RICHIAMO di una coorte di soggetti nell'area mediterranea. Monitoraggio delle malattie epatiche (Nutrihep 3). (Nutrihep3)

Le malattie del fegato rappresentano un significativo problema di salute pubblica, con un'alta prevalenza e una crescente incidenza in tutto il mondo e un impatto significativo sulla morbilità e sulla mortalità globali, causando circa 2 milioni di decessi all'anno. I decessi sono in gran parte attribuibili alle complicanze della cirrosi e del carcinoma epatocellulare. Le cause più comuni di cirrosi in tutto il mondo sono correlate all'epatite virale, alcol e malattia epatica grassa non alcolica causata da cattive abitudini alimentari. I virus epatotropi sono il fattore eziologico nella maggior parte dei casi di epatite acuta, ma la lesione epatica indotta da farmaci rappresenta sempre più una percentuale significativa di casi.

In Italia, l'incidenza delle malattie epatiche è stata oggetto di studi negli ultimi anni. Sulla base di questi dati, l'Italia è stata identificata come una regione "iper-endemica" in cui etiologie virali e metaboliche sono responsabili di un'alta prevalenza e incidenza di malattie epatiche croniche. Inoltre, è stato osservato un progressivo aumento dell'incidenza dell'epatite virale dall'Italia settentrionale a sud. Negli ultimi decenni, l'eziologia di queste malattie è stata sottoposta a un cambiamento significativo.

Per quanto riguarda il virus dell'epatite B (HBV), il programma di vaccinazione, insieme a condizioni socioeconomiche migliorate e una maggiore consapevolezza della popolazione, hanno progressivamente ridotto l'incidenza e la prevalenza di questa malattia virale. L'epatite cronica correlata al virus dell'epatite C (HCV), dopo un aumento degli anni '80 e '90, sta ora mostrando una tendenza decrescente, in particolare tra i gruppi di età più giovani. Mentre altri studi si sono concentrati sulle malattie epatiche dell'origine metabolica (ASLD, Metald, ALD, ecc.), Che sono indicate come una delle cause più comuni di malattie epatiche in tutto il mondo e in Italia, i più recenti dati epidemiologici riguardanti la popolazione italiana sono stati raccolti alla fine degli anni '90. Poiché è passato un decennio, si pensava che potesse essere interessante raccogliere nuovi dati sul modello di prevalenza delle malattie epatiche, in particolare nell'Italia meridionale, in particolare in un comune geograficamente equidistante sia dalla costa e dall'entroterra.

Pertanto, questo studio osservazionale mira ad analizzare l'evoluzione delle malattie epatiche ricordando una coorte di pazienti già identificati nell'area mediterranea. La coorte è costituita da individui che risiedono nel comune di Putignano (BA) che hanno già subito una valutazione della funzione epatica, delle comorbidità e delle abitudini alimentari, oltre ad aggiungere informazioni genetiche attraverso l'analisi di Associazione Genoma (GWAS). e comorbidità correlate, utilizzando un campione di popolazione rappresentativa.

L'analisi dei dati raccolti mira a identificare i fattori di rischio e i biomarcatori predittivi della progressione delle malattie epatiche, con l'obiettivo di ottimizzare le strategie di prevenzione e gestione. I risultati forniranno informazioni utili per migliorare la sorveglianza clinica e promuovere interventi personalizzati nelle persone con malattie epatiche. Le analisi saranno condotte utilizzando bioinformatica avanzata e metodologie statistiche per garantire la solidità dei risultati.

Questo richiamo verrà eseguito quasi 20 anni dopo il primo. Il richiamo dei soggetti consentirà una valutazione longitudinale dei fattori di progressione della malattia o l'insorgenza della malattia.

Lo scopo di questo studio di coorte non è solo quello di ricordare soggetti precedentemente coinvolti negli studi Nutrihep 1 e Nutrihep2, ma, come tutti gli studi di coorte, di valutare l'associazione tra un'esposizione e un risultato in un gruppo di individui. Inoltre, oltre a rivalutare i parametri precedentemente considerati (esami del sangue, questionario dietetico e attività fisica) al fine di studiare la loro variazione e il genotipizzazione del genoma intero eseguirà il genotipizzazione del genoma intero di polimorfismi a singolo nucleotide (SNP) verranno eseguiti usando tecnologie genomiche ad alto contenuto Questa tecnologia consente l'analisi di migliaia/milioni di varianti genetiche distribuite uniformemente in tutto il genoma, precedentemente caratterizzate in diverse popolazioni ancestrali e presenti nel database di fase 3 del progetto 1000 genomi.

