Efecto de la carga de glucosa en la expresión de productos finales de glicación avanzada en mujeres examinadas para diabetes gestacional

A. Diseño de la investigación Los participantes serán identificados en el momento de su visita de atención prenatal (24-28 semanas GA). Los investigadores solicitarán permiso para participar en el protocolo de investigación. Se agregó una exención de HIPPA al protocolo para explicar las fuentes que los investigadores podrían usar para detectar sujetos elegibles. Se podrá acceder a la historia clínica electrónica con renuncia parcial a revisar la información médica que hará de cada sujeto candidato al protocolo. Se instruirá al sujeto sobre los beneficios del estudio para el cual el participante es elegible y que la gestión no se verá influenciada por la decisión del participante de ser voluntario o no. Si el paciente acepta participar, se le dará al participante el consentimiento por escrito para leer. Se le preguntará al participante si hay comprensión, si todo ha sido explicado y si hay alguna duda que los investigadores necesiten aclarar. Se obtendrá el consentimiento informado. No se incluirán anuncios, volantes, publicaciones en sitios web, cartas de reclutamiento o guiones orales/escritos para el reclutamiento de pacientes.

Intervenciones:

1. Consentimiento informado.
2. Recolección de muestras de sangre (5 cc o una cucharadita de sangre entera) y orina (1/2 taza) antes de la administración de los 50 gr. prueba de glucola Este protocolo se presentará en este brazo del estudio a mujeres (n=50) que tienen una prueba de tolerancia a la glucosa de 1 hora clínicamente indicada para diagnosticar diabetes gestacional.
3. Mediciones de la presión arterial cada 15 minutos durante una hora.
4. Recolección de una segunda muestra de sangre (5 cc o una cucharadita de sangre entera) y orina (1/2 taza) luego de la administración de los 50 gr. prueba de glucola La recolección de sangre en este momento estará clínicamente indicada para detectar valores clínicos anormales que podrían clasificar a la paciente como diabética gestacional.
5. En un grupo separado de mujeres clasificadas como controles embarazadas sanas (n=50), los investigadores obtendrán el consentimiento informado utilizando un protocolo similar al descrito anteriormente.
6. La recolección de una muestra de sangre (5 cc o una cucharadita de sangre entera) y de orina (1/2 taza) se realizará antes de la administración de los 50 cc de agua corriente.
7. Las mediciones de la presión arterial se realizarán cada 15 minutos durante una hora.

d. La recolección de una segunda muestra de sangre (5 cc o una cucharadita de sangre completa) y de orina (1/2 taza) se realizará al final de la hora.

B. Los participantes de la muestra se inscribirán según la elegibilidad para un GTT de una hora. Las revisiones de los gráficos de los horarios de la clínica se realizarán la semana anterior para identificar la población objetivo para el reclutamiento que tiene entre 24 y 28 semanas de gestación y necesita una prueba de detección de diabetes.

Se reclutarán para la inscripción 50 mujeres embarazadas en la clínica de alto riesgo que se presenten para una prueba de detección de diabetes en una visita prenatal de rutina. Esta población está en riesgo de sufrir resultados adversos posteriores en el embarazo, y los investigadores evaluarán si los biomarcadores, como los productos finales de glicación avanzada, se ven afectados después de la carga de glucosa para la detección de diabetes.

Se reclutarán 50 mujeres embarazadas sanas en la clínica obstétrica general de McCampbell Hall como controles para ingerir una muestra de 50 cc de agua y someterse a mediciones objetivas idénticas (mediciones de presión arterial y muestras de orina/sangre) que los sujetos de carga de glucosa. El análisis de biomarcadores se comparará con el de la población cargada de glucosa. Estos pacientes que sirven como controles se someterán a la prueba de detección de glucola clínicamente indicada en otra visita entre las 24 y 28 semanas de gestación.

