Hisopos del meato del pene autotomados para la detección de clamidia, gonorrea y micoplasma genital (Me-swab)

Métodos de estudio La población del estudio serán hombres y mujeres trans de 18 años o más que se presenten en Leeds Sexual Health y deseen hacerse la prueba de clamidia, gonorrea y M. genitalium (si hay síntomas de uretritis). Se excluirán aquellos que hayan tomado antibióticos (excepto metronidazol) en los últimos 14 días. Se recopilarán detalles de edad, etnia, antecedentes de infecciones de transmisión sexual (ITS), estar en contacto con una ITS y síntomas que sugieran una ITS bacteriana (secreción uretral, disuria, dolor e inflamación testicular). Antes de cualquier examen por parte del médico, se le pedirá al participante que se tome una muestra del meato del pene por sí mismo siguiendo las instrucciones escritas y esquemáticas para las muestras del meato del pene autotomadas utilizando la técnica recomendada por Hologic. Aquellos con síntomas genitales serán examinados y se registrará la presencia de secreción uretral e inflamación y sensibilidad testicular. El médico tomará un hisopo uretral para microscopía y cultivo gonocócico si hay alguna evidencia de secreción uretral. Aquellos que no tengan síntomas genitales no serán examinados y no se les tomará un hisopo uretral para microscopía o cultivo gonocócico como en la práctica clínica habitual. Luego se les pedirá a todos los hombres que realicen una muestra FCU. El frotis del meato peneano y la FCU se analizarán para detectar M. genitalium si hay síntomas de uretritis. Se les pedirá a los primeros 500 participantes que completen un breve cuestionario de seis preguntas sobre qué tan fácil/difícil y cómodo/incómodo encontraron que tomar el hisopo del meato peneano se comparó con recolectar la FCU y su preferencia general de muestra.

En consecuencia, a cada participante se le tomarán dos muestras diferentes:

Hisopado meatal: ensayo Aptima Combo 2; Ensayo Aptima MGen (si hay síntomas de uretritis)

Muestra de orina de primera captura: ensayo Aptima Combo 2; Ensayo Aptima MGen (si hay síntomas de uretritis)

El meato peneano autotomado y las muestras de FCU se analizarán para detectar C. trachomatis y N. gonorrhoeae con el ensayo Hologic Aptima Combo 2 (AC2), y las de los participantes con síntomas de uretritis se analizarán para detectar M. genitalium con Aptima MGen ensayo, de acuerdo con las instrucciones del fabricante (Hologic, San Diego, CA, EE. UU.). Las pruebas positivas para C. trachomatis se volverán a analizar con el ensayo Aptima CT y las pruebas positivas para N. gonorrhoeae se volverán a analizar con el ensayo Aptima GC, ambos utilizan un objetivo diferente al AC2. Una prueba solo se clasificará como clínicamente positiva si la prueba de confirmación correspondiente también es positiva. Las pruebas positivas para M. genitalium se analizarán para detectar mutaciones de resistencia a macrólidos y fluoroquinolonas de M. genitalium mediante PCR interna utilizando la secuenciación de Sanger para caracterizar mutantes en el gen 23s para resistencia a macrólidos y genes gyrA y parC para resistencia a fluoroquinolonas (según lo desarrollado por el Unidad de Referencia de Bacterias de Transmisión Sexual, Salud Pública de Inglaterra). La prueba de resistencia también actuará como prueba de confirmación si la amplificación tiene éxito. Se anticipa que la amplificación no tendrá éxito en hasta el 20 % de los ensayos Aptima Mgen positivos, debido a la mejor sensibilidad del ensayo comercial, en cuyo caso estas muestras positivas para M. genitalium se congelarán, se procesarán en lotes y se enviarán a Hologic. , San Diego, CA, para pruebas de confirmación. Se tratará al participante como si tuviera M. genitalium positivo mientras espera estos resultados de confirmación en vista de la alta especificidad del ensayo Aptima MGen y para evitar más morbilidad y transmisión sexual.

