Emlékezzen a mediterrán térségben lévő alanyok csoportjára. A májbetegségek monitorozása (Nutrihep 3). (Nutrihep3)

A májbetegségek jelentős közegészségügyi problémát jelentenek, magas prevalenciával és növekvő incidenciával, valamint a globális morbiditásra és halálozásra gyakorolt ​​jelentős hatással, évente körülbelül 2 millió halálesetet okozva. A halálesetek nagyrészt a cirrhosis és a hepatocellularis carcinoma szövődményeinek tulajdoníthatók. A cirrhosis leggyakoribb okai világszerte a vírusos hepatitis, az alkohol és az alkoholmentes zsíros májbetegség, amelyet a rossz étkezési szokások okoznak. A hepatotropikus vírusok az etiológiai tényező a legtöbb akut hepatitis esetében, de a gyógyszer által kiváltott májkárosodás egyre inkább az esetek jelentős százalékát képviseli.

Olaszországban a májbetegségek előfordulási gyakoriságát az utóbbi években vizsgálják. Ezen adatok alapján Olaszországot "hiper-endemikus" régióként azonosították, ahol mind a vírusos, mind a metabolikus etiológiák felelősek a krónikus májbetegségek magas prevalenciájáért és előfordulásáért. Ezenkívül megfigyelték a vírusos hepatitis előfordulásának fokozatos növekedését Észak -Olaszországból Dél -Olaszországig. Az utóbbi évtizedekben ezen betegségek etiológiája jelentős változáson ment keresztül.

A Hepatitis B vírus (HBV) vonatkozásában a vakcinázási program, valamint a jobb társadalmi -gazdasági állapotok és a nagyobb népesség -tudatosság fokozatosan csökkentette ennek a vírusos betegségnek az előfordulását és prevalenciáját. A hepatitis C vírussal (HCV) kapcsolódó krónikus hepatitis, az 1980 -as és 1990 -es évek növekedése után, most csökkenő tendenciát mutat, különösen a fiatalabb korcsoportok körében. Míg más tanulmányok a metabolikus eredetű májbetegségekre (ASLD, METALD, ALD stb.) Fókuszáltak, amelyeket világszerte és Olaszországban a májbetegség egyik leggyakoribb okaként jeleztek, az olasz népességre vonatkozó legfrissebb epidemiológiai adatokat az 1990 -es évek végén gyűjtötték. Ahogy egy évtized telt el, azt gondolták, hogy érdekes lehet új adatokat gyűjteni a májbetegségek prevalencia mintájáról, különösen Dél -Olaszországban, különösen a földrajzilag egyenlő távolságban lévő önkormányzatban mind a parttól, mind a hátsó területen.

Ezért ez a megfigyelési tanulmány célja a májbetegségek fejlődésének elemzése azáltal, hogy visszahívja a mediterrán területen már azonosított betegek csoportját. A kohorsz a Putignano önkormányzatban (BA) lakó személyekből áll, akik már átmentek a májfunkció, a komorbiditások és az étkezési szokások értékelésén, amellett, hogy a genetikai információkat a genomszintű asszociáció révén adják hozzá, a genetikai változatok és a konkrét fenotípusos jellemzők felfedezésével járó genetikus korrelációk azonosításához hasznosak, és a molekuláris megértéshez hozzájárulhatnak, és a molekuláris megértéshez hozzájárulhatnak a molekuláris megértéshez. Komorbiditások, reprezentatív populációs minta felhasználásával.

Az összegyűjtött adatok elemzése célja a kockázati tényezők és a májbetegség előrehaladásának prediktív biomarkereinek azonosítása, azzal a céllal, hogy optimalizálja a megelőzési és kezelési stratégiákat. Az eredmények hasznos információkat nyújtanak a klinikai megfigyelés javítása és a személyre szabott beavatkozások elősegítése érdekében a májbetegségben szenvedő egyénekben. Az elemzéseket fejlett bioinformatikai és statisztikai módszertan felhasználásával végezzük az eredmények robusztusságának biztosítása érdekében.

Ezt a visszahívást majdnem 20 évvel az első után hajtják végre. Az alanyok visszahívása lehetővé teszi a betegség progressziós tényezőinek longitudinális értékelését vagy a betegség kialakulását.

Ennek a kohorsz -tanulmánynak a célja nemcsak a Nuthihep 1 és a Nutrihep2 vizsgálatokban korábban részt vevő alanyok visszahívása, hanem az összes kohort -tanulmányhoz hasonlóan az expozíció és az egyének egy csoportjának kimenetele közötti összefüggés értékelése. Ezenkívül a korábban figyelembe vett paraméterek (vérvizsgálatok, étrendi kérdőív és fizikai aktivitás) újraértékelése mellett azok variációjának tanulmányozása érdekében, és a teljes genom genotípusának teljes genom genotípusának teljes genotípusának (SNP-k) teljes körű genotípusának, például SNP-irányítású technológiák felhasználásával hajtják végre. Ez a technológia lehetővé teszi, hogy több ezer/millió genetikai variáns elemzést végezzen az egész genomban, amelyet korábban különböző ősi populációkban jellemeznek és az 1000 Genomes projekt 3. fázisú adatbázisában jelennek meg.

