cKIT, BRAF/NRAS-mutaatiot pitkälle edenneessä melanoomassa: kliininen tulos vasteessa tyrosiinikinaasi-inhibiittoreille - KitMel-projekti (KitMel)

Tausta: Metastaattisella melanoomalla on tuhoisa ennuste, ja se on yksi yleisimmistä nuorten potilaiden syöpäkuolemien syistä. Tähän asti saatavilla olevia hoitoja oli vähän ja ne eivät olleet luotettavia, mutta viimeaikainen ymmärrys melanoomien molekyylipoluista on parantanut niiden luokittelua ja uusia kliinisiä strategioita on ehdotettu.

Alustavat tutkimukset osoittivat, että B-Raf/N-Ras-mutaatiot (vastaavasti V600E ja Q61) ovat yleisin 70–80 %:ssa melanoomassa esiintyvä muutos, joka on luonteenomaista ei-chronic Sun-induced Damage skins (CSD) -vaurioille. Näitä ovat pinnalliset leviävät melanoomat (SSM) ja nodulaariset melanoomat (NM). Muut tutkimukset osoittivat, että c-Kit-mutaatiot ovat tällä hetkellä vallitseva aktivoiva mutaatio (20 - 40 %) Acro-Lentiginous Melanoomissa (ALM), Mucous Melanoomassa (MM) ja melanoomassa, joka syntyy CSD-iholle. c-Kit-mutaatiokuvio on monimutkaisempi, sillä se vaikuttaa neljään eksoniin, mikä johtaa erilaisiin mutaatioihin, joiden esiintyminen ja biologinen vaikutus on vähemmän dokumentoitu.

BRAF/NRAS-genetiikan muutokset ohjaavat jatkuvasti solujen kasvua ja ovat siten houkuttelevia kohteita. BRAF-inhibiittorilla, joka kohdistuu V600E BRAF-mutatoituun muotoon, on todellakin saatu upeita tuloksia. GIST-taudin tiedot paljastivat, että erilaiset c-Kit-mutaatiot moduloivat eri tavalla c-Kit-toimintoa ja vastetta kohdennettuihin hoitoihin.

Koska c-Kit-kohdennettu hoito on kriittinen kliininen ongelma, tutkijat pyrkivät tunnistamaan populaatiossamme yleisimmät mutaatiot ehdottaakseen sopivaa seulontatestiä ja mukauttaakseen hoitoa.

Menetelmät: Seulotaan 250 melanoomanäytettä, jotka vastaavat homogeenista valkoihoista populaatiota (Bretagne, Ranska). c-Kitin eksonit 11, 13, 17 ja 18 sekvensoidaan (suora sekvensointi ja pyrosekvensointi, kun mahdollista). c-Kit-kopiomäärä määritetään q-PCR:llä ja c-Kit-taso määritetään immunohistokemialla (IHC, CD117). Näytteistä analysoidaan myös B-Raf-mutaatiot kodoneissa 464, 466, 469 ja 600 ja N-Ras-mutaatiot kodoneissa 12, 13 ja 61 (pyrosequencing).

Odotetut tulokset:

Kaiken kaikkiaan tutkijat odottavat, että nykyinen geneettinen analyysi edenneen melanoomapotilaiden kasvaimista dokumentoi ensin cKit-mutaatioiden tyypin ja esiintymistiheyden, vahvistaa tai ei, että BRAF-, NRAS- ja cKit-mutaatiot ovat toisensa poissulkevia ja dokumentoivat niiden jakautumisen melanooman alatyypit. Lopuksi tämä tutkimus antaa tutkijoille vihjeitä siitä, kuinka hyvin potilaat reagoivat hoitoon, joka kohdistuu kasvua edistäviin proteiineihin BRAF/NRAS ja cKIT.