Изучение влияния нового режима стимуляции яичников на показатели анеуплоидии эмбрионов при экстракорпоральном оплодотворении (ЭКО)

Фон:

Ограничивая количество переносимых в матку эмбрионов только одним эмбрионом, можно снизить риск многоплодной беременности. Для повышения эффективности переноса одного эмбриона жизненно важное значение имеет возможность выбора эмбриона с самым высоким потенциалом для развития здорового ребенка. В то время как эмбрионы, оцененные как высококачественные по стандартизированной морфологической оценке, связаны с более высокими показателями имплантации и наступления беременности, до сих пор невозможно с уверенностью предсказать, какой эмбрион будет имплантирован и имеет самый высокий потенциал для развития в здорового ребенка. Растущий объем данных указывает на то, что частота хромосомных аномалий у эмбрионов чрезвычайно высока, и хорошая морфология эмбриона не обязательно исключает аномальную хромосомную конституцию. Поскольку анеуплоидии считаются основной причиной потери и потери эмбрионов, это явление может быть основной причиной относительно низкой частоты наступления беременности после ЭКО.

Внедрение методов флуоресцентной гибридизации in situ (FISH) для преимплантационной генетической диагностики позволило провести скрининг эмбрионов на наличие хромосомных анеуплоидий перед переносом. Преимплантационный генетический скрининг (ПГС) представляет особый интерес для пар, которые, как считается, имеют более высокий риск развития хромосомных аномалий эмбрионов, с целью повышения их шансов на продолжающуюся беременность после ЭКО. ПГС клинически применяется во многих лабораториях ЭКО по всему миру, и у эмбрионов, полученных с помощью ЭКО, были зарегистрированы высокие показатели хромосомных аномалий. Однако недавний метаанализ показал, что ПГС еще не оказала существенного влияния на результаты ЭКО. Это может быть частично объяснено тем фактом, что большинство анеуплоидий, наблюдаемых на этой стадии, возникают во время первых митотических делений раннего преимплантационного развития, что приводит к хромосомно-мозаичным эмбрионам. Если проводится биопсия хромосомно-мозаичного эмбриона, эта клетка может не быть репрезентативной для оставшегося эмбриона.

Группа исследователей недавно завершила первое проспективно спланированное рандомизированное исследование, в котором сравнивались показатели анеуплоидии эмбрионов после двух режимов гиперстимуляции яичников в группе из 111 пациенток ЭКО. Более мягкая стимуляция была связана с уменьшением количества извлеченных ооцитов и полученных эмбрионов. Однако значительно увеличилась доля хромосомно нормальных эмбрионов. Эти результаты впервые показали прямую корреляцию между протоколом стимуляции яичников и частотой хромосомных аномалий у эмбриона. Наблюдение, что мягкая стимуляция у некоторых пациенток по-прежнему приводила к высокому выходу ооцитов и одновременно более высокому проценту аномальных эмбрионов, подчеркивает необходимость дальнейшей разработки подходов минимальной стимуляции.

Основная цель:

Определить, приводит ли введение ХГЧ на поздней фолликулярной фазе вместо продолжения фиксированной дозы ФСГ к более однородной когорте растущих фолликулов и развитию только наиболее компетентных ооцитов, что приводит к снижению частоты анеуплоидии у получающихся эмбрионов.

Дизайн исследования:

Проспективное рандомизированное клиническое исследование с участием 110 женщин, перенесших ЭКО.

Вмешательство:

Рандомизация к одному из двух протоколов стимуляции яичников:

1. Традиционная схема с суточной дозой 225 МЕ рекомбинантного ФСГ и агониста ГнРГ, длительный протокол совместного лечения
2. Мягкий режим стимуляции яичников с использованием продукции эндогенного ФСГ, начиная лечение на 5-й день менструального цикла с 150 МЕ/сут рекФСГ с одновременным лечением антагонистом ГнРГ, начиная с 6-го дня. Как только два фолликула достигнут 12 мм, лечение продолжают 200 МЕ/сут реком ХГЧ.

В обеих группах забор ооцитов, осеменение и культивирование эмбрионов будут проводиться в соответствии со стандартными процедурами. На 3-й день все подходящие эмбрионы будут подвергнуты биопсии и удалены один или два бластомера, в зависимости от количества клеток внутри эмбриона.

Анализ FISH будет проводиться для 10 хромосом (1, 7, 13, 15, 16, 18, 21, 22, X и Y). Только хромосомно нормальные эмбрионы будут перенесены и подвергнуты криоконсервации. Эмбрионы с диагнозом анеуплоидии или мозаики будут исследованы на предмет их потенциала имплантации и развития путем переноса их на модель имплантации in vitro. После длительного периода культивирования будет оцениваться поведение при имплантации, и весь эмбрион подвергается повторному анализу для определения доли хромосомных аномальных клеток. Поведение при имплантации будет коррелировать с типом аномалии и задействованными хромосомами.

Первичные параметры результата:

Реакция яичников, оцениваемая по количеству полученных ооцитов и доле эмбрионов с хромосомными аномалиями на одну пациентку.

Вторичные параметры результата:

Количество извлеченных ооцитов, частота оплодотворения и доля эмбрионов морфологически высокого качества на 3-й день.

Уровни эстрадиола, ЛГ, прогестерона, андрогенов и ХГЧ в сыворотке на 3-й день цикла и в день ХГЧ.