Uno studio sugli effetti di un nuovo regime di stimolazione ovarica sui tassi di aneuploidia embrionale nella fecondazione in vitro (IVF)

Sfondo:

Limitando il numero di embrioni trasferiti nell'utero a un solo embrione, è possibile ridurre il rischio di gravidanze multiple. Per migliorare l'efficacia del trasferimento di un singolo embrione, la possibilità di selezionare l'embrione con il più alto potenziale di sviluppo in un bambino sano è di vitale importanza. Sebbene gli embrioni valutati come di alta qualità da una valutazione morfologica standardizzata siano associati a tassi di impianto e gravidanza più elevati, non è ancora possibile prevedere con certezza quale embrione si impianta e ha il più alto potenziale di sviluppo in un bambino sano. Un numero crescente di prove indica che l'incidenza di anomalie cromosomiche negli embrioni è estremamente elevata e che una buona morfologia embrionale non esclude necessariamente una costituzione cromosomica anomala. Poiché le aneuploidie sono considerate la principale causa di perdita e perdita embrionale, questo fenomeno potrebbe essere il principale responsabile dei tassi di gravidanza relativamente bassi riportati dopo la fecondazione in vitro.

L'introduzione di tecniche di ibridazione in situ fluorescente (FISH) per la diagnosi genetica preimpianto ha consentito lo screening degli embrioni per le aneuploidie cromosomiche prima del trasferimento. Lo screening genetico preimpianto (PGS) sarebbe di particolare interesse per le coppie che si ritiene abbiano un rischio maggiore di sviluppare embrioni cromosomicamente anomali, con l'obiettivo di migliorare le loro possibilità di una gravidanza in corso dopo la fecondazione in vitro. La PGS viene applicata clinicamente in numerosi laboratori di fecondazione in vitro in tutto il mondo e sono stati riportati alti tassi di anomalie cromosomiche negli embrioni derivati ​​dalla fecondazione in vitro. Tuttavia, una recente meta-analisi ha dimostrato che il PGS deve ancora avere un impatto significativo sugli esiti della fecondazione in vitro. Ciò può essere in parte spiegato dal fatto che la maggior parte delle aneuploidie osservate in questa fase hanno origine durante le prime divisioni mitotiche del primo sviluppo preimpianto, risultando in embrioni con mosaico cromosomico. Se si esegue la biopsia di un embrione con mosaico cromosomico, questa cellula potrebbe non essere rappresentativa dell'embrione rimanente.

Il gruppo dei ricercatori ha recentemente completato il primo studio randomizzato progettato in modo prospettico, confrontando i tassi di aneuploidia embrionale dopo due regimi di iperstimolazione ovarica in un gruppo di 111 pazienti con fecondazione in vitro. Una stimolazione più lieve è stata associata a una riduzione del numero di ovociti recuperati e di embrioni generati. Tuttavia, la proporzione di embrioni cromosomicamente normali era significativamente aumentata. Questi risultati hanno mostrato per la prima volta una correlazione diretta tra il protocollo di stimolazione ovarica e l'incidenza di anomalie cromosomiche nell'embrione. L'osservazione che la stimolazione lieve in alcuni pazienti ha comunque portato a un'elevata resa di ovociti e al concorso di proporzioni più elevate di embrioni anormali, sottolinea la necessità di un ulteriore sviluppo di approcci di stimolazione minima.

Obiettivo primario:

Determinare se la somministrazione di hCG durante la fase follicolare tardiva, invece di continuare con una dose fissa di FSH, si traduce in una coorte più omogenea di follicoli in crescita e nello sviluppo solo degli ovociti più competenti, portando a tassi di aneuploidia inferiori negli embrioni risultanti.

Disegno dello studio:

Studio clinico prospettico randomizzato su 110 donne sottoposte a trattamento di fecondazione in vitro

Intervento:

Randomizzazione a uno dei due protocolli di stimolazione ovarica:

1. Regime convenzionale con una dose giornaliera di 225 UI di FSH ricombinante e agonista del GnRH lungo protocollo di co-trattamento
2. Regime di lieve stimolazione ovarica che utilizza la produzione endogena di FSH iniziando il trattamento il giorno 5 del ciclo mestruale con 150 UI/die di recFSH con co-trattamento con antagonista del GnRH a partire dal giorno 6. Non appena due follicoli raggiungono i 12 mm, il trattamento viene continuato con 200 UI/d rec hCG.

In entrambi i bracci, il prelievo degli ovociti, l'inseminazione e la coltura dell'embrione saranno eseguiti secondo procedure standard. Il giorno 3, tutti gli embrioni idonei saranno sottoposti a biopsia e uno o due blastomeri rimossi, a seconda del numero di cellule all'interno dell'embrione.

L'analisi FISH sarà eseguita per 10 cromosomi (1, 7, 13, 15, 16, 18, 21, 22, X e Y). Verranno trasferiti e criopreservati solo embrioni cromosomicamente normali. Gli embrioni diagnosticati come aneuploidi oa mosaico saranno studiati per il loro impianto e potenziale di sviluppo, trasferendoli in un modello di impianto in vitro. Dopo un lungo periodo di coltura, verrà valutato il comportamento di impianto e l'intero embrione verrà rianalizzato per rilevare la proporzione di cellule cromosomicamente anormali. Il comportamento di impianto sarà correlato al tipo di anomalia e al/i cromosoma/i coinvolto/i.

Parametri di risultato primari:

Risposta ovarica, valutata dal numero di ovociti ottenuti e dalla proporzione di embrioni cromosomicamente anormali per paziente.

Parametri di risultato secondari:

Numero di ovociti recuperati, tassi di fecondazione e proporzione di embrioni morfologicamente di alta qualità il giorno 3.

Livelli sierici di estradiolo, LH, progesterone, androgeni e hCG il giorno 3 del ciclo e il giorno dell'hCG.