Herinnering aan een cohort van onderwerpen in het Middellandse Zeegebied. Monitoring van leverziekten (NutriHep 3). (Nutrihep3)

Leverziekten vormen een aanzienlijk probleem van de volksgezondheid, met een hoge prevalentie en een groeiende incidentie wereldwijd, en een aanzienlijke impact op de wereldwijde morbiditeit en mortaliteit, wat jaarlijks ongeveer 2 miljoen doden veroorzaakt. Sterfgevallen zijn grotendeels te wijten aan complicaties van cirrose en hepatocellulair carcinoom. De meest voorkomende oorzaken van cirrose wereldwijd zijn gerelateerd aan virale hepatitis, alcohol en niet-alcoholische leververvetting veroorzaakt door slechte voedingsgewoonten. Hepatotrope virussen zijn de etiologische factor in de meeste gevallen van acute hepatitis, maar door geneesmiddelen geïnduceerde leverbeschadiging vertegenwoordigt in toenemende mate een aanzienlijk percentage van de gevallen.

In Italië is de incidentie van leverziekten de afgelopen jaren het onderwerp geweest van studies. Op basis van deze gegevens is Italië geïdentificeerd als een "hyper-endemisch" gebied waar zowel virale als metabole etiologieën verantwoordelijk zijn voor een hoge prevalentie en incidentie van chronische leverziekten. Bovendien is een progressieve toename van de incidentie van virale hepatitis uit het noorden tot Zuid -Italië waargenomen. In de afgelopen decennia heeft de etiologie van deze ziekten een belangrijke verandering ondergaan.

Wat betreft het hepatitis B -virus (HBV), hebben het vaccinatieprogramma, samen met verbeterde sociaaleconomische aandoeningen en een groter bevolkingsbewustzijn, de incidentie en prevalentie van deze virale ziekte geleidelijk verminderd. Chronische hepatitis gerelateerd aan het hepatitis C -virus (HCV), na een toename in de jaren tachtig en negentig, vertoont nu een dalende trend, met name onder jongere leeftijdsgroepen. Terwijl andere studies zich hebben gericht op leverziekten van metabole oorsprong (ASLD, Metald, ALD, enz.), Die worden aangegeven als een van de meest voorkomende oorzaken van leverziekte wereldwijd en in Italië, werden de meest recente epidemiologische gegevens over de Italiaanse bevolking verzameld in de late jaren 1990. Aangezien een decennium nu is verstreken, werd gedacht dat het interessant zou kunnen zijn om nieuwe gegevens te verzamelen over het prevalentiepatroon van leverziekten, vooral in Zuid -Italië, met name in een gemeente geografisch gelijkwaardig van zowel de kust als het achterland.

Daarom heeft dit observationele onderzoek tot doel de evolutie van leverziekten te analyseren door een cohort van patiënten die al in het mediterrane gebied zijn geïdentificeerd, te herinneren. Het cohort bestaat uit individuen die zich in de gemeente Putignano (BA) wonen die de evaluatie van de leverfunctie, comorbiditeiten en voedingsgewoonten al hebben ondergaan, naast het toevoegen van genetische informatie door genoombrede associatie (GWAS) -analyse, nuttig voor het identificeren van associaties tussen genetische varianten en specifieke fenotypische kenmerken met het ontdekken van genetische correlaties die kunnen bijdragen aan de moleculair inzicht in de moleculair inzicht en gerelateerd Comorbiditeiten, met behulp van een representatieve populatie -steekproef.

De analyse van de verzamelde gegevens is bedoeld om risicofactoren en voorspellende biomarkers van de progressie van de leverziekte te identificeren, met als doel de strategieën voor preventie en management te optimaliseren. De resultaten zullen nuttige informatie bieden om de klinische surveillance te verbeteren en gepersonaliseerde interventies bij personen met leverziekten te bevorderen. De analyses worden uitgevoerd met behulp van geavanceerde bioinformatica en statistische methoden om de robuustheid van de resultaten te waarborgen.

Deze terugroepactie zal bijna 20 jaar na de eerste worden uitgevoerd. Het terugroepen van proefpersonen zal een longitudinale beoordeling van ziekteprogressiefactoren of het begin van de ziekte mogelijk maken.