Ezen genetikai variánsok (SNP) jellemzése lehetővé teszi számunkra, hogy a vizsgálati kohortunkban szereplő egyes alanyok esetében a több genetikai variáns együttes hatása által meghatározott genetikai és poligén kockázati pontszámok.

Pontosabban, a genetikai és a poligén kockázati pontszámok meghatározását a genomszintű asszociációs vizsgálatokból (GWAS) kapott adatok felhasználásával végezzük, és kifinomult biostatisztikai és matematikai algoritmusok felhasználásával az allélok súlyát figyelembe veszik a MAFLD patológiájához kapcsolódó variánsokhoz, amelyek a betegek válogatásának ősi eredetén alapulnak. A későbbi szakaszokban a genetikai és a poligén kockázati pontszámokat felhasználják a betegek klinikai jellemzőivel való asszociációk tanulmányozására annak érdekében, hogy azonosítsák a megkülönböztető klinikai jellemzőkkel rendelkező betegek alcsoportjait, és megjósolják a patológia kialakulásának és fejlődésének kockázatát.

A Nutrihep kohortot (Putignano) először 2006-2007-ben hozták létre, amely 2300 alanyból álló kohortból áll, amelyet a Putignano önkormányzati (BA) közgyógyászok listájából emlékeztettek 1: 3 lépéssel.

2015-2018-ban ugyanazokat a tantárgyakat hívták vissza, 65,60%-os nyomon követéssel. Ezenkívül 102 halálesetet regisztráltak 2007 és 2014 között.

A visszahívás megvizsgálja az 1. hullámból származó 2300 -at, ahonnan a halálesetek a halálos nyilvántartások konzultációján keresztül értékeltek a regionális Edotto rendszeren keresztül, és azokat, akik más régiókba költöztek, kivonják.

Ezenkívül beágyazott kohortot hoznak létre a vizsgálati populáció reprezentativitásának fenntartására, amelyet 1: 3 lépéssel extrahálnak a háziorvosok regisztrációja alapján. Ez a megközelítés azért hasznos, mert a kezdeti kohorsz öregszik, és ezért már nem tartozik a fiatalabb korcsoportokhoz tartozó személyek, amelyek a vizsgálat elején voltak, de idővel öregedtek. Ez lehetővé teszi számunkra, hogy fenntartsuk a kezdetihez hasonló életkor -eloszlást, megakadályozva, hogy a kohorsz fokozatosan torzuljon az idősebb korcsoportok felé, és csökkentse az elfogultságot a kohort öregedése miatt, és javítsa az eredmények általánosíthatóságát. Ez lehetővé teszi a tanulmány statisztikai erejének megőrzését is, mivel különösen néhány idősebb korcsoport kritikus fontosságú az expozíció eredményre gyakorolt ​​hatásainak elemzéséhez.

Az előzőekhez hasonló módszerekkel ez a megfigyelési tanulmány elsősorban a következő szakaszokra összpontosít:

Kezdeti szakasz

• A meghívni kívánt alanyok listájának létrehozása, a Nutrihep 1 tanulmány résztvevőinek mindkét nevéből, mind a Putignano önkormányzat lakosaiból a háziorvosok listáján keresztül, hogy kompenzálják a fiatalabb korosztályt;
• A még életben még életben lévő alanyok újbóli érintkezése, otthonukba küldött levelek és hívások révén;
• A kinevezések ütemezése.

V1:

• Tájékozott beleegyezés aláírása;
• A máj egészségének értékelése a Fibroscan-nal végzett nem invazív vizsgálat révén;
• Anamitezis epidemiológiai paramétereken alapul (életkor, nem, jövedelem, kóros és családi kórtörténet a májhoz kapcsolódó betegségek);
• Az antropometrikus paraméterek, például a súly, a magasság, a derék kerülete, a csípő kerülete, a nyak kerülete, a csukló kerülete és a borjú kerületének gyűjtése. Ezenkívül a vérnyomás -paramétereket (szisztolés és diasztolés) és a fizikai fitnesz állapotát a következő terepi tesztek segítségével rögzítik: Kézgrip, ülés és elérés teszt, egy lábállvány, 30 '' Álljon, Ruffier teszt, VO2 Max.

A beiratkozott alanyok gyorsulásmérővel kapnak, amely objektív és megbízható információkat szolgáltat a fizikai aktivitásról (gyorsulás, mozgások ...) és az alvásminőségről. A toborzás napján adják meg, és 7 nap után visszatérnek.

