Terapia de células T com linfócitos infiltrantes de tumor editados por CRISPR PD1 para pacientes com melanoma metastático (CRISPR-TIL)

Critérios de inclusão:

1. Melanoma inoperável ou metastático confirmado histologicamente (estágio IIIc ou IV).
2. Doença progressiva após tratamento padrão com inibição do ponto de verificação anti-PD-1 ou combinação dos mencionados acima com inibição do ponto de verificação anti-CTLA-4.
3. Idade: 18 - 75 anos no momento da assinatura do consentimento informado.
4. Status de desempenho ECOG ≤1 (Apêndice 2).
5. Está apto para ressecção tumoral e possui pelo menos uma lesão (> 1 cm3) disponível para ressecção cirúrgica para confecção de TIL. (A menos que TILs já estejam disponíveis por meio de metastasectomia antes da inscrição neste estudo, conforme descrito na etapa um do desenho do estudo)
6. Pelo menos um parâmetro mensurável de acordo com os critérios RECIST 1.1 (excluindo a lesão a ser ressecada).
7. Avaliação da FEVE com FEVE documentada ≥50% por ETT ou MUGA.

8. Função orgânica suficiente, incluindo:

   • Contagem absoluta de neutrófilos (CAN) ≥ 1.500 /μl
   • Contagem de leucócitos ≥ limite inferior normal
   • Plaquetas ≥ 100.000 /μl e <700.000 /μl
   • Hemoglobina ≥ 6,0 mmol/l
   • TFGe > 70
   • S-bilirrubina ≤ 1,5 vezes o limite superior normal (Exceção: indivíduos com metástase hepática ≤ 2,5 × LSN)
   • ASAT/ALAT ≤ 2,5 vezes o limite superior normal (Exceção: indivíduos com metástase hepática ≤ 5,0 × LSN)
   • Fosfatase alcalina ≤ 5 vezes o limite superior normal
   • Lactato desidrogenase ≤ 5 vezes o limite superior normal
   • Coagulação suficiente: APPT<40 e INR<1,5
9. Declaração de consentimento assinada após receber informações orais e escritas do estudo
10. Disponibilidade para participar nos controles planejados e ser capaz de lidar com toxicidades.

11. O indivíduo deve receber CRISPR-TIL como a próxima terapia após a ressecção do tumor, a menos que seja administrada terapia de ponte:

    • A terapia de ponte é desencorajada. No entanto, se na opinião do Investigador, o sujeito necessita de terapia imediata após a ressecção do tumor, o sujeito pode receber terapia de ponte durante o período durante o qual o sujeito está aguardando a fabricação do produto de infusão de TIL. A terapia de ligação pode ser uma continuação da terapia que o sujeito estava recebendo antes da ressecção do tumor ou pode ser uma nova terapia.
    • Após esta terapia de ponte, o sujeito deve aderir aos períodos de eliminação obrigatórios (descritos no critério de exclusão 1) e deve continuar a ter doença mensurável antes de receber CRISPR-TIL.

12. Idade e estado reprodutivo:

    • Mulheres com potencial para engravidar (WOCBP) devem ter um teste de gravidez negativo na urina ou no soro E devem concordar em usar um método contraceptivo eficaz começando com a primeira dose de quimioterapia por pelo menos 12 anos. ou bancário durante esses mesmos períodos. Os seguintes são considerados métodos contraceptivos seguros:

      • Anticoncepção hormonal (pílulas anticoncepcionais, espiral, injeção de depósito com gestagênio, implantação subdérmica, anel vaginal hormonal e adesivo transdérmico de depósito)
      • Dispositivo intrauterino
      • Esterilização cirúrgica
      • Esterilização cirúrgica do parceiro masculino com verificação de ausência de espermatozóides após o procedimento
      • Menopausa (por mais de 12 meses)
    • Os indivíduos do sexo masculino devem ser cirurgicamente estéreis ou concordar em usar um método contraceptivo de barreira dupla ou abster-se de atividade sexual com um WOCBP começando na primeira dose de quimioterapia e por 6 meses depois. Os indivíduos do sexo masculino também devem concordar em abster-se de doação, armazenamento ou armazenamento de esperma.