Todos los pacientes diagnosticados con clamidia y/o gonorrea recibirán tratamiento y se controlarán con notificación a la pareja y seguimiento según los protocolos clínicos y las pautas nacionales. A todos los pacientes examinados para M. genitalium se les habrá diagnosticado uretritis, por lo que habrán sido tratados inicialmente con doxiciclina durante siete días. A los que den positivo para M. genitalium se les realizarán pruebas para detectar mutaciones de resistencia a macrólidos y fluoroquinolonas de M. genitalium. El resultado de esto se usará para guiar la terapia prescrita para tratar la infección según las pautas del Reino Unido (RU) y europeas. Se anticipa que alrededor del 50% de las infecciones por M. genitalium serán resistentes al tratamiento de primera línea de un régimen prolongado de azitromicina. Estos hombres serán tratados con moxifloxacina. Los hombres con resistencia a macrólidos y fluoroquinolonas serán tratados con un tratamiento de tercera línea recomendado por las guías. Aquellos en los que la amplificación para realizar la prueba de resistencia no tuvo éxito habrán sido tratados inicialmente con doxiciclina durante siete días. Después de esto, se les administrará un ciclo prolongado de azitromicina. Si no hay resolución clínica, y/o si todavía son M. genitalium positivos en la prueba de curación, serán tratados con moxifloxacino. Se realizará una prueba de curación a las cinco semanas del inicio del tratamiento utilizando un hisopo del meato peneano autotomado y una muestra de FCU. A las parejas sexuales actuales se les hará la prueba de M. genitalium y se les administrará el mismo régimen de antibióticos si es positivo.

Los datos de los Formularios de informe de casos (CRF) se ingresarán utilizando el número de estudio único en una base de datos de un sistema informático seguro que estará protegida con contraseña. La entrada de datos se verificará en busca de errores y la base de datos contendrá alertas para identificar si los datos que se ingresan son ilógicos, inconsistentes o incompletos. La lista maestra de códigos de identificación únicos de la clínica y números de estudio, y los CRF se mantendrán en un gabinete seguro bajo llave, dentro de una oficina cerrada con llave, dentro de Leeds Sexual Health.

Determinación del estado de infección del paciente Los pacientes se clasificarán como infectados o no infectados en función de una prueba AC2 positiva (confirmada) para C. trachomatis; una prueba AC2 positiva (confirmada) para N. gonorrhoeae o un cultivo positivo para N. gonorrhoeae; y una prueba Aptima Mgen positiva.

El Departamento de Microbiología realizará los ensayos de amplificación de ácidos nucleicos y los ensayos de mutación de resistencia a macrólidos y fluoroquinolonas de M. genitalium.

Cálculo de potencia y análisis estadístico Se anticipa que la sensibilidad de los frotis del meato peneano autotomados será similar al estudio de Dize en lugar del estudio de Chernesky, ya que todos los participantes realizarán primero la muestra del meato peneano. Los investigadores predicen una sensibilidad del 92 % para la clamidia y del 99 % para la gonorrea. Se anticipa que la sensibilidad de las muestras de FCU será similar a la del estudio de Chernesky en lugar del estudio de Dize ya que no se utilizará un dispositivo de recolección de orina. Los investigadores predicen una sensibilidad del 83 % para clamidia y del 85 % para gonorrea. Solo hay un estudio publicado que compara hisopos del meato peneano y FCU para la detección de M. genitalium. Esto informó una sensibilidad del 100 % con hisopos del meato peneano y del 83 % con FCU.

Para el análisis de gonorrea, 85 muestras positivas detectarían una diferencia significativa entre una sensibilidad del 85 % y el 99 % con una potencia del 80 % y una probabilidad del 95 %. Para el análisis de clamidia, 260 muestras positivas detectarían una diferencia significativa entre una sensibilidad del 83 % y el 92 % con una potencia del 80 % y una probabilidad del 95 %. Para el análisis de M. genitalium, 80 muestras positivas detectarían una diferencia significativa entre una sensibilidad del 85 % y el 99 % con una potencia del 80 % y una probabilidad del 95 % (sensibilidad ligeramente mayor de FCU y menor de frotis del meato peneano utilizado como único estudio publicado ).

