Un ensayo de medicina de precisión funcional basada en organoides en el osteosarcoma (PREMOST)

Los investigadores establecieron con éxito un sistema miniaturizado que permite configurar cientos de pozos y realizar ensayos con una manipulación mínima. La geometría adaptada se utilizó para colocar células tumorales en Matrigel, para generar minianillos alrededor del borde de los pocillos. Esto se logra colocando suspensiones unicelulares obtenidas de una línea celular o una muestra quirúrgica premezclada con Matrigel frío en forma de anillo alrededor del borde en placas de 96 pocillos. Los anillos se pueden establecer utilizando una pipeta de un solo pocillo o multicanal. Las líneas de células cancerosas cultivadas en formato de minianillo dan lugar a organoides tumorales organizados que recapitulan características de la histología original. Se han optimizado los protocolos de tratamiento y las lecturas para el enfoque de minianillo. La siembra de células se lleva a cabo el día 0, se permiten 2-3 días para establecer organoides y es seguido por dos tratamientos farmacológicos diarios consecutivos. El ensayo es flexible y se puede adaptar fácilmente a tratamientos únicos seguidos de incubaciones más prolongadas, múltiples tratamientos recurrentes consecutivos, combinaciones de múltiples fármacos u otras estrategias de detección. Se implementaron ensayos para cuantificar la respuesta al fármaco midiendo la viabilidad celular después de teñir organoides vivos con tintes específicos seguido de imágenes. El proyecto se ha ampliado a los sarcomas: el equipo caracterizó organoides establecidos a partir de más de 120 biopsias, resecciones y metastasectomías de sarcomas. Los organoides del sarcoma mostraron características de crecimiento específicas del paciente e histopatología específica del subtipo. La sensibilidad a los organoides se correlacionó con el subtipo de diagnóstico, la edad del paciente en el momento del diagnóstico, el tipo de lesión, el historial de tratamiento previo y la trayectoria de la enfermedad para un subconjunto de los compuestos analizados. El cribado con organoides puede proporcionar información para facilitar la selección óptima de fármacos, evitar terapias ineficaces y reflejar los resultados de los pacientes con sarcoma.