Critérios de exclusão:

1. O sujeito recebeu ou planeja receber a seguinte terapia/tratamento antes da ressecção do tumor (TR) ou quimioterapia linfodepletora (LDC):

   • Quimioterapia citotóxica: período de washout 3 semanas antes de TR e LDC.
   • Moléculas pequenas/TKI: Período de eliminação 1 semana antes de TR e LDC.
   • Imunoterapia (terapia monoclonal AB, CPI e produtos biológicos): 2 semanas antes de TR e LDC
   • Terapia prévia com células T, incluindo terapia genética usando um vetor de integração.
   • Corticosteróides em dose equivalente> 10 mg de prednisona ou qualquer outra terapia imunossupressora. 2 semanas antes de TR e LDC. Nota: O uso de esteróides tópicos não é uma exclusão.
   • Tratamento experimental: 4 semanas ou 5 meias-vidas, o que for menor antes de TR e LDC.
   • Radiação na pelve e/ou múltiplos ossos contendo ≥ 25% de medula óssea: 4 semanas antes de TR e LDC.
   • Radioterapia cerebral total ou radiocirurgia estereotáxica cerebral: 4 semanas antes de TR e LDC.
   • Radioterapia nas lesões alvo: 3 meses antes da infusão de TIL. Uma lesão com progressão inequívoca pós-radioterapia pode ser considerada uma lesão-alvo.
2. Uma história de malignidades anteriores. Pacientes tratados para outra doença maligna podem participar se não apresentarem sinais de doença por no mínimo 2 anos após o tratamento. Indivíduos com câncer de mama de carcinoma ductal in situ (DCIS ou LCIS) tratado curativamente para o qual estão tomando terapia hormonal são aceitáveis. Carcinoma escamoso ou basocelular ressecável da pele é aceitável.
3. Pacientes com melanoma ocular/mucoso metastático ou outro melanoma não cutâneo. Melanoma primário desconhecido é elegível.
4. A toxicidade da terapia anticâncer anterior deve ter sido resolvida para ≤ Grau 1 ou linha de base antes da inscrição (exceto para toxicidades não clinicamente significativas, por exemplo, alopecia, vitiligo). Indivíduos com toxicidades de Grau 2 consideradas estáveis ​​ou irreversíveis (por exemplo, neuropatia periférica) podem ser inscritos.
5. Pacientes que tenham mais de 2 metástases no SNC ou que tenham qualquer lesão no SNC que seja sintomática, maior que 1 cm de diâmetro ou que apresentem edema circundante significativo na ressonância magnética não serão elegíveis até que tenham sido tratados e não demonstrem progressão clínica ou radiológica do SNC por pelo menos 2 meses.

6. Os seguintes pacientes serão excluídos devido à sua incapacidade de receber altas doses de interleucina-2 (ver apêndice 5):

   • História de revascularização coronária
   • FEVE documentada inferior a 45% em pacientes com arritmias atriais e/ou ventriculares clinicamente significativas, incluindo, entre outras, fibrilação atrial, taquicardia ventricular, bloqueio cardíaco de 2o ou 3o
   • VEF-1 documentado menor ou igual a 60% do valor previsto para pacientes com: História prolongada de tabagismo (maior que 20 anos-maço), grande carga tumoral nos pulmões ou sintomas de dificuldade respiratória.
7. Hipersensibilidade conhecida a um dos medicamentos ativos ou a um ou mais dos excipientes.
8. Condições médicas graves, como asma/resfriado grave, doença cardíaca significativa e diabetes mellitus dependente de insulina mal regulada, entre outras.
9. Depuração de creatinina (TFGe) < 70 ml/min*.
10. Infecção aguda/crônica por HIV, hepatite e sífilis, entre outras.
11. Alergias graves ou reações anafiláticas anteriores.

12. Doença autoimune ou imunomediada ativa que ainda não foi resolvida. Serão elegíveis assuntos com o seguinte:

    • EAs imunomediados secundários à imunoterapia que foram resolvidos para ≤ Grau 1 sem esteróides;
    • Hipotireoidismo, diabetes tipo I, insuficiência adrenal ou insuficiência hipofisária que são estáveis ​​na terapia de reposição;
    • Distúrbios como asma, vitiligo, psoríase ou dermatite atópica que são bem controlados sem necessidade de imunossupressão sistêmica;
    • Outras condições imunológicas estáveis ​​que não requeiram prednisona superior a 10 mg/dia ou dose equivalente para outros agentes corticosteróides podem ser aceitáveis ​​com a concordância do Patrocinador.
13. Gestantes e mulheres amamentando.

14. Sujeitos considerados improváveis ​​de cumprir integralmente os requisitos do protocolo pelo investigador do estudo.

    • Em casos selecionados pode-se decidir incluir um paciente com TFGe < 70 ml/min com uso de dose reduzida de quimioterapia.