A projekt megkezdése előtt, a javasolt beavatkozások sikeréhez zavaró szempontok jobb megértése érdekében az alanyok további kérdőívet töltenek be:

Ezenkívül a tesztek befejeződnek az alvásminőség és a kineziofóbia, a Pittsburgh Sleep Quality Index (PSQI) és a Kinesiophobia (TSK) Tampa skálájának értékelésére. A szarkopenia osztályozásához a rövid fizikai teljesítményű akkumulátor (SPPB) tesztet kell elvégezni; - Vérmintavétel a rutin elemzésekhez. A mintákon az alábbiakat mérjük: teljes vérszám, CRP, összes fehérjék, ceruloplasmin, alfa 1 antitripszin, glükóz, hemoglobin A1C (HbA1c), karbamid, kreatinin, becsült glomeruláris szűrési sebesség (EGFR), összes és közvetlen bilirubin, albumin, albumin, albumin, albumin, albumin, albumin, albumin, albumin, albumin, albumin, albumin, albumin, albumin, albumin, albumin, albumin, albumin, albumin, albumin, albumin, albumin, albumin, albumin, albumin, albumin, albumin, az aminotranszferáz (AST/GOT) Amin, amin. (ALT/GPT), gamma-glutamil-transzferáz (GGT), nátrium, kálium, kalcium, foszfor, vas, koleszterin, nagy sűrűségű lipoprotein (HDL), alacsony sűrűségű lipoprotein (LDL), triglicinridek, kortizol, cpeptid, vitamin D, insulin, ferritin, folezin, vitamin, cortizol, ppeptid, vitamin D, insulin, ferritin, fatolamin b12 Pajzsmirigy-stimuláló hormon (TSH), szabad triiodotironin (FT3), szabad tiroxin (FT4), inzulin-szerű növekedési faktor (IGF-1), nagyérzékenységű C-reaktív protein (HSCRP), pro-b-type natriuretic peptid (probnp), zinc, magnezium, hbv; hbv; A szérum aliquot részeket, amelyek esetleg a rutin vérkémiai elemzések után megmaradnak, a biobankban tárolják a későbbi elemzéseket, és valószínűleg az alany hozzájárulásával más tanulmányokhoz használják, amelyeket az IRCCS "Saverio de Bellis" aktivál.

A genotípus -elemzéseket a teljes vér alikvot részeivel végezzük, valószínűleg a rutin elemzések után is megmaradnak. Az anonimitást garantálják, ha a beiratkozáskor egyedi kódot rendelnek a beteghez.

-Az önkormányzati kérdőívek kézbesítése: Élelmiszer-kérdőív (EPIC), fizikai aktivitás (IPAQ, hosszú forma) és kérdőívek a pszichológiai egészség felmérésére: PSS-10 (észlelt stressz skála), H.A.D.S. (Kórházi szorongás és depressziós skála), TMI-I (tesztelje a memóriáját).

V2 (7 nappal később):

• Vérkémiai tesztek gyűjtése;
• A széklet és a vizeletminták szállítása. A székletmintákon mérik a széklet -kalprotektint és az okkult vért; A széklet- és vizeletmintákat később a biobankban tárolják. A székletmintákat a bél mikrobiota és a széklet metabolomjának értékelésére használják. A vizeletmintákat a metabolomikai mérésekhez használják; A bél mikrobiota értékeléséhez az összes baktérium -metagenomikus DNS -t a székletmintákból extrahálják a Qiaamp gyors DNS széklet mini készlettel (Qiagen, Hilden, Németország). A mikrobioma jellemzését DNS metabarkódolással és a pisztoly metatranscriptomics megközelítésével hajtják végre. A DNS-metabarkódolási analízist a 16S rRNS V5-V6 hipervariable régiói (MISEQ-Illumina platform) felhasználásával végezzük. A DNS -metabarkódolási elemzésben szignifikáns mintákat metatranscriptomics analízisnek vetik alá (Nextseq 500 - Illumina platform). A metagenomikát és a metatranscriptomics adatokat bioinformatikai csővezetékek segítségével elemezzük.

A metabolomikai tesztek elvégzéséhez a mintákat elemezzük illékony szerves vegyületek (VOC) esetében, amelyek termikusan deszorálódnak azáltal, hogy azonnal áthelyezik a rostot egy Clarus 680 (Perkin Elmer, Beagonsfield UK) fűtött injekciós oszlop (30 m × 0,25 mm, 0,25 µm) fűtött injekciós portjába (30 m × 0,25 mm, 0,25 µm). Egy Clarus SQ8MS -hez (Perkin Elmer) kapcsolt, a forrás- és az átviteli vonal hőmérséklete 250, illetve 210 ° C -on.

• A gyorsulásmérő gyűjtése;
• A kérdőívek kézbesítése és azok megbeszélése a félreértések és a hiányzó adatok elkerülése érdekében.