Terapia de células T con linfocitos infiltrantes de tumores editados con CRISPR PD1 para pacientes con melanoma metastásico (CRISPR-TIL)

Criterios de inclusión:

1. Melanoma metastásico o inoperable confirmado histológicamente (estadio IIIc o IV).
2. Enfermedad progresiva después del tratamiento estándar con inhibición del punto de control anti-PD-1 o combinación de lo antes mencionado con inhibición del punto de control anti-CTLA-4.
3. Edad: 18 - 75 años al momento de la firma del consentimiento informado.
4. Estado funcional ECOG de ≤1 (Apéndice 2).
5. Es apto para la resección del tumor y tiene al menos una lesión (> 1 cm3) disponible para la resección quirúrgica para la fabricación de TIL. (A menos que los TIL ya estén disponibles mediante metastasectomía antes de la inscripción en este estudio, como se describe en el paso uno del diseño del estudio)
6. Al menos un parámetro medible de acuerdo con los criterios RECIST 1.1 (excluyendo la lesión a resecar).
7. Evaluación de la FEVI con FEVI documentada ≥50% mediante ETT o MUGA.

8. Función suficiente de los órganos, que incluye:

   • Recuento absoluto de neutrófilos (RAN) ≥ 1.500 /μl
   • Recuento de leucocitos ≥ límite inferior normal
   • Plaquetas ≥ 100.000 /μl y < 700.000 /μl
   • Hemoglobina ≥ 6,0 mmol/l
   • TFGe > 70
   • S-bilirrubina ≤ 1,5 veces el límite superior normal (Excepción: sujetos con metástasis hepática ≤ 2,5 × LSN)
   • ASAT/ALAT ≤ 2,5 veces el límite superior normal (Excepción: sujetos con metástasis hepática ≤ 5,0 × LSN)
   • Fosfatasa alcalina ≤ 5 veces el límite superior normal
   • Lactato deshidrogenasa ≤ 5 veces el límite superior normal
   • Coagulación suficiente: APPT<40 e INR<1,5
9. Declaración de consentimiento firmada después de recibir información del estudio oral y escrita.
10. Voluntad de participar en los controles previstos y capaz de manejar toxicidades.

11. El sujeto debe recibir CRISPR-TIL como siguiente terapia después de la resección del tumor, a menos que se administre una terapia puente:

    • Se desaconseja la terapia puente. Sin embargo, si en opinión del investigador, el sujeto requiere terapia inmediata después de la resección del tumor, el sujeto puede recibir terapia puente durante el período durante el cual el sujeto está esperando la fabricación del producto de infusión de TIL. La terapia puente puede ser una continuación de la terapia que el sujeto estaba recibiendo antes de la resección del tumor o puede ser una terapia nueva.
    • Después de esta terapia puente, el sujeto debe cumplir con los períodos de lavado obligatorios (descritos en el criterio de exclusión 1) y debe continuar teniendo una enfermedad mensurable antes de recibir CRISPR-TIL.

12. Edad y estado reproductivo:

    • Las mujeres en edad fértil (WOCBP) deben tener una prueba de embarazo en orina o suero negativa Y deben aceptar utilizar un método anticonceptivo eficaz comenzando con la primera dosis de quimioterapia durante al menos 12 años. WOCB también debe aceptar abstenerse de donar óvulos, almacenarlos, o banca durante estos mismos períodos de tiempo. Los siguientes se consideran métodos anticonceptivos seguros:

      • Anticoncepción hormonal (píldoras anticonceptivas, espiral, inyección de depósito con gestágeno, implantación subdérmica, anillo vaginal hormonal y parche transdérmico de depósito)
      • dispositivo intrauterino
      • Esterilización quirúrgica
      • Esterilización quirúrgica de la pareja masculina con verificación de que no hay espermatozoides después del procedimiento.
      • Menopausia (durante más de 12 meses)
    • Los varones deben ser quirúrgicamente estériles o aceptar utilizar un método anticonceptivo de doble barrera o abstenerse de actividad sexual con un WOCBP comenzando con la primera dosis de quimioterapia y durante los 6 meses posteriores. Los sujetos masculinos también deben aceptar abstenerse de donar, almacenar o almacenar esperma.

