Badanie wpływu nowego schematu stymulacji jajników na wskaźniki aneuploidii zarodków w zapłodnieniu in vitro (IVF)

Tło:

Ograniczając liczbę zarodków przenoszonych do macicy tylko do jednego zarodka, można zmniejszyć ryzyko ciąży mnogiej. W celu poprawy efektywności pojedynczego transferu zarodków niezwykle istotna jest umiejętność wyselekcjonowania zarodka o największym potencjale do rozwoju w zdrowe dziecko. Podczas gdy zarodki ocenione jako wysokiej jakości na podstawie wystandaryzowanej oceny morfologicznej wiążą się z wyższymi wskaźnikami implantacji i ciąż, nadal nie można z całą pewnością przewidzieć, który zarodek zagnieżdża się i ma największy potencjał, aby rozwinąć się w zdrowe dziecko. Coraz więcej dowodów wskazuje na to, że częstość występowania nieprawidłowości chromosomalnych w zarodkach jest niezwykle wysoka, a dobra morfologia zarodka niekoniecznie wyklucza nieprawidłową budowę chromosomów. Ponieważ aneuploidie są uważane za główną przyczynę marnotrawstwa i utraty zarodków, zjawisko to może być przede wszystkim odpowiedzialne za stosunkowo niskie wskaźniki ciąż zgłaszane po zapłodnieniu in vitro.

Wprowadzenie technik fluorescencyjnej hybrydyzacji in situ (FISH) do preimplantacyjnej diagnostyki genetycznej umożliwiło badanie przesiewowe zarodków pod kątem aneuploidii chromosomowych przed transferem. Genetyczne badania przesiewowe przedimplantacyjne (PGS) byłyby szczególnie interesujące dla par, w przypadku których uważa się, że są bardziej narażone na rozwój zarodków z nieprawidłowymi chromosomami, w celu zwiększenia ich szans na trwającą ciążę po zapłodnieniu in vitro. PGS jest stosowany klinicznie w wielu laboratoriach IVF na całym świecie i odnotowano wysoki odsetek nieprawidłowości chromosomalnych w zarodkach pochodzących z IVF. Jednak niedawna metaanaliza wykazała, że ​​PGS nie ma jeszcze znaczącego wpływu na wyniki IVF. Można to częściowo wytłumaczyć faktem, że większość aneuploidii obserwowanych na tym etapie pochodzi z pierwszych podziałów mitotycznych wczesnego rozwoju przedimplantacyjnego, w wyniku czego powstają zarodki mozaiki chromosomalnej. Jeśli zarodek z mozaiką chromosomów zostanie poddany biopsji, komórka ta może nie być reprezentatywna dla pozostałego zarodka.

Grupa badaczy niedawno zakończyła pierwsze prospektywnie zaprojektowane, randomizowane badanie porównujące wskaźniki aneuploidii zarodków po dwóch schematach hiperstymulacji jajników w grupie 111 pacjentek IVF. Łagodniejsza stymulacja wiązała się ze zmniejszeniem liczby pobieranych komórek jajowych i generowanych zarodków. Jednak odsetek zarodków prawidłowych pod względem chromosomów znacznie się zwiększył. Wyniki te po raz pierwszy wykazały bezpośrednią korelację między protokołem stymulacji jajników a występowaniem nieprawidłowości chromosomalnych w zarodku. Obserwacja, że ​​łagodna stymulacja u niektórych pacjentów nadal skutkowała wysoką wydajnością oocytów i towarzyszącym jej wyższym odsetkiem nieprawidłowych zarodków, podkreśla potrzebę dalszego rozwoju metod minimalnej stymulacji.

Podstawowy cel:

Ustalenie, czy podawanie hCG w późnej fazie folikularnej, zamiast kontynuacji stałej dawki FSH, prowadzi do bardziej jednorodnej kohorty rosnących pęcherzyków i rozwoju tylko najbardziej kompetentnych oocytów, co prowadzi do niższych wskaźników aneuploidii w powstałych zarodkach.

Projekt badania:

Prospektywnie randomizowane badanie kliniczne z udziałem 110 kobiet poddawanych zabiegowi IVF

Interwencja:

Randomizacja do jednego z dwóch protokołów stymulacji jajników:

1. Konwencjonalny schemat z dzienną dawką 225 j.m. rekombinowanego FSH i agonisty GnRH długi protokół jednoczesnego leczenia
2. Schemat łagodnej stymulacji jajników z wykorzystaniem endogennej produkcji FSH poprzez rozpoczęcie leczenia w 5. dniu cyklu miesiączkowego od 150 IU/d recFSH z jednoczesnym leczeniem antagonistą GnRH począwszy od 6. dnia. Gdy tylko dwa pęcherzyki osiągną 12 mm, leczenie kontynuuje się 200 IU/d rec hCG.

W obu ramionach pobranie oocytów, inseminacja i hodowla zarodków zostaną przeprowadzone zgodnie ze standardowymi procedurami. Trzeciego dnia wszystkie odpowiednie zarodki zostaną poddane biopsji i usunięty jeden lub dwa blastomery, w zależności od liczby komórek w zarodku.

Analiza FISH zostanie przeprowadzona dla 10 chromosomów (1, 7, 13, 15, 16, 18, 21, 22, X i Y). Tylko zarodki z prawidłowym chromosomem zostaną przeniesione i poddane kriokonserwacji. Zarodki zdiagnozowane jako aneuploidalne lub mozaikowe będą badane pod kątem ich implantacji i potencjału rozwojowego, poprzez przeniesienie ich do modelu implantacji in vitro. Po dłuższym okresie hodowli zostanie oceniony przebieg implantacji i ponowna analiza całego zarodka w celu wykrycia odsetka komórek z nieprawidłowymi chromosomami. Zachowanie implantacji będzie skorelowane z rodzajem nieprawidłowości i zaangażowanym chromosomem (chromosomami).

Główne parametry wyniku:

Odpowiedź jajników, oceniana na podstawie liczby uzyskanych komórek jajowych i odsetka zarodków z nieprawidłowymi chromosomami na pacjentkę.

Parametry wyników drugorzędowych:

Liczba pobranych oocytów, wskaźniki zapłodnienia i odsetek zarodków o wysokiej jakości morfologicznej w dniu 3.

Poziomy estradiolu, LH, progesteronu, androgenów i hCG w surowicy w 3 dniu cyklu i dniu hCG.