Het doel van dit cohortonderzoek is niet alleen om onderwerpen terug te roepen die eerder betrokken waren bij de NutriHep 1- en NutriHep2 -onderzoeken, maar, net als alle cohortstudies, om de associatie tussen een blootstelling en een uitkomst bij een groep individuen te evalueren. Bovendien zullen, naast het opnieuw evalueren van de eerder beschouwde parameters (bloedtesten, voedingsvragenlijst en lichamelijke activiteit) om hun variatie te bestuderen, en genotypering van de hele genoom van het hele genomische technologie van de hele genoom van de hele genoom van een enkele nucleotide-polymorfismen, zoals SNP-array-technologie. Deze technologie maakt de analyse van duizenden/miljoenen genetische varianten gelijkmatig verdeeld over het hele genoom mogelijk, eerder gekenmerkt in verschillende voorouderlijke populaties en aanwezig in de 1000 Genomes Project Fase 3 -database.

De karakterisering van deze genetische varianten (SNP's) zullen ons in staat stellen om voor elk onderwerp in onze studiecohort, genetische en polygene risicoscores te berekenen, bepaald door de gecombineerde invloed van meerdere genetische varianten.

In het bijzonder zal de bepaling van genetische en polygene risicoscores worden uitgevoerd met behulp van gegevens verkregen uit genoombrede associatiestudies (GWAS) en geavanceerde biostatistische en wiskundige algoritmen gebruiken om het allel te wegen dat de allel telt op de varianten geassocieerd met MAFLD-pathologie op basis van de antestrale oorsprong van onze patiëntcohort. In daaropvolgende fasen zullen de genetische en polygene risicoscores worden gebruikt om de associaties met de klinische kenmerken van de zieke proefpersonen te bestuderen om subgroepen van patiënten met onderscheidende klinische kenmerken te identificeren en het risico op begin en evolutie van de pathologie te voorspellen.

Het NutriHep-cohort (Putignano) werd voor het eerst opgericht in 2006-2007, bestaande uit een cohort van 2300 onderwerpen, teruggeroepen uit de lijsten van huisartsen in de gemeente Putignano (BA) met een stap van 1: 3.

In 2015-2018 werden dezelfde onderwerpen teruggeroepen, met een follow-up therapietrouw van 65,60%. Bovendien werden 102 doden van 2007 tot 2014 geregistreerd.

De terugroepactie zal de 2300 van de 1e golf beschouwen, van waaruit de doden geëvalueerd door de overleg van de doodregisters via het regionale Edotto -systeem en degenen die naar andere regio's zijn verhuisd, worden afgetrokken.

Bovendien zal een ingebed cohort worden gecreëerd om de representativiteit van de onderzoekspopulatie te handhaven, geëxtraheerd met een stap van 1: 3 op basis van de registraties van huisartsen. Deze benadering is nuttig omdat het initiële cohort is verouderd en daarom niet langer meer personen omvat die tot de jongere leeftijdsgroepen behoren, die aanwezig waren aan het begin van het onderzoek maar in de loop van de tijd zijn verouderd. Dit stelt ons in staat om de leeftijdsverdeling te handhaven die vergelijkbaar is met de eerste, waardoor het cohort geleidelijk scheef staat naar oudere leeftijdsgroepen, evenals het verminderen van de vooringenomenheid als gevolg van het verouderen van het cohort zelf en het verbeteren van de generaliseerbaarheid van de resultaten. Het stelt ons ook in staat om de statistische kracht van het onderzoek te behouden, omdat vooral sommige oudere leeftijdsgroepen cruciaal zijn voor de analyse van de effecten van blootstelling op de uitkomst.

Met vergelijkbare modaliteiten als de vorige, zal dit observationele onderzoek zich vooral richten op de volgende fasen:

Eerste fase

• Creatie van een lijst met onderwerpen die moeten worden opgeroepen, afkomstig uit zowel de namen van de deelnemers aan de Nutrihep 1 -studie als de inwoners van de gemeente Putignano via de lijst van huisartsen om de jongere leeftijdsgroep te compenseren;
• Het opnieuw innemen van de onderwerpen die nog in leven zijn, via brieven die naar hun huis worden gestuurd en oproepen;
• Afspraken plannen.

V1:

• Ondertekenen geïnformeerde toestemming;
• Evaluatie van de gezondheid van de lever door niet-invasief onderzoek met fibroscan;
• Anamnesis gebaseerd op epidemiologische parameters (leeftijd, geslacht, inkomen, pathologische en familiegeschiedenis van levergerelateerde ziekten);
• Verzameling van antropometrische parameters zoals gewicht, lengte, tailleomtrek, heupomtrek, nekomtrek, polsomtrek en kuitomtrek. Bovendien zullen de bloeddrukparameters (systolisch en diastolisch) en de fysieke fitnessstatus worden geregistreerd via de volgende veldtests: Handgrip, Sit and Reach Test, Single Leg Stand, 30 '' Sit To Stand, Ruffier Test, Vo2 Max.

