Effetti pleiotropici dell'atorvastatina nei pazienti ad alto rischio cardiovascolare

In totale recluteremo 72 pazienti ad alto rischio cardiovascolare come pazienti con cardiomiopatia ischemica (insufficienza cardiaca ischemica), malattia coronarica e/o pazienti sottoposti a bypass coronarico elettivo (CABG), sostituzione valvolare o chirurgia aortica. L'intero studio sarà suddiviso in 2 bracci clinici distinti:

BRACCIO A

In questo braccio verranno reclutati pazienti con scompenso cardiaco ischemico (NYHA II-III). In un disegno crossover in doppio cieco, i pazienti con insufficienza cardiaca (n=30) naïve al trattamento con statine saranno randomizzati a ricevere atorvastatina 10 mg/die (n=15) o 40 mg/die (n=15) per 4 settimane. Al termine delle 4 settimane seguirà un periodo di wash-out di 2 settimane e quindi tutti i pazienti passeranno alla dose di atorvastatina (ad es. tutti i pazienti che erano in trattamento con atorvastatina 10 mg/die passeranno a 40 mg/die e viceversa).

Sia al basale che alla fine del periodo di 4 settimane i pazienti saranno sottoposti

• prelievo di sangue
• valutazione della vasodilatazione endotelio-dipendente e -indipendente e
• studio delle proprietà elastiche vascolari (vedi sotto per i metodi).

BRACCIO B

In questo braccio verranno reclutati pazienti sottoposti a cardiochirurgia (CABG, sostituzione valvolare o chirurgia aortica) che non sono in trattamento con statine (n=42). I pazienti saranno randomizzati in doppio cieco a atorvastatina 40 mg / die o placebo per 3 giorni prima dell'intervento chirurgico.

Sia al basale che il giorno dell'intervento i pazienti saranno sottoposti

• prelievo di sangue e
• valutazione della vasodilatazione endotelio-dipendente e -indipendente (vedi sotto per i metodi) mentre
• durante l'intervento chirurgico verranno prelevati campioni di tessuto (innesti, miocardio e segmenti di tessuto adiposo) che verranno utilizzati per studi ex-vivo (vedi sotto).

Modulo di consenso

Ogni paziente che partecipa allo studio clinico fornirà un modulo di consenso scritto e sarà informato in dettaglio per gli scopi dello studio dai ricercatori. Durante il processo di reclutamento tutti i partecipanti compileranno un questionario con dati demografici e clinici. Tutte le informazioni fornite dai partecipanti saranno tenute altamente riservate. Tutti i partecipanti daranno il consenso scritto per le misurazioni biochimiche programmate e gli studi vascolari, come indicato nel disegno dello studio. In particolare per i pazienti sottoposti a cardiochirurgia (braccio B) verrà compilato un ulteriore modulo di consenso che consentirà il prelievo di innesti, miocardio e segmenti di tessuto adiposo durante la cardiochirurgia.

Metodi

Vasodilatazione endoteliale-dipendente e indipendente: la dilatazione mediata dal flusso dell'arteria brachiale (FMD) dell'arteria brachiale sarà misurata come lettura quantitativa della funzione endoteliale del vaso condotto NO-mediata, come abbiamo fatto in diversi studi precedenti e in accordo con le linee guida internazionali .Le risposte dipendenti dall'endotelio (flusso iperemico dopo l'occlusione della cuffia) e dall'endotelio indipendente (GTN) dell'arteria brachiale saranno misurate mediante imaging ad ultrasuoni ad alta risoluzione con misurazioni automatiche del diametro del vaso (Vascular Analyser, MIA Inc. Iowa). La dilatazione indotta da FMD e GTN sarà misurata come variazione assoluta e proporzionale del diametro arterioso. I dati di riproducibilità del nostro laboratorio mostrano un coefficiente di variazione per misurazioni inter-studio di <10% paragonabile ad altri rapporti.

Rigidità arteriosa: le misure della rigidità arteriosa centrale sono predittori indipendenti di esiti cardiovascolari in ampi studi prospettici ed è inversamente correlata con le misure della funzione endoteliale. La tonometria arteriosa è un metodo semplice e riproducibile per misurare, in modo non invasivo, la rigidità arteriosa. Abbiamo già stabilito misure della rigidità dell'aorta centrale - indice di aumento e velocità dell'onda del polso aortico - utilizzando il sistema Sphygmocor per la tonometria ad applanazione (AtCor Medical, Australia). La trasformazione matematica della forma d'onda del polso radiale viene utilizzata per derivare l'indice di aumento. La differenza di tempo per la forma d'onda del polso per raggiungere la carotide rispetto all'arteria femorale misura la velocità dell'onda del polso lungo l'aorta, con un transito più veloce associato a un'aorta "più rigida" .

Stress ossidativo sistemico: studieremo gli effetti delle statine sullo stress ossidativo sistemico utilizzando un marcatore di stress ossidativo sistemico come i perossidi lipidici. Più in dettaglio i perossidi lipidici saranno quantificati nel plasma dei pazienti utilizzando il dosaggio della malondialdeide (ΜDA-TBARS).

Stress ossidativo vascolare: la generazione di ROS nei segmenti vascolari ottenuti durante il CABG sarà determinata mediante chemiluminescenza potenziata dalla lucigenina. Le stesse misurazioni saranno eseguite anche nei segmenti miocardici ottenuti durante il CABG dal sito di incisione dell'atrio destro, dove è inserita la cannula per la circolazione extracorporea. Il nostro obiettivo è determinare gli effetti delle statine sulla generazione di ROS vascolari e miocardici.

Colture di tessuto adiposo: Durante la cardiochirurgia verranno raccolti campioni di tessuto adiposo. Più in dettaglio sarà prelevato tessuto adiposo sottocutaneo dal sito di incisione dello sterno; il tessuto adiposo pericardico sarà raccolto dal sito vicino al ventricolo destro; e il tessuto adiposo femorale sarà prelevato dall'area di raccolta della vena safena (se disponibile). I campioni di tessuto adiposo ottenuti durante l'intervento chirurgico saranno coltivati ​​ex-vivo utilizzando un protocollo di tessuto adiposo standard.

Marcatori biochimici e infiammatori: Oltre ai comuni test di screening di laboratorio (conta ematica intera, AST, ALT, γGT, ALP, urea, creatinina, glucosio, colesterolo totale, trigliceridi, LDL, HDL, Na+, K+, Ca2+, CRP), noi determinerà ulteriori biomarcatori proinfiammatori e protrombotici nel plasma dei pazienti. Più specificamente, utilizzando il test ELISA (Enzyme Linked Immunosorbent Assay) quantificheremo l'interleuchina-6 e altre adipochine sia nel plasma dei pazienti che nei supernatanti delle colture di tessuto adiposo. Mediante cromatografia liquida ad alta precisione (HPLC) quantificheremo i livelli plasmatici e vascolari di biopterina (tetraidrobiopterina, diidrobiopterina e biopterine totali). Studi hanno dimostrato che i suddetti marcatori possono avere un valore prognostico in pazienti ad alto rischio cardiovascolare.

Analisi statistica: l'analisi statistica dei risultati sarà effettuata separatamente in base al gruppo clinico studiato. Pertanto ci sarà un'analisi statistica separata per il gruppo di pazienti con scompenso cardiaco ischemico (braccio A) e per i pazienti sottoposti a cardiochirurgia (braccio B). Soprattutto per il braccio B confronteremo la generazione di specie reattive dell'ossigeno dalla parete vascolare e dal miocardio tra pazienti randomizzati a placebo o atorvastatina 40 mg/die.