Самостоятельное взятие мазков из полового члена для выявления хламидиоза, гонореи и генитальной микоплазмы (Me-swab)

Методы исследования Исследуемой группой будут мужчины и трансженщины в возрасте 18 лет и старше, обращающиеся в Leeds Sexual Health и желающие пройти тестирование на хламидиоз, гонорею и M. genitalium (при наличии симптомов уретрита). Те, кто принимал антибиотики (кроме метронидазола) в течение последних 14 дней, будут исключены. Будут собраны сведения о возрасте, этнической принадлежности, прошлых инфекциях, передающихся половым путем (ИППП), контакте с ИППП и симптомах, указывающих на бактериальную ИППП (выделения из уретры, дизурия, боль в яичках и отек). Перед любым осмотром клиницистом участника попросят самостоятельно взять мазок из полового члена в соответствии с письменными и схематическими инструкциями для самостоятельного взятия мазков из полового члена с использованием техники, рекомендованной Hologic. Те, у кого есть генитальные симптомы, будут обследованы, и будет зарегистрировано наличие выделений из уретры, а также припухлости и болезненности яичек. Уретральный мазок для микроскопии и посева на гонококки берется врачом, если есть какие-либо признаки выделений из уретры. Те, у кого нет генитальных симптомов, не будут обследованы, и им не будут брать мазок из уретры для микроскопии или посева на гонококки, как в обычной клинической практике. Затем всем мужчинам будет предложено пройти пробу FCU. Мазок из полового члена и FCU будут проверены на M. genitalium, если есть симптомы уретрита. Первым 500 участникам будет предложено заполнить короткую анкету из шести вопросов о том, насколько легким/сложным и удобным/неудобным они считают взятие мазка из полового члена по сравнению со сбором FCU, а также их общие предпочтения в отношении выборки.

Следовательно, у каждого участника будут взяты две разные пробы:

Мазок с мяса: анализ Aptima Combo 2; Анализ Aptima MGen (при симптомах уретрита)

Образец мочи первого сбора: анализ Aptima Combo 2; Анализ Aptima MGen (при симптомах уретрита)

Самостоятельно взятые образцы полового члена и FCU будут протестированы на C. trachomatis и N. gonorrhoeae с использованием анализа Hologic Aptima Combo 2 (AC2), а образцы от участников с симптомами уретрита будут проверены на M. genitalium с использованием Aptima MGen. анализ в соответствии с инструкциями производителя (Hologic, Сан-Диего, Калифорния, США). Положительные тесты на C. trachomatis будут повторно протестированы с использованием анализа Aptima CT, а положительные тесты на N. gonorrhoeae будут повторно протестированы с использованием анализа Aptima GC, оба из которых используют другую мишень, чем AC2. Тест будет классифицирован как клинически положительный только в том случае, если соответствующий подтверждающий тест также будет положительным. Положительные тесты на M. genitalium будут проверены на наличие мутаций устойчивости к макролидам и фторхинолонам M. genitalium с помощью внутренней ПЦР с использованием секвенирования Сэнгера для характеристики мутантов в гене 23s для устойчивости к макролидам и генах gyrA и parC для устойчивости к фторхинолонам (как разработано Справочное отделение по бактериям, передающимся половым путем, Общественное здравоохранение Англии). Тест на устойчивость также будет действовать как подтверждающий тест, если амплификация прошла успешно. Ожидается, что амплификация не будет успешной до 20% положительных анализов Aptima Mgen из-за лучшей чувствительности коммерческого анализа, и в этом случае эти положительные образцы на M. genitalium будут заморожены, объединены в партии и отправлены в Hologic. , Сан-Диего, Калифорния, для подтверждающего тестирования. Участник будет лечиться так, как если бы он был положительным на M. genitalium, в ожидании этих подтверждающих результатов с учетом высокой специфичности анализа Aptima MGen и во избежание дальнейшей заболеваемости и передачи половым путем.