Los criterios de exclusión incluyen:

1. Los sujetos que no hablen inglés serán excluidos debido a la incapacidad de dar su consentimiento de manera adecuada.
2. Las pacientes no embarazadas serán excluidas ya que este es un estudio de los tejidos maternos y los resultados del embarazo relacionados con las exposiciones durante el embarazo.
3. Los hombres serán excluidos ya que este es un estudio que incluye mujeres embarazadas solo por la naturaleza de la investigación.
4. Los presos serán excluidos para evitar cualquier posibilidad de coerción.
5. Quedarán excluidos los menores de 18 años por no poder consentir sin tutor legal.
6. Se excluirán los pacientes con contraindicaciones para la prueba de glucola para la detección de diabetes gestacional, como cirugía bariátrica, enfermedad inflamatoria intestinal con resección intestinal parcial y otras afecciones de mala absorción.

C. Medición/Instrumentación Se reclutarán 50 pacientes embarazadas que tengan entre 24 y 28 semanas de gestación y se sometan a pruebas de detección de diabetes gestacional de rutina con una carga de glucosa de 50 g. Después de la inscripción, se obtendrán muestras de sangre y orina maternas como se describe anteriormente. Se registrará la presión arterial. Para este tipo de diseño de estudio, cada paciente servirá como control del propio participante. Además, se reclutarán 50 pacientes embarazadas sanas para realizar una prueba similar a la de diabetes usando agua solo como controles adicionales. Los productos finales de glicación avanzada, entre otras proteínas, se analizarán para cada una de las muestras.

Utilizando procedimientos de inmunoensayo estándar disponibles en nuestro laboratorio, los investigadores realizarán en paralelo análisis proteómicos de orina y sangre materna, además de la evaluación de la placenta después del parto. Los productos finales de glicación avanzada y el TNF-A serán el centro de atención, pero al realizar estudios proteómicos de las muestras biológicas, los investigadores esperan descubrir otros biomarcadores y vías biológicas que podrían ser responsables de las manifestaciones clínicas de la prueba. Las proteínas clave recientemente descubiertas y las importantes vías de proteínas reguladoras pueden potencialmente ser el objetivo para identificar y tratar la diabetes y otras afecciones médicas durante el embarazo.

D. Procedimientos detallados del estudio Las mujeres serán reclutadas en las Clínicas de alto o bajo riesgo de OSUMC, y Trabajo de parto y parto. Los datos clínicos para el estudio se extraerán de la historia clínica del sujeto.

Los peligros potenciales están relacionados con los riesgos de una extracción de sangre adicional fuera de la atención prenatal de rutina. Estos riesgos incluyen hematomas, molestias o dolor en el sitio, infección o desmayo. Los riesgos se perciben como mínimos, pero los pacientes serán compensados ​​por su tiempo y voluntad de soportar la incomodidad de esta extracción de sangre adicional.

Los temas se codificarán con números del 1 al 100. Además, los especímenes se codificarán con un código de letras seguido de números en número consecutivo. El PI creará una hoja de trabajo de computadora donde el nombre y el registro médico del sujeto se vinculan con la información codificada del sujeto y con cada uno de los números de muestra codificados. El escritorio de la computadora que contiene la hoja de trabajo con información de salud pública (PHI) tiene un disco cifrado. Se guardará una copia del formulario de consentimiento en un gabinete seguro y cerrado con llave en la oficina del PI que también está cerrada. El nombre del sujeto se mantendrá separado de los resultados. No se comunicarán informes a los sujetos ni se incluirán en su historia clínica, ya que no afectarán la forma en que se manejará el embarazo, el trabajo de parto o su atención posterior al parto. Sólo el médico del sujeto y los investigadores sabrán de la participación del sujeto en el estudio. No se hará más divulgación pública de esta información.

E. Validez Interna

Para evitar el sesgo del estudio, también hemos empleado lo siguiente:

1. Uso de controles internos y un grupo de control externo
2. Uso de pacientes inscritos consecutivos

F. Análisis de datos Las comparaciones estadísticas entre grupos se realizarán utilizando la prueba t de Student o Mann-Whitney o el análisis de varianza repetido de dos vías (ANOVA) seguido de pruebas post hoc de Holm-Sidak, según corresponda. Se usará la correlación producto-momento de Pearson para estimar la asociación entre variables. Se considerará una p=<0,05 para indicar significación estadística. Se analizarán la edad gestacional, el peso del feto en el momento de la prueba de tolerancia a la glucosa, la presencia o ausencia de cualquiera de las complicaciones médicas del embarazo, los antecedentes de abuso de sustancias y medicamentos, y las características demográficas maternas y serán objeto de comparación estadística.