La caratterizzazione di queste varianti genetiche (SNP) ci consentirà di calcolare, per ogni soggetto nella nostra coorte di studio, punteggi di rischio genetico e poligenico determinato dall'influenza combinata di più varianti genetiche.

In particolare, la determinazione dei punteggi di rischio genetico e poligenico verrà eseguita utilizzando i dati ottenuti da studi di associazione a livello del genoma (GWAS) e utilizzando sofisticati algoritmi biostatistici e matematici per pesare gli alleli conta sulle varianti associate alla patologia MAFLD in base all'origine ancestrale. Nelle fasi successive, i punteggi di rischio genetico e poligenico saranno utilizzati per studiare le associazioni con le caratteristiche cliniche dei soggetti ilarli al fine di identificare i sottogruppi di pazienti con caratteristiche cliniche distintive e prevedere il rischio di insorgenza e evoluzione della patologia.

La coorte Nutrihep (Putignano) è stata istituita per la prima volta nel 2006-2007, comprendente una coorte di 2300 soggetti, ricordata dagli elenchi dei medici di medicina generale nel comune di Putignano (BA) con una fase di 1: 3.

Nel 2015-2018, sono stati richiamati gli stessi soggetti, con una aderenza di follow-up del 65,60%. Inoltre, 102 decessi sono stati registrati dal 2007 al 2014.

Il richiamo prenderà in considerazione i 2300 dalla prima ondata, da cui i decessi valutati attraverso la consultazione dei registri della morte tramite il sistema Edotto regionale e coloro che si sono trasferiti in altre regioni saranno sottratti.

Inoltre, verrà creata una coorte incorporata per mantenere la rappresentatività della popolazione di studio, estratta con un passo 1: 3 basato sulle registrazioni dei medici di medicina generale. Questo approccio è utile perché la coorte iniziale ha invecchiato e quindi non include più individui appartenenti alle fasce di età più giovani, che erano presenti all'inizio dello studio ma hanno invecchiato nel tempo. Ciò ci consente di mantenere la distribuzione dell'età simile a quella iniziale, impedendo alla coorte di diventare progressivamente distorta verso gruppi di età più anziani, oltre a ridurre la distorsione a causa dell'invecchiamento della coorte stessa e migliorare la generalizzabilità dei risultati. Ci consente inoltre di preservare il potere statistico dello studio, poiché in particolare alcune fasce di età più avanzata sono fondamentali per l'analisi degli effetti dell'esposizione sul risultato.

Con modalità simili a quelle precedenti, questo studio osservazionale si concentrerà principalmente sulle seguenti fasi:

Fase iniziale

• Creazione di un elenco di soggetti da chiamare, attingendo sia dai nomi dei partecipanti allo studio Nutrihep 1 che dai residenti del comune di Putignano attraverso l'elenco dei medici di medicina generale per compensare la fascia di età più giovane;
• Ricontattando i soggetti ancora vivi, attraverso lettere inviate a casa e chiamate;
• Programmazione degli appuntamenti.

V1:

• Firmare il consenso informato;
• Valutazione della salute del fegato attraverso un esame non invasivo con fibroscan;
• Anamnesi basata su parametri epidemiologici (età, genere, reddito, storia patologica e familiare delle malattie legate al fegato);
• Raccolta di parametri antropometrici come peso, altezza, circonferenza della vita, circonferenza dell'anca, circonferenza del collo, circonferenza del polso e circonferenza del vitello. Inoltre, i parametri della pressione sanguigna (sistolica e diastolica) e lo stato di idoneità fisica saranno registrati attraverso i seguenti test sul campo: impianto di mano: test, siediti e raggiungimento, supporto per gamba singola, da 30 '' sedersi, test ruffier, vo2 max.

Ai soggetti iscritti verrà fornito un accelerometro che fornisce informazioni oggettive e affidabili sull'attività fisica (accelerazioni, movimenti ...) e qualità del sonno. Sarà dato il giorno del reclutamento e restituito dopo 7 giorni.

