骨肉腫におけるオルガノイドベースの機能的精密医療試験 (PREMOST)

研究者らは、数百のウェルをセットアップし、最小限の操作でアッセイを実行できる小型システムの確立に成功しました。 適合した形状は、マトリゲルに腫瘍細胞をプレーティングするために使用され、ウェルの縁の周りにミニリングを生成します。 これは、細胞株または冷マトリゲルと予め混合した外科標本から得た単細胞懸濁液を、96 ウェル プレートの縁の周りにリング状にプレーティングすることによって達成されます。 リングはシングルウェルまたはマルチチャンネルピペットを使用して確立できます。 ミニリング形式で増殖した癌細胞株は、元の組織構造の特徴を再現する組織化された腫瘍オルガノイドを生じます。 ミニリングアプローチの治療プロトコルと測定値は最適化されています。 細胞の播種は0日目に行われ、2〜3日かけてオルガノイドを確立し、その後2回連続して毎日薬物治療を行います。 このアッセイは柔軟性があり、単一の治療とその後のより長いインキュベーション、複数回の連続した反復治療、多剤併用、またはその他のスクリーニング戦略に簡単に適応できます。 生きたオルガノイドを特定の色素で染色し、続いて画像化した後、細胞生存率を測定することにより、薬物応答を定量化するためのアッセイが実施されました。 このパイプラインは肉腫にも拡張されており、研究チームは 120 件を超える肉腫の生検、切除、転移切除から確立されたオルガノイドの特徴を調べました。 肉腫オルガノイドは、患者固有の増殖特性とサブタイプ固有の組織病理を示しました。 オルガノイド感受性は、スクリーニングされた化合物のサブセットの診断サブタイプ、診断時の患者の年齢、病変の種類、以前の治療歴、および疾患の軌跡と相関していました。 オルガノイドスクリーニングは、最適な薬剤選択を促進し、無効な治療法を回避し、肉腫における患者の転帰を反映するための情報を提供します。