Всем пациентам, у которых диагностирован хламидиоз и/или гонорея, будет назначено лечение и ведение с уведомлением партнера и последующее наблюдение в соответствии с клиническими протоколами и национальными рекомендациями. У всех пациентов, проверенных на наличие M. genitalium, будет диагностирован уретрит, поэтому их первоначально лечат доксициклином в течение семи дней. Те, у кого положительный результат на M. genitalium, будут проверены на наличие мутаций устойчивости к макролидам M. genitalium и фторхинолонам. Результат этого будет использоваться для определения терапии, назначенной для лечения инфекции в соответствии с рекомендациями Соединенного Королевства (Великобритании) и Европы. Ожидается, что около 50% инфекций, вызванных M. genitalium, будут устойчивы к терапии первой линии расширенного режима азитромицина. Этих мужчин будут лечить моксифлоксацином. Мужчинам с резистентностью как к макролидам, так и к фторхинолонам будет назначено лечение третьей линии. Те, у кого амплификация для проведения теста на устойчивость не увенчалась успехом, первоначально лечились доксициклином в течение семи дней. После этого им будет назначен расширенный курс азитромицина. Если нет клинического разрешения и/или если они все еще остаются положительными на M. genitalium при тесте на излечение, их будут лечить моксифлоксацином. Тест на излечение будет проведен через пять недель после начала лечения с использованием как самостоятельно взятого мазка из полового члена, так и образца FCU. Нынешние половые партнеры будут проверены на наличие M. genitalium и в случае положительного результата получат тот же режим антибиотикотерапии.

Данные из регистрационных форм (CRF) будут вводиться с использованием уникального номера исследования в безопасную базу данных компьютерной системы, которая будет защищена паролем. Вводимые данные будут проверяться на наличие ошибок, а база данных будет содержать предупреждения, чтобы определить, являются ли вводимые данные нелогичными, непоследовательными или неполными. Основной список уникальных идентификационных кодов клиник и номеров исследований, а также CRF будут храниться в надежном запираемом шкафу в запертом офисе в Leeds Sexual Health.

Определение инфицированного статуса пациента. Пациенты будут классифицированы как инфицированные или не инфицированные на основании одного положительного (подтвержденного) теста AC2 на C. trachomatis; один положительный (подтвержденный) тест AC2 на N. gonorrhoeae или положительная культура на N. gonorrhoeae; и один положительный тест Aptima Mgen.

Отделение микробиологии проведет анализы амплификации нуклеиновых кислот, а также анализы устойчивости к макролидам M. genitalium и мутациям устойчивости к фторхинолонам.

Расчет мощности и статистический анализ Ожидается, что чувствительность самостоятельно взятых мазков из полового члена будет такой же, как в исследовании Дайзе, а не в исследовании Чернески, поскольку все участники сначала возьмут образец из полового члена. Исследователи предсказывают чувствительность 92% для хламидиоза и 99% для гонореи. Ожидается, что чувствительность образцов FCU будет аналогична исследованию Чернески, а не исследованию Дайзе, поскольку устройство для сбора мочи не будет использоваться. Исследователи предсказывают чувствительность 83% для хламидиоза и 85% для гонореи. Существует только одно опубликованное исследование, сравнивающее мазки из полового члена и FCU для обнаружения M. genitalium. Это сообщило о 100% чувствительности при мазках из полового члена и 83% при FCU.

Для анализа на гонорею 85 положительных образцов обнаружат значительную разницу между чувствительностью 85% и 99% с мощностью 80% и вероятностью 95%. Для анализа на хламидии 260 положительных образцов обнаружат значительную разницу между чувствительностью 83% и 92% с мощностью 80% и вероятностью 95%. Для анализа M. genitalium 80 положительных образцов выявили бы значительную разницу между чувствительностью 85 % и 99 % с мощностью 80 % и вероятностью 95 % (немного более высокая чувствительность FCU и более низкая мазок из полового члена, использованный только в одном опубликованном исследовании). ).