La prevalencia de gonorrea uretral en la población masculina a estudiar es de al menos 3,7%, incluidos los hombres asintomáticos. Incluyendo 2400 participantes sintomáticos y asintomáticos, dará más de 85 individuos positivos con una prevalencia del 3,7%. La prevalencia de clamidia uretral en la población masculina a estudiar es de al menos 11%. 2400 participantes darán 260 individuos positivos con 11% de prevalencia. No se conoce la prevalencia de M. genitalium en personas con síntomas de uretritis en la población que se va a estudiar, ya que acaba de estar disponible una prueba de diagnóstico comercial aprobada en Europa con la marca Conformité Européene (marca CE). En 2017, se observaron 500 casos de uretritis no gonocócica (UNG) masculina, de los cuales se esperaría que 100 (20 %) fueran positivos para M. genitalium. A todos los que tengan uretritis gonocócica sintomática también se les hará la prueba de M. genitalium, de los cuales hasta 10 hombres por año también pueden ser positivos para M. genitalium. Esto significa que el tamaño de la muestra de 80 se podría lograr en 15 meses con una aceptación del 50-60 % en pacientes con síntomas de uretritis. Se espera que la aceptación sea alta, especialmente en aquellos con síntomas de uretritis, ya que el estudio ofrece pruebas para M. genitalium que aún no están disponibles en la práctica clínica habitual ya que actualmente no hay financiación para este servicio. Los investigadores realizaron y publicaron estudios similares para identificar la muestra óptima para la detección de clamidia y gonorrea en mujeres, donde 42 médicos reclutaron a casi 4000 mujeres en 10 meses, que fue más corto que el período de reclutamiento planificado.

Todos los análisis de datos se realizarán utilizando el número de estudio. La sensibilidad general, la especificidad, el valor predictivo positivo y el valor predictivo negativo se determinarán para los frotis del meato peneano autotomados y las muestras de orina de primera captura comparando los resultados de la prueba con el estado de infección del paciente. La comparación entre hisopos de meato peneano autotomados y muestras de FCU se realizará mediante la prueba de McNemar. Los análisis para la detección de clamidia y gonorrea también se calcularán en aquellos con síntomas y aquellos sin síntomas.

Utilidad de la terapia guiada por la resistencia a los antimicrobianos (AMR) La utilidad de usar la terapia guiada por la AMR se medirá por el número de antibióticos inapropiados que se habrían administrado si se hubieran seguido las pautas de la NGU administrando doxiciclina, luego azitromicina extendida y luego moxifloxacina.

Comparación de costos El análisis económico será una simple comparación de costos y se centrará en si el uso de hisopos de meato peneano autotomados proporciona un ahorro de costos en comparación con las muestras de FCU. El análisis utilizará la detección correcta de Chlamydia trachomatis, Neisseria gonorrhoeae y Mycoplasma genitalium como criterio principal de valoración y adoptará la perspectiva del Servicio Nacional de Salud/Servicios de Especialistas Prescritos (NHS/PSS) del Reino Unido de acuerdo con las recomendaciones de NICE (NICE 2013). Los costos se calcularán a partir de una submuestra de 240 participantes. El uso y los costos de los recursos del NHS se recopilarán prospectivamente e incluirán los costos del tiempo y los recursos de la clínica y el tiempo y los recursos del laboratorio. El personal de la clínica completará un formulario de recopilación de datos especialmente diseñado para cada participante del ensayo durante un período de 5 a 6 semanas del estudio. La información sobre costos unitarios o precios se obtendrá para adjuntar a cada elemento de uso de recursos, para permitir que se calcule un costo general (p. Curtis & Burns 2016). La comparación final se basará en el costo por detección correcta de Chlamydia trachomatis, Neisseria gonorrhoeae y Mycoplasma genitalium usando hisopos del meato peneano autotomados versus muestras FCU.