Criterios de exclusión:

1. El sujeto ha recibido o planea recibir la siguiente terapia/tratamiento antes de la resección del tumor (TR) o la quimioterapia linfodeplectora (LDC):

   • Quimioterapia citotóxica: período de lavado 3 semanas antes de TR y LDC.
   • Moléculas pequeñas/TKI: período de lavado 1 semana antes de TR y LDC.
   • Inmunoterapia (terapia AB monoclonal, IPC y biológicos): 2 semanas antes de TR y LDC
   • Terapia previa con células T, incluida la terapia génica utilizando un vector integrador.
   • Corticosteroides en dosis equivalentes > 10 mg de prednisona o cualquier otro tratamiento inmunosupresor. 2 semanas a TR y LDC. Nota: El uso de esteroides tópicos no es una exclusión.
   • Tratamiento en investigación: 4 semanas o 5 vidas medias, lo que sea más corto antes de TR y LDC.
   • Radiación a la pelvis y/o múltiples huesos que contengan ≥ 25% de médula ósea: 4 semanas antes de TR y LDC.
   • Radioterapia cerebral total o radiocirugía estereotáxica cerebral: 4 semanas antes de TR y LDC.
   • Radioterapia de las lesiones diana: 3 meses antes de la infusión de TIL. Una lesión con progresión inequívoca post-radioterapia puede considerarse una lesión diana.
2. Antecedentes de neoplasias malignas previas. Los pacientes tratados por otra neoplasia maligna pueden participar si no presentan signos de enfermedad durante un mínimo de 2 años después del tratamiento. Sujetos con carcinoma ductal in situ tratado curativamente (CDIS o CLIS) cáncer de mama para el cual están tomando terapia hormonal es aceptable. El carcinoma de células escamosas o basocelulares resecable de la piel es aceptable.
3. Pacientes con melanoma metastásico ocular/mucoso u otro melanoma no cutáneo. El melanoma primario desconocido es elegible.
4. La toxicidad de una terapia anticancerígena anterior debe haberse resuelto a ≤ Grado 1 o al valor inicial antes de la inscripción (excepto en el caso de toxicidades no clínicamente significativas, por ejemplo, alopecia, vitíligo). Se pueden inscribir sujetos con toxicidades de Grado 2 que se consideren estables o irreversibles (p. ej., neuropatía periférica).
5. Los pacientes que tengan más de 2 metástasis en el SNC o que tengan cualquier lesión sintomática del SNC, de más de 1 cm de diámetro o que muestren un edema circundante significativo en la resonancia magnética no serán elegibles hasta que hayan sido tratados y no se haya demostrado ninguna progresión clínica o radiológica del SNC. durante al menos 2 meses.

6. Los siguientes pacientes serán excluidos debido a su incapacidad para recibir dosis altas de interleucina-2 (consulte el apéndice 5):

   • Historia de revascularización coronaria.
   • FEVI documentada inferior al 45 % en pacientes con arritmias auriculares y/o ventriculares clínicamente significativas, incluidas, entre otras, fibrilación auricular, taquicardia ventricular, bloqueo cardíaco 2o o 3o.
   • FEV-1 documentado menor o igual al 60 % del valor previsto para pacientes con: antecedentes prolongados de tabaquismo (más de 20 paquetes-año), gran carga tumoral en los pulmones o síntomas de dificultad respiratoria.
7. Hipersensibilidad conocida a uno de los fármacos activos o a uno o más de los excipientes.
8. Condiciones médicas graves, como asma grave/resfriado, enfermedad cardíaca importante y diabetes mellitus insulinodependiente mal regulada, entre otras.
9. Aclaramiento de creatinina (TFGe) < 70 ml/min*.
10. Infección aguda/crónica por VIH, hepatitis y sífilis, entre otras.
11. Alergias graves o reacciones anafilácticas previas.

12. Enfermedad autoinmune activa o inmunomediada que aún no se ha resuelto. Serán elegibles los sujetos que cumplan con lo siguiente:

    • AA inmunomediados secundarios a inmunoterapia que se han resuelto a ≤ Grado 1 sin esteroides;
    • Hipotiroidismo, diabetes tipo I, insuficiencia suprarrenal o insuficiencia pituitaria que se mantienen estables con la terapia de reemplazo;
    • Trastornos como asma, vitiligo, psoriasis o dermatitis atópica que están bien controlados sin requerir inmunosupresión sistémica;
    • Otras condiciones inmunes estables que no requieran prednisona superior a 10 mg/día o su dosis equivalente para otros corticosteroides pueden ser aceptables con el acuerdo del Patrocinador.
13. Mujeres embarazadas y mujeres en período de lactancia.

14. Los sujetos que el investigador del estudio consideró poco probable que cumplieran plenamente con los requisitos del protocolo.

    • En casos seleccionados, se puede decidir incluir a un paciente con una TFGe < 70 ml/min con el uso de una dosis reducida de quimioterapia.