Plejotropowe działanie atorwastatyny u pacjentów z wysokim ryzykiem sercowo-naczyniowym

W sumie zrekrutujemy 72 pacjentów wysokiego ryzyka sercowo-naczyniowego, takich jak pacjenci z kardiomiopatią niedokrwienną (niewydolność niedokrwienną serca), chorobą wieńcową i/lub pacjenci poddawani planowemu wszczepieniu pomostów wieńcowych (CABG), wymianie zastawki lub operacji aorty. Całe badanie zostanie podzielone na 2 odrębne ramiona kliniczne:

RAMIĘ A

Do tego ramienia będą rekrutowani pacjenci z niedokrwienną niewydolnością serca (NYHA II-III). W podwójnie ślepej próbie krzyżowej pacjenci z niewydolnością serca (n=30) nieleczeni wcześniej statynami zostaną losowo przydzieleni do grup otrzymujących atorwastatynę w dawce 10 mg/dobę (n=15) lub 40 mg/dobę (n=15) przez 4 tygodnie. Pod koniec 4 tygodni nastąpi 2-tygodniowy okres wypłukiwania, po czym wszyscy pacjenci zmienią dawkę atorwastatyny (np. wszyscy pacjenci, którzy otrzymywali atorwastatynę w dawce 10 mg/dobę zostaną zmienieni na 40 mg/dobę i odwrotnie).

Pacjenci będą poddani zarówno na początku, jak i pod koniec 4-tygodniowego okresu

• pobieranie próbek krwi
• ocena wazodylatacji zależnej i niezależnej od śródbłonka oraz
• badanie właściwości elastycznych naczyń (metody patrz poniżej).

RAMIĘ B

Do tego ramienia zostaną włączeni pacjenci poddawani zabiegom kardiochirurgicznym (CABG, wymiana zastawki lub operacja aorty), którzy nie są leczeni statynami (n=42). Pacjenci zostaną losowo przydzieleni w sposób podwójnie ślepej próby do grupy otrzymującej 40 mg/dobę atorwastatyny lub placebo przez 3 dni przed operacją.

Pacjenci zostaną poddani zarówno na początku badania, jak iw dniu operacji

• pobieranie krwi i
• ocena zależnego i niezależnego od śródbłonka rozszerzenia naczyń (patrz poniżej metody).
• podczas operacji zostaną pobrane próbki tkanek (przeszczepy, segmenty mięśnia sercowego i tkanki tłuszczowej), które zostaną wykorzystane do badań ex vivo (patrz poniżej).

Formularz zgody

Każdy pacjent biorący udział w badaniu klinicznym złoży pisemną zgodę, a także zostanie szczegółowo poinformowany o celach badania przez badaczy. Podczas procesu rekrutacji wszyscy uczestnicy wypełnią ankietę zawierającą dane demograficzne i kliniczne. Wszystkie informacje podane przez uczestników będą ściśle tajne. Wszyscy uczestnicy wyrażą pisemną zgodę na zaprogramowane pomiary biochemiczne i badania naczyniowe, zgodnie z projektem badania. Specjalnie dla pacjentów poddawanych operacji kardiochirurgicznej (ramię B) zostanie wypełniony dodatkowy formularz zgody, który pozwoli na pobranie przeszczepów, mięśnia sercowego i segmentów tkanki tłuszczowej podczas operacji kardiochirurgicznej.

Metody

Zależne od śródbłonka i niezależne rozszerzenie naczyń: rozszerzenie tętnicy ramiennej zależne od przepływu (FMD) tętnicy ramiennej będzie mierzone jako ilościowy odczyt funkcji śródbłonka naczyń przewodowych, w których pośredniczy NO, tak jak to zrobiliśmy w kilku poprzednich badaniach i zgodnie z międzynarodowymi wytycznymi Zależne od śródbłonka (przepływ hiperemiczny po okluzji mankietu) i niezależne od śródbłonka (GTN) odpowiedzi tętnicy ramiennej będą mierzone za pomocą obrazowania ultrasonograficznego o wysokiej rozdzielczości z automatycznymi pomiarami średnicy naczynia (Vascular Analyser, MIA Inc. Iowa). Rozszerzenie wywołane FMD i GTN będzie mierzone jako bezwzględne i proporcjonalne zmiany średnicy tętnicy. Dane dotyczące odtwarzalności z naszego laboratorium wykazują współczynnik zmienności dla pomiarów między badaniami <10% porównywalny z innymi raportami.

Sztywność tętnic: Miary sztywności tętnic centralnych są niezależnymi predyktorami wyników sercowo-naczyniowych w dużych badaniach prospektywnych i są odwrotnie skorelowane z pomiarami funkcji śródbłonka. Tonometria tