Ensayo basado en Luminex para identificar el episodio principal de unión a IgE en pacientes alérgicos al trigo mediados por IgE

Alérgico al trigo

Procedimiento: Dibujo de sangre

La extracción de sangre se realizará una vez utilizando 15 ml de volumen de sangre (las muestras de suero o plasma se recolectarán durante el seguimiento de rutina del nivel de sIgE al trigo o durante la prueba de provocación alimentaria oral cuya inserción intravenosa se preparará de forma rutinaria en caso de que ocurra una reacción de emergencia) ). La muestra se transferirá a la Escuela de Medicina Icahn en Mount Sinai, Nueva York, EE. UU. para su procesamiento en el laboratorio (ensayo de péptidos basado en Luminex)

Tolerante al trigo

Pacientes con tolerancia al trigo confirmada por resultado negativo de desafío alimentario oral (OFC) al trigo durante los últimos 12 meses

Procedimiento: Dibujo de sangre

La extracción de sangre se realizará una vez utilizando 15 ml de volumen de sangre (las muestras de suero o plasma se recolectarán durante el seguimiento de rutina del nivel de sIgE al trigo o durante la prueba de provocación alimentaria oral cuya inserción intravenosa se preparará de forma rutinaria en caso de que ocurra una reacción de emergencia) ). La muestra se transferirá a la Escuela de Medicina Icahn en Mount Sinai, Nueva York, EE. UU. para su procesamiento en el laboratorio (ensayo de péptidos basado en Luminex)

Inmunoterapia oral de trigo

Pacientes con alergia al trigo mediada por IgE y sometidos a inmunoterapia oral con trigo durante al menos 6 meses o en la fase de mantenimiento del tratamiento

Procedimiento: Dibujo de sangre

La extracción de sangre se realizará una vez utilizando 15 ml de volumen de sangre (las muestras de suero o plasma se recolectarán durante el seguimiento de rutina del nivel de sIgE al trigo o durante la prueba de provocación alimentaria oral cuya inserción intravenosa se preparará de forma rutinaria en caso de que ocurra una reacción de emergencia) ). La muestra se transferirá a la Escuela de Medicina Icahn en Mount Sinai, Nueva York, EE. UU. para su procesamiento en el laboratorio (ensayo de péptidos basado en Luminex)

Epítopo de unión a E de inmunoglobulina principal (Ig) en proteínas de trigo y suero/plasma de pacientes

Para los datos de Luminex, la intensidad de unión del anticuerpo a las perlas específicas del epítopo se calculó a partir de la señal de fluorescencia de cada perla. Se generó una puntuación de índice de intensidad de unión a partir de la transformación log2 de la relación señal/fondo y cada elemento peptídico, que estaba cerca de una distribución normal. Se observó un efecto placa y se ajustó para usar modelos lineales. Se compararon las intensidades de unión de anticuerpos (Luminex) de diferentes grupos. Para evaluar los cambios en los perfiles de unión al epítopo, se utilizó un modelo lineal con el grupo como factor. Las comparaciones de intereses se probaron mediante pruebas t y los valores P resultantes se ajustaron para múltiples hipótesis utilizando el enfoque de Benjamini-Hochberg, que controla la tasa de descubrimiento falso (FDR) entre epítopos. Los epítopos se definieron como epítopos de unión diferencial (DBE) si el FDR < 0,05 y los cambios de pliegue (FCH) > 1,5.

Predecir diferente gravedad de la reacción de hipersensibilidad al trigo

Para los datos de Luminex, la intensidad de unión del anticuerpo a las perlas específicas del epítopo se calculó a partir de la señal de fluorescencia de cada perla. Se generó una puntuación de índice de intensidad de unión a partir de la transformación log2 de la relación señal/fondo y cada elemento peptídico, que estaba cerca de una distribución normal. Se observó un efecto placa y se ajustó para usar modelos lineales. Se compararon las intensidades de unión de anticuerpos (Luminex) de diferentes grupos. Para evaluar los cambios en los perfiles de unión al epítopo, se utilizó un modelo lineal con el grupo como factor. Las comparaciones de intereses se probaron mediante pruebas t y los valores P resultantes se ajustaron para múltiples hipótesis utilizando el enfoque de Benjamini-Hochberg, que controla la tasa de descubrimiento falso (FDR) entre epítopos. Los epítopos se definieron como epítopos de unión diferencial (DBE) si el FDR < 0,05 y los cambios de pliegue (FCH) > 1,5.