Per capire meglio, prima dell'inizio del progetto, aspetti che potrebbero interferire con il successo degli interventi proposti, i soggetti completeranno un ulteriore questionario:

Inoltre, saranno completati i test per valutare la qualità del sonno e la kinesophobia, l'indice di qualità del sonno di Pittsburgh (PSQI) e la scala Tampa di Kinesiofobia (TSK). Per la classificazione della sarcopenia, verrà somministrato il test di batteria fisica (SPPB) a breve durata; - Campionamento del sangue per analisi di routine. Di seguito verranno misurati i seguenti campioni: emocromo completo, CRP, proteine ​​totali, ceruloplasmina, antitrypsina alfa 1, glucosio, emoglobina A1c (HbA1c), urea, creatinina, tasso di filtrazione alandese stimata (eglomerulare (EGFR) (EGFR), tasso di filtrazione alandese stimata (AST/). Aminotransferase (ALT/GPT), Gamma-Glutamyl Transferase (GGT), sodium, potassium, calcium, phosphorus, iron, cholesterol, High-Density Lipoprotein (HDL), Low-Density Lipoprotein (LDL), triglycerides, cortisol, c-peptide, vitamin D, insulin, ferritin, folate, vitamin B12, Ormone paratiroideo, ormone stimolante la tiroide (TSH), triiodotironina libera (FT3), tiroxina libera (FT4), fattore di crescita simile a insulina 1 (IGF-1), proteina C-reattiva ad alta sensibilità e magnetium, magnetium, magnetium, magneium, magneium, magneium, magneium, magneium, magneium, magneium, magneium e proteina HBV e HCV; Le aliquote sieriche, probabilmente rimaste dopo le analisi di chimica del sangue di routine, saranno conservate nella biobanca per le analisi successive e possibilmente, con il consenso del soggetto, utilizzate per altri studi che gli IRCC "Saverio de Bellis" attiveranno.

Le analisi della genotipizzazione verranno effettuate su aliquote di sangue intero, probabilmente rimaste anche dopo analisi di routine. L'anonimato sarà garantito assegnando un codice univoco al paziente al momento dell'iscrizione.

-Consegna di questionari di auto-completamento: questionario alimentare (EPIC), attività fisica (IPAQ, forma lunga) e questionari per valutare la salute psicologica: PSS-10 (Scala dello stress percepita), H.A.D.S. (Scala dell'ansia e della depressione dell'ospedale), TMI-I (testare la memoria).

V2 (7 giorni dopo):

• Raccolta di test di chimica del sangue;
• Consegna di campioni di feci e urine. La calprotectina fecale e il sangue occulto saranno misurati sui campioni di feci; I campioni di feci e urine saranno successivamente conservati nella biobanca. I campioni di feci verranno utilizzati per la valutazione del microbiota intestinale e del metaboloma fecale. I campioni di urina verranno utilizzati per le misurazioni della metabolomica; Per la valutazione del microbiota intestinale, il DNA metagenomico batterico totale verrà estratto da campioni di feci usando il mini sgabello DNA Qiaamp Fast (Qiagen, Hilden, Germania). La caratterizzazione del microbioma verrà effettuata utilizzando un approccio metatranscriptomica del metabarcodifica del DNA e del fucile da caccia. L'analisi del metabarcodifica del DNA verrà condotta utilizzando le regioni ipervariabili V5-V6 di rRNA 16S per batteri (piattaforma MISEQ-Illumina). I campioni che sono significativi nell'analisi del metabarcodifica del DNA saranno sottoposti all'analisi metatranscriptomics (Piattaforma NextSeq 500 - Illumina). I dati di metagenomica e metatranscriptomics saranno analizzati utilizzando pipeline bioinformatiche.

Per eseguire test di metabolomica, i campioni verranno analizzati per composti organici volatili (COV) che verranno termicamente desorbiti trasferendo immediatamente la fibra nella porta di iniezione riscaldata (220 ° C) di un Clarus 680 (Film di Perkin, Beaconsfield) dotato di una colonna RTX-wax (30 m × 0.25 I.D. Abbinato a un Clarus SQ8MS (Perkin Elmer) con temperature di fonte e linea di trasferimento mantenute rispettivamente a 250 e 210 ° C.

• Raccolta dell'accelerometro;
• Consegna di questionari e discussioni su di essi per evitare incomprensioni e dati mancanti.