Atorvastatiinin pleiotrooppiset vaikutukset korkean sydän- ja verisuoniriskin potilailla

Rekrytoimme yhteensä 72 korkean sydän- ja verisuoniriskin potilasta, kuten potilaita, joilla on iskeeminen kardiomyopatia (iskeeminen sydämen vajaatoiminta), sepelvaltimotauti ja/tai potilaat, joille tehdään elektiivinen sepelvaltimon ohitusleikkaus (CABG), venttiilin korvaus tai aorttaleikkaus. Koko tutkimus jaetaan kahteen erilliseen kliiniseen haaraan:

ARM A

Tähän ryhmään otetaan potilaita, joilla on iskeeminen sydämen vajaatoiminta (NYHA II-III). Kaksoissokkoutetussa risteytyssuunnitelmassa sydämen vajaatoimintapotilaat (n=30), jotka eivät ole aiemmin saaneet statiinihoitoa, satunnaistetaan saamaan atorvastatiinia 10 mg/vrk (n=15) tai 40 mg/vrk (n=15) 4 viikon ajan. Neljän viikon lopussa seuraa 2 viikon pesujakso, jonka jälkeen kaikki potilaat vaihtavat atorvastatiiniannosta (esim. kaikki potilaat, jotka saivat atorvastatiinia 10 mg/vrk, vaihdetaan annokseen 40 mg/vrk ja päinvastoin).

Potilaille tehdään sekä lähtötilanteessa että 4 viikon jakson lopussa

• verinäytteenotto
• endoteeliriippuvaisen ja -riippumattoman verisuonten laajenemisen arviointi ja
• verisuonten elastisten ominaisuuksien tutkimus (katso alla menetelmiä).

ARM B

Tähän haaraan rekrytoidaan potilaat, joille tehdään sydänleikkaus (CABG, läppäleikkaus tai aorttaleikkaus), jotka eivät ole statiinihoidossa (n=42). Potilaat satunnaistetaan kaksoissokkomenetelmällä saamaan atorvastatiinia 40 mg/vrk tai lumelääkettä 3 päivää ennen leikkausta.

Potilaille tehdään sekä lähtötilanteessa että leikkauspäivänä

• verinäytteitä ja
• endoteeliriippuvaisen ja -riippumattoman verisuonten laajenemisen arviointi (katso alla menetelmiä).
• leikkauksen aikana otetaan kudosnäytteitä (siirteet, sydänlihas ja rasvakudossegmentit), joita käytetään ex vivo -tutkimuksiin (katso alla).

Suostumuslomake

Jokainen kliiniseen tutkimukseen osallistuva potilas antaa kirjallisen suostumuslomakkeen ja tiedottaa hänelle yksityiskohtaisesti tutkimuksen tavoitteista. Rekrytointiprosessin aikana kaikki osallistujat täyttävät kyselylomakkeen demografisilla ja kliinisillä tiedoilla. Kaikki osallistujien antamat tiedot pidetään erittäin luottamuksellisina. Kaikki osallistujat antavat kirjallisen suostumuksen ohjelmoituihin biokemiallisiin mittauksiin ja verisuonitutkimuksiin tutkimussuunnitelman mukaisesti. Erityisesti potilaille, joille tehdään sydänleikkaus (käsivarsi B), täytetään ylimääräinen suostumuslomake, joka sallii siirteiden, sydänlihaksen ja rasvakudossegmenttien keräämisen sydänleikkauksen aikana.

menetelmät

Endoteeliriippuvainen ja riippumaton verisuonten laajeneminen: Brachial Artery Flow-Mediated Dilatation (FMD) olkavartalon valtimosta mitataan NO-välitteisen verisuonen endoteelin toiminnan kvantitatiivisena lukemana, kuten olemme tehneet useissa aiemmissa tutkimuksissa ja kansainvälisten ohjeiden mukaisesti Endoteeliriippuvaiset (hypereeminen virtaus mansetin tukkeutumisen jälkeen) ja endoteelistä riippumattomat (GTN) vasteet olkavarresta mitataan käyttämällä korkearesoluutioista ultraäänikuvausta ja automaattisia suonen halkaisijamittauksia (Vascular Analyser, MIA Inc. Iowa). FMD- ja GTN-indusoitu laajentuminen mitataan absoluuttisina ja suhteellisina muutoksina valtimon halkaisijassa. Laboratoriomme uusittavuustiedot osoittavat, että tutkimusten välisten mittausten variaatiokerroin on <10 %, joka on verrattavissa muihin raportteihin.

