Mutações cKIT, BRAF/NRAS em Melanoma Avançado: Resultados Clínicos em Resposta a Inibidores de Tirosina-quinase - Projeto KitMel (KitMel)

Introdução: O melanoma metastático tem um prognóstico devastador e é uma das principais causas de morte por câncer em pacientes jovens. Até agora, as terapias disponíveis eram poucas e pouco confiáveis, mas a compreensão recente das vias moleculares dos melanomas melhorou sua classificação e novas estratégias clínicas foram propostas.

Estudos iniciais mostraram que as mutações B-Raf/N-Ras (respectivamente V600E e Q61) são as alterações mais frequentes, estando presentes em 70 a 80% dos melanomas, caracterizando peles com dano solar não crônico (DSC). Estes incluem Melanomas Extensivos Superficiais (SSM) e Melanomas Nodulares (NM). Outros estudos mostraram que as mutações c-Kit são atualmente a mutação ativadora predominante (20 - 40%) em Melanomas Acrolentiginosos (ALM), Melanomas Mucosos (MM) e em melanomas que surgem na pele CSD. O padrão de mutação do c-Kit é mais complexo com quatro exons sendo afetados levando a diferentes mutações, cuja incidência e impacto biológico são menos documentados.

As alterações genéticas BRAF/NRAS impulsionam constantemente o crescimento celular, sendo assim alvos atraentes. De fato, resultados espetaculares foram obtidos com o inibidor BRAF que tem como alvo a forma V600E com mutação BRAF. Os dados da doença GIST revelaram que as diferentes mutações do c-Kit modulam de maneira diferente a função do c-Kit e a resposta às terapias direcionadas.

Como a terapia direcionada ao c-Kit é uma questão clínica crítica, os pesquisadores visaram identificar as mutações mais frequentes presentes em nossa população para propor testes de triagem apropriados e adaptar a terapia.

Métodos: Serão rastreadas 250 amostras de melanoma correspondentes a uma população homogénea branco-caucasiana (Bretanha, França). Os exons 11, 13, 17 e 18 do c-Kit serão sequenciados (sequenciamento direto e pirosequenciamento quando possível). O número de cópias do c-Kit será quantificado por q-PCR e o nível de c-Kit determinado por imuno-histoquímica (IHC, CD117). As amostras também serão analisadas para mutações B-Raf nos códons 464, 466, 469 e 600, e para mutações N-Ras nos códons 12, 13 e 61 (Pyrosequencing).

Resultados esperados:

Em conjunto, os pesquisadores antecipam que a presente análise genética dos tumores de pacientes com melanoma avançado documentará primeiro o tipo e a frequência das mutações cKit, confirmará ou não que as mutações BRAF, NRAS e cKit são mutuamente exclusivas e documentará sua repartição no subtipos de melanomas. Finalmente, este estudo dará pistas aos pesquisadores sobre como os pacientes responderão a uma terapia que visa as proteínas promotoras de crescimento BRAF/NRAS e cKIT.