Ingeschreven onderwerpen krijgen een versnellingsmeter die objectieve en betrouwbare informatie biedt over fysieke activiteit (versnellingen, bewegingen ...) en slaapkwaliteit. Het zal worden gegeven op de dag van werving en na 7 dagen teruggekeerd.

Om beter te begrijpen, zullen vóór het begin van het project aspecten die het succes van de voorgestelde interventies kunnen verstoren, een aanvullende vragenlijst invullen:

Verder zullen tests worden voltooid om de slaapkwaliteit en kinesofobie, de Pittsburgh Sleep Quality Index (PSQI) en de Tampa Scale of Kinesiophobia (TSK) te evalueren. Voor de classificatie van sarcopenie wordt de korte testbatterijbatterij (SPPB) -test toegediend; - Bloedbemonstering voor routinematige analyses. The following will be measured on the samples: complete blood count, CRP, total proteins, ceruloplasmin, alpha 1 antitrypsin, glucose, Hemoglobin A1c (Hba1C), urea, creatinine, Estimated Glomerular Filtration Rate (eGFR), total and direct bilirubin, albumin, Aspartate Aminotransferase (AST/GOT),Alanine Aminotransferase (ALT/GPT), Gamma-Glutamyl Transferase (GGT), sodium, potassium, calcium, phosphorus, iron, cholesterol, High-Density Lipoprotein (HDL), Low-Density Lipoprotein (LDL), triglycerides, cortisol, c-peptide, vitamin D, insulin, ferritin, folate, vitamin B12, parathyroid hormone, Thyroid-Stimulating Hormone (TSH), Free Triiodothyronine (FT3), Free Thyroxine (FT4), Insulin-like Growth Factor 1 (IGF-1), high-sensitivity C-reactive protein (hsCRP), pro-B-type Natriuretic Peptide (proBNP), zinc, magnesium, HBV and HCV; Serum -porties, mogelijk overgebleven na de routinematige bloedchemieanalyses, worden in de biobank opgeslagen voor latere analyses en mogelijk, met de toestemming van het onderwerp, gebruikt voor andere onderzoeken die de IRCC's "Saverio de Bellis" zullen activeren.

Genotyperinganalyses zullen worden uitgevoerd op hoeveelheden volbloed, mogelijk ook over na routine -analyses. Anonimiteit wordt gegarandeerd door een unieke code toe te wijzen aan de patiënt op het moment van inschrijving.

-Levering van vragenlijsten van zelfvraaging: voedselvragenlijst (EPIC), lichamelijke activiteit (IPAQ, lange vorm) en vragenlijsten om psychologische gezondheid te beoordelen: PSS-10 (waargenomen stressschaal), H.A.D.S. (Schaal voor ziekenhuisangst en depressie), TMI-I (test uw geheugen).

V2 (7 dagen later):

• Verzameling van bloedchemistests;
• Levering van ontlasting en urinemonsters. Fecaal calprotectine en occult bloed worden gemeten op de ontlastingsmonsters; Stoel en urinemonsters worden vervolgens opgeslagen in de biobank. Ontlastingsmonsters zullen worden gebruikt voor de evaluatie van de darmmicrobiota en fecale metaboloom. Urinemonsters zullen worden gebruikt voor metabolomische metingen; Voor de evaluatie van de darmmicrobiota zal het totale bacteriële metagenomisch DNA worden geëxtraheerd uit ontlastingsmonsters met behulp van de QIAAMP FAST DNA -ontlasting Mini Kit (Qiagen, Hilden, Duitsland). Microbioomkarakterisering zal worden uitgevoerd met behulp van een DNA -metabarcoderende en shotgun Metatranscriptomics -benadering. DNA-metabarcoderende analyse zal worden uitgevoerd met behulp van de V5-V6 hypervariabele gebieden van 16S rRNA voor bacteriën (MISEQ-illumina-platform). Monsters die significant zijn in de DNA -metabarcoderende analyse zullen worden onderworpen aan metatranscriptomics -analyse (NextSeq 500 - Illumina -platform). Metagenomics en Metatranscriptomics -gegevens worden geanalyseerd met behulp van bioinformatica -pijpleidingen.

To perform metabolomics tests, samples will be analyzed for volatile organic compounds (VOCs) which will be thermally desorbed by immediately transferring the fiber into the heated injection port (220 °C) of a Clarus 680 (Perkin Elmer, Beaconsfield UK) equipped with an Rtx-WAX column (30 m × 0.25 mm i.d., 0.25 µm film thickness) (Restek) and coupled to a Clarus SQ8MS (Perkin Elmer) with source and transfer line temperatures maintained at 250 and 210 °C, respectively.

• Verzameling van de versnellingsmeter;
• Levering van vragenlijsten en bespreking van hen om misverstanden en ontbrekende gegevens te voorkomen.