Uno studio di medicina di precisione funzionale basato su organoidi nell'osteosarcoma (PREMOST)

I ricercatori sono riusciti a creare un sistema miniaturizzato che consente l'allestimento di centinaia di pozzetti e l'esecuzione di analisi con una manipolazione minima. La geometria adattata utilizzata per placcare le cellule tumorali in Matrigel, per generare mini-anelli attorno al bordo dei pozzetti. Ciò si ottiene placcando sospensioni unicellulari ottenute da una linea cellulare o un campione chirurgico premiscelato con Matrigel freddo a forma di anello attorno al bordo in piastre da 96 pozzetti. Gli anelli possono essere stabiliti utilizzando una pipetta a pozzetto singolo o multicanale. Le linee cellulari tumorali coltivate in formato mini-anello danno origine ad organoidi tumorali organizzati che ricapitolano le caratteristiche dell'istologia originale. I protocolli di trattamento e le letture per l'approccio mini-anello sono stati ottimizzati. La semina delle cellule avviene il giorno 0, vengono concessi 2-3 giorni per stabilire gli organoidi ed è seguita da due trattamenti farmacologici giornalieri consecutivi. Il test è flessibile e può essere facilmente adattato a singoli trattamenti seguiti da incubazioni più lunghe, più trattamenti ricorrenti consecutivi, combinazioni multifarmaco o altre strategie di screening. Sono stati implementati test per quantificare la risposta al farmaco misurando la vitalità cellulare dopo la colorazione di organoidi vivi con coloranti specifici seguita da imaging. Il percorso è stato esteso ai sarcomi: il team ha caratterizzato gli organoidi ricavati da oltre 120 biopsie, resezioni e metastasectomie di sarcomi. Gli organoidi del sarcoma hanno mostrato caratteristiche di crescita specifiche del paziente e un'istopatologia specifica del sottotipo. La sensibilità organoide era correlata al sottotipo diagnostico, all'età del paziente alla diagnosi, al tipo di lesione, all'anamnesi dei trattamenti precedenti e alla traiettoria della malattia per un sottogruppo di composti esaminati. Lo screening degli organoidi può fornire informazioni per facilitare la selezione ottimale dei farmaci, evitare terapie inefficaci e rispecchiare gli esiti dei pazienti affetti da sarcoma.