Studie účinků nového ovariálního stimulačního režimu na míru aneuploidie embryí při oplodnění in vitro (IVF)

Pozadí:

Omezením počtu embryí přenesených do dělohy pouze na jedno embryo lze snížit riziko vícečetné březosti. Pro zlepšení účinnosti transferu jednoho embrya je životně důležitá schopnost vybrat embryo s nejvyšším potenciálem vyvinout se ve zdravé dítě. Zatímco embrya hodnocená jako vysoce kvalitní standardizovaným morfologickým hodnocením jsou spojena s vyšší mírou implantace a těhotenství, stále není možné s jistotou předpovědět, které embryo se implantuje a má nejvyšší potenciál vyvinout se ve zdravé dítě. Rostoucí množství důkazů ukazuje, že výskyt chromozomálních abnormalit u embryí je extrémně vysoký a dobrá morfologie embrya nutně nevylučuje abnormální chromozomální konstituci. Vzhledem k tomu, že aneuploidie jsou považovány za hlavní příčinu úbytku a ztráty embryí, může být tento jev primárně zodpovědný za relativně nízkou míru otěhotnění hlášenou po IVF.

Zavedení technik fluorescenční in-situ hybridizace (FISH) pro preimplantační genetickou diagnostiku umožnilo screening embryí na chromozomální aneuploidie před transferem. Preimplantační genetický screening (PGS) by byl zvláště zajímavý pro páry, u kterých se předpokládá vyšší riziko vývoje chromozomálně abnormálních embryí, s cílem zlepšit jejich šance na pokračující těhotenství po IVF. PGS se klinicky používá v mnoha laboratořích IVF po celém světě a u embryí pocházejících z IVF byla hlášena vysoká míra chromozomálních abnormalit. Nedávná metaanalýza však ukázala, že PGS zatím nemá významný dopad na výsledky IVF. To lze částečně vysvětlit skutečností, že většina aneuploidií pozorovaných v této fázi pochází z prvních mitotických dělení časného preimplantačního vývoje, což vede k chromozomálně mozaikovým embryím. Pokud je biopsie chromozomálně mozaikového embrya, tato buňka nemusí být reprezentativní pro zbývající embryo.

Skupina výzkumníků nedávno dokončila první prospektivně navrženou, randomizovanou studii, porovnávající míru aneuploidie embryí po dvou režimech ovariální hyperstimulace u skupiny 111 pacientek s IVF. Mírnější stimulace byla spojena se snížením počtu získaných oocytů a vytvořených embryí. Podíl chromozomálně normálních embryí však byl významně zvýšen. Tyto výsledky poprvé ukázaly přímou korelaci mezi protokolem ovariální stimulace a výskytem chromozomových abnormalit v embryu. Pozorování, že mírná stimulace u některých pacientek stále vedla k vysokému výtěžku oocytů a současně vyššímu podílu abnormálních embryí, podtrhuje potřebu dalšího rozvoje přístupů minimální stimulace.

Primární cíl:

Zjistit, zda podávání hCG během pozdní folikulární fáze, namísto pokračování s fixní dávkou FSH, vede k homogennější kohortě rostoucích folikulů a vývoji pouze nejkompetentnějších oocytů, což vede k nižší míře aneuploidie ve výsledných embryích.

Studovat design:

Prospektivně randomizovaná klinická studie u 110 žen podstupujících léčbu IVF

Zásah:

Randomizace na jeden ze dvou protokolů ovariální stimulace:

1. Konvenční režim s denní dávkou 225 IU rekombinantního FSH a agonisty GnRH s dlouhým protokolem souběžné léčby
2. Mírný režim ovariální stimulace využívající endogenní produkci FSH zahájením léčby 5. den menstruačního cyklu 150 IU/d recFSH se souběžnou léčbou antagonistou GnRH začínající 6. den. Jakmile dva folikuly dosáhnou 12 mm, léčba pokračuje 200 IU/d rec hCG.

V obou ramenech bude proveden odběr oocytů, inseminace a kultivace embryí podle standardních postupů. V den 3 se všem vhodným embryím provede biopsie a odstraní se jedna nebo dvě blastomery, v závislosti na počtu buněk v embryu.

Analýza FISH bude provedena pro 10 chromozomů (1, 7, 13, 15, 16, 18, 21, 22, X a Y). Budou přenesena a kryokonzervována pouze chromozomálně normální embrya. Embrya diagnostikovaná jako aneuploidní nebo mozaiková budou zkoumána z hlediska jejich implantačního a vývojového potenciálu jejich převedením do in vitro implantačního modelu. Po delší kultivační periodě se vyhodnotí chování při implantaci a celé embryo se znovu analyzuje, aby se detekoval podíl chromozomálně abnormálních buněk. Implantační chování bude korelovat s typem abnormality a zapojeným(ých) chromozomem(y).

Primární výstupní parametry:

Ovariální odpověď, hodnocená počtem získaných oocytů a podílem chromozomálně abnormálních embryí na pacienta.

Sekundární výstupní parametry:

Počet odebraných oocytů, míra oplodnění a podíl morfologicky vysoce kvalitních embryí 3. den.

Hladiny estradiolu, LH, progesteronu, androgenu a hCG v séru v den cyklu 3 a den hCG.