Распространенность гонореи уретры среди исследуемого мужского населения составляет не менее 3,7%, включая бессимптомных мужчин. Включая 2400 участников с симптомами и без симптомов, это даст более 85 положительных лиц с распространенностью 3,7%. Распространенность уретрального хламидиоза среди исследуемого мужского населения составляет не менее 11%. 2400 участников дадут 260 положительных лиц с распространенностью 11%. Распространенность M. genitalium среди лиц с симптомами уретрита в изучаемой популяции неизвестна, поскольку одобренный в Европе коммерческий диагностический тест с маркировкой Conformité Européene (маркировка CE) только что стал доступен. В 2017 г. было зарегистрировано 500 случаев мужского негонококкового уретрита (НГУ), из которых 100 (20%) должны быть положительными на M. genitalium. Всех с симптоматическим гонококковым уретритом также обследуют на M. genitalium, из которых до 10 мужчин в год также могут быть положительными на M. genitalium. Это означает, что размер выборки в 80 человек может быть достигнут в течение 15 месяцев с охватом 50-60% пациентов с симптомами уретрита. Ожидается, что охват будет высоким, особенно среди пациентов с симптомами уретрита, поскольку исследование предлагает тестирование на M. genitalium, которое еще не доступно в обычной клинической практике, поскольку в настоящее время эта услуга не финансируется. Исследователи провели и опубликовали аналогичные исследования с целью определения оптимальной выборки для выявления хламидиоза и гонореи у женщин, где 42 клиницистов набрали почти 4000 женщин за 10 месяцев, что было короче запланированного периода набора.

Весь анализ данных будет выполняться с использованием номера исследования. Общая чувствительность, специфичность, положительная прогностическая ценность и отрицательная прогностическая ценность будут определяться для самостоятельно взятых мазков из полового члена и образцов мочи первого сбора путем сравнения результатов теста с инфицированным статусом пациента. Сравнение между самостоятельно взятыми мазками из полового члена и образцами FCU будет проводиться с помощью теста Макнемара. Анализы на выявление хламидиоза и гонореи также будут рассчитаны у тех, у кого есть симптомы, и у тех, у кого нет симптомов.

Полезность терапии, ориентированной на устойчивость к противомикробным препаратам (УПП) Полезность использования терапии, управляемой УПП, будет измеряться числом пациентов, которым были бы назначены неподходящие антибиотики, если бы в соответствии с рекомендациями NGU следовали назначению доксициклина, затем пролонгированного азитромицина, затем моксифлоксацина.

Сравнение затрат Экономический анализ будет представлять собой простое сравнение затрат и будет сосредоточен на том, дает ли использование самостоятельно взятых мазков из полового члена экономию затрат по сравнению с образцами FCU. Анализ будет использовать правильное обнаружение Chlamydia trachomatis, Neisseria gonorrhoeae и Mycoplasma genitalium в качестве первичной конечной точки и примет точку зрения Национальной службы здравоохранения Великобритании/Службы прописанных специалистов (NHS/PSS) в соответствии с рекомендациями NICE (NICE 2013). Затраты будут рассчитываться на основе подвыборки из 240 участников. Использование ресурсов и затраты NHS будут собираться перспективно и будут включать затраты времени и ресурсов клиники, а также времени и ресурсов лаборатории. Персонал клиники заполнит специально разработанную форму сбора данных для каждого участника исследования в течение 5-6 недель исследования. Информация об удельных затратах или ценах будет прилагаться к каждому элементу использования ресурсов, чтобы можно было рассчитать общую стоимость (например, Кертис и Бернс, 2016). Окончательное сравнение будет основано на стоимости правильного обнаружения Chlamydia trachomatis, Neisseria gonorrhoeae и Mycoplasma genitalium с использованием самостоятельно взятых мазков из полового члена по сравнению с образцами FCU.