføring mini -sett (Qiagen, Hilden, Tyskland). Mikrobiomekarakterisering vil bli utført ved hjelp av en DNA -metabarkoding og haglegeværmetatranscriptomics -tilnærming. DNA-metabarcoding-analyse vil bli utført ved bruk av V5-V6 hypervariable regioner av 16S rRNA for bakterier (MiSeq-Illumina-plattformen). Prøver som er signifikante i DNA -metabarkodingsanalysen vil bli utsatt for metatranscriptomics -analyse (NextSeq 500 - Illumina Platform). Metagenomics and Metatranscriptomics Data vil bli analysert ved bruk av bioinformatikk -rørledninger.

For å utføre metabolomics-tester, vil prøver bli analysert for flyktige organiske forbindelser (VOC) som vil bli termisk desorbert ved umiddelbart å overføre fiberen til den oppvarmede injeksjonsporten (220 ° C) av en Clarus 680 (Perkin Elmer, Beaconsfield UK) med en RTX-wax-wax-kolonn (30 mm. (Restek) og koblet til en Clarus Sq8ms (Perkin Elmer) med kilde- og overføringslinketemperaturer som er opprettholdt ved henholdsvis 250 og 210 ° C.

• Innsamling av akselerometeret;
• Levering av spørreskjemaer og diskusjon av dem for å unngå misforståelser og manglende data.