Tutkimus uuden munasarjojen stimulaatioohjelman vaikutuksista alkion aneuploidiaan in vitro -hedelmöityksessä (IVF)

Tausta:

Rajoittamalla kohtuun siirrettävien alkioiden määrä vain yhteen alkioon voidaan vähentää monisikiöiden riskiä. Yksittäisen alkionsiirron tehokkuuden parantamiseksi on elintärkeää kyky valita alkio, jolla on korkein potentiaali kehittyä terveeksi lapseksi. Vaikka standardoidun morfologisen arvioinnin perusteella korkealaatuisiksi arvioidut alkiot liittyvät korkeampiin implantaatio- ja raskausasteisiin, ei ole vieläkään mahdollista ennustaa varmuudella, mikä alkio istuutuu ja jolla on suurin potentiaali kehittyä terveeksi lapseksi. Yhä useammat todisteet osoittavat, että kromosomipoikkeavuuksien ilmaantuvuus alkioissa on erittäin korkea ja hyvä alkion morfologia ei välttämättä sulje pois epänormaalia kromosomaalista rakennetta. Koska aneuploidioita pidetään alkion häviämisen ja menetyksen pääasiallisena syynä, tämä ilmiö saattaa olla ensisijaisesti vastuussa IVF:n jälkeen raportoiduista suhteellisen huonoista raskausluvuista.

Fluoresoivan in situ -hybridisaatiotekniikan (FISH) käyttöönotto preimplantaation geneettiseen diagnoosiin on mahdollistanut alkioiden seulonnan kromosomaalisten aneuploidien varalta ennen siirtoa. Preimplantaatiogeneettinen seulonta (PGS) olisi erityisen kiinnostava pariskunnille, joilla uskotaan olevan suurempi riski saada kromosomaalisesti epänormaalit alkiot. Tavoitteena on parantaa heidän mahdollisuuksiaan raskauden jatkumiseen IVF:n jälkeen. PGS:ää käytetään kliinisesti lukuisissa IVF-laboratorioissa kaikkialla maailmassa, ja IVF-peräisissä alkioissa on raportoitu suuria kromosomipoikkeavuuksia. Äskettäinen meta-analyysi on kuitenkin osoittanut, että PGS:llä ei ole vielä merkittävää vaikutusta IVF-tuloksiin. Tämä saattaa osittain selittyä sillä, että suurin osa tässä vaiheessa havaituista aneuploidioista on peräisin varhaisen preimplantaatiokehityksen ensimmäisistä mitoottisista jakautumisista, mikä johtaa kromosomaalisesti mosaiikkialkioihin. Jos kromosomaalisesti mosaiikkialkiosta otetaan biopsia, tämä solu ei välttämättä edusta jäljellä olevaa alkiota.

Tutkijoiden ryhmä sai äskettäin päätökseen ensimmäisen prospektiivisesti suunnitellun, satunnaistetun tutkimuksen, jossa verrattiin alkion aneuploidia kahden munasarjojen hyperstimulaatiohoidon jälkeen 111 IVF-potilaan ryhmässä. Lievämpi stimulaatio liittyi talteen otettujen munasolujen ja synnytettyjen alkioiden määrän vähenemiseen. Kromosominormaalien alkioiden osuus kasvoi kuitenkin merkittävästi. Nämä tulokset osoittivat ensimmäistä kertaa suoran korrelaation munasarjojen stimulaatioprotokollan ja kromosomipoikkeavuuksien esiintyvyyden välillä alkiossa. Havainto, että joillakin potilailla lievä stimulaatio johti edelleen korkeaan munasolusaatoon ja samaan aikaan suurempiin epänormaalien alkioiden osuuksiin, korostaa tarvetta kehittää edelleen minimaalisia stimulaatiomenetelmiä.

Ensisijainen tavoite:

Sen määrittämiseksi, johtaako hCG:n antaminen myöhäisen follikulaarisen vaiheen aikana kiinteän annoksen FSH:n käytön jatkamisen sijaan homogeenisempaan kasvavien follikkelien kohorttiin ja vain pätevimpien munasolujen kehittymiseen, mikä johtaa alempaan aneuploidiaan tuloksena olevissa alkioissa.

Opintojen suunnittelu:

Prospektiivisesti satunnaistettu kliininen tutkimus 110 naisella, jotka saavat IVF-hoitoa

Interventio:

Satunnaistaminen toiseen kahdesta munasarjojen stimulaatioprotokollasta:

1. Perinteinen hoito-ohjelma, jossa vuorokausiannos on 225 IU rekombinantti-FSH:n ja GnRH-agonistien pitkäaikainen yhteishoito
2. Lievä munasarjojen stimulaatiohoito, jossa käytetään endogeenistä FSH-tuotantoa aloittamalla hoito kuukautiskierron 5. päivänä 150 IU/d recFSH:lla ja GnRH-antagonistilla, alkaen päivästä 6. Heti kun kaksi follikkelia saavuttaa 12 mm, hoitoa jatketaan 200 IU/d rec hCG:llä.

Molemmissa käsissä munasolujen kerääminen, keinosiemennys ja alkioviljely suoritetaan standardimenettelyjen mukaisesti. Päivänä 3 kaikista sopivista alkioista otetaan biopsia ja yksi tai kaksi blastomeeriä poistetaan alkion sisällä olevien solujen lukumäärästä riippuen.

FISH-analyysi suoritetaan 10 kromosomille (1, 7, 13, 15, 16, 18, 21, 22, X ja Y). Vain kromosomaalisesti normaalit alkiot siirretään ja kylmäsäilytetään. Aneuploidiksi tai mosaiikiksi diagnosoitujen alkioiden implantaatio- ja kehityspotentiaali tutkitaan siirtämällä ne in vitro -istutusmalliin. Pitkän viljelyjakson jälkeen implantaatiokäyttäytyminen arvioidaan ja koko alkio analysoidaan uudelleen kromosomaalisesti epänormaalien solujen osuuden havaitsemiseksi. Implantaatiokäyttäytyminen korreloi poikkeavuuden tyypin ja asiaan liittyvien kromosomien kanssa.

Ensisijaiset tulosparametrit:

Munasarjojen vaste mitattuna saatujen munasolujen lukumäärällä ja kromosomaalisesti epänormaalien alkioiden osuudella potilasta kohti.

Toissijaiset tulosparametrit:

Poistettujen munasolujen määrä, hedelmöitysluvut ja morfologisesti korkealaatuisten alkioiden osuus päivänä 3.

Seerumin estradioli-, LH-, progesteroni-, androgeeni- ja hCG-tasot syklin 3. päivänä ja hCG-päivänä.