Mutaciones cKIT, BRAF/NRAS en melanoma avanzado: resultado clínico en respuesta a los inhibidores de tirosina-cinasa - Proyecto KitMel (KitMel)

Antecedentes: el melanoma metastásico tiene un pronóstico devastador y es una de las principales causas de muerte por cáncer en pacientes jóvenes. Hasta ahora, las terapias disponibles eran pocas y poco fiables, pero la comprensión reciente de las vías moleculares de los melanomas ha mejorado su clasificación y se han propuesto nuevas estrategias clínicas.

Estudios iniciales mostraron que las mutaciones B-Raf/N-Ras (respectivamente V600E y Q61) son la alteración más frecuente estando presente en 70 a 80% de los melanomas, caracterizando pieles sin Daño Inducido por el Sol Crónico (CSD). Estos incluyen melanomas de extensión superficial (SSM) y melanomas nodulares (NM). Otros estudios mostraron que las mutaciones de c-Kit son actualmente la mutación activadora predominante (20 - 40 %) en los melanomas acrolentiginosos (ALM), los melanomas mucosos (MM) y los melanomas que surgen en la piel CSD. El patrón de mutación de c-Kit es más complejo, con cuatro exones afectados que dan lugar a diferentes mutaciones, cuya incidencia e impacto biológico están menos documentados.

Las alteraciones genéticas BRAF/NRAS impulsan constantemente el crecimiento celular, siendo así objetivos atractivos. De hecho, se han obtenido resultados espectaculares con el inhibidor de BRAF que se dirige a la forma mutada V600E BRAF. Los datos de la enfermedad GIST revelaron que las diferentes mutaciones de c-Kit modulan de manera diferente la función de c-Kit y la respuesta a las terapias dirigidas.

Debido a que la terapia dirigida c-Kit es un problema clínico crítico, los investigadores intentaron identificar las mutaciones más frecuentes presentes en nuestra población para proponer una prueba de detección adecuada y adaptar la terapia.

Métodos: Se cribarán 250 muestras de melanoma correspondientes a una población homogénea blanca-caucásica (Bretaña, Francia). Se secuenciarán los exones 11, 13, 17 y 18 de c-Kit (secuenciación directa y pirosecuenciación cuando sea posible). El número de copias de c-Kit se cuantificará mediante q-PCR y el nivel de c-Kit se determinará mediante inmunohistoquímica (IHC, CD117). Las muestras también se analizarán para detectar mutaciones de B-Raf en los codones 464, 466, 469 y 600, y mutaciones de N-Ras en los codones 12, 13 y 61 (pirosecuenciación).

Resultados previstos:

En conjunto, los investigadores anticipan que el presente análisis genético de los tumores de pacientes con melanoma avanzado primero documentará el tipo y la frecuencia de las mutaciones de cKit, confirmará o no que las mutaciones de BRAF, NRAS y cKit son mutuamente excluyentes y documentará su distribución en el subtipos de melanomas. Finalmente, este estudio dará pistas a los investigadores sobre qué tan bien responderán los pacientes a una terapia dirigida a las proteínas promotoras del crecimiento BRAF/NRAS y cKIT.