Valtimojäykkyys: Keskusvaltimon jäykkyyden mittaukset ovat riippumattomia kardiovaskulaaristen tulosten ennustajia suurissa prospektiivisissä tutkimuksissa ja korreloivat käänteisesti endoteelin toiminnan mittauksiin. Valtimotonometria on yksinkertainen, toistettava menetelmä valtimoiden jäykkyyden mittaamiseen ei-invasiivisesti. Olemme jo määrittäneet keskusaortan jäykkyyden mittauksia - augmentaatioindeksi ja aortan pulssiaallon nopeus - käyttämällä Sphygmocor-järjestelmää applanaatiotonometriaan (AtCor Medical, Australia). Säteittäisen pulssin aaltomuodon matemaattista muunnosa käytetään augmentaatioindeksin johtamiseen. Ero ajassa, jolloin pulssiaaltomuoto saavuttaa kaulavaltimon verrattuna reisivaltimoon, mittaa pulssiaallon nopeutta alas aortassa, jolloin nopeampi läpikulku liittyy "jäykemmään" aortaan .

Systeeminen oksidatiivinen stressi: Tutkimme statiinien vaikutuksia systeemiseen oksidatiiviseen stressiin käyttämällä systeemistä oksidatiivista stressiä, kuten lipidiperoksideja. Yksityiskohtaisemmin lipidiperoksidit määritetään potilaiden plasmassa malondialdehydimäärityksellä (ΜDA-TBARS).

Verisuonten oksidatiivinen stressi: CABG:n aikana saatu ROS:n muodostuminen verisuonisegmenteissä määritetään lusigeniinillä tehostetulla kemiluminesenssilla. Samat mittaukset suoritetaan myös sydänlihassegmenteissä, jotka on saatu CABG:n aikana oikean eteisen viillon kohdasta, johon asetetaan kehonulkoinen verenkiertokanyyli. Tavoitteenamme on määrittää statiinien vaikutukset verisuonten ja sydänlihaksen ROS-kehitykseen.

Rasvakudosviljelmät: Sydänleikkauksen aikana kerätään rasvakudosnäytteitä. Tarkemmin sanottuna ihonalaista rasvakudosta kerätään rintalastan viiltokohdasta; perikardiaalinen rasvakudos kerätään oikean kammion läheltä; ja reisiluun rasvakudos kerätään alueelta, jolta olkapäälaskimot kerätään (jos saatavilla). Leikkauksen aikana saatuja rasvakudosnäytteitä viljellään ex vivo käyttäen standardia rasvakudosprotokollaa.

Biokemialliset ja tulehdusmerkkiaineet: Yleisten laboratoriotestien (kokoverenkuva, AST, ALT, γGT, ALP, urea, kreatiniini, glukoosi, kokonaiskolesteroli, triglyseridit, LDL, HDL, Na+, K+, Ca2+, CRP) lisäksi määrittää lisää proinflammatorisia ja protromboottisia biomarkkereita potilaiden plasmassa. Tarkemmin sanottuna entsyymi-immunosorbenttimäärityksen (ELISA) avulla määritämme interleukiini-6:n ja muiden adipokiinien määrät sekä potilaiden plasman että rasvakudosviljelmien supernatanteissa. Käyttämällä korkean tarkkuuden nestekromatografiaa (HPLC) määritämme biopteriinin plasma- ja verisuonipitoisuudet (tetrahydrobiopteriini, dihydrobiopteriini ja kokonaisbiopteriinit). Tutkimukset ovat osoittaneet, että edellä mainituilla markkereilla voi olla prognostista arvoa korkean kardiovaskulaarisen riskin potilailla.

Tilastollinen analyysi: Tulosten tilastollinen analyysi tehdään erikseen tutkitun kliinisen ryhmän mukaan. Siksi iskeemisen sydämen vajaatoiminnan potilasryhmälle (käsi A) ja sydänleikkaukselle saaville potilaille (käsi B) tehdään erillinen tilastoanalyysi. Erityisesti B-haarassa vertaamme reaktiivisten happilajien muodostumista verisuonen seinämästä ja sydänlihaksesta potilailla, jotka on satunnaistettu saamaan lumelääkettä tai atorvastatiinia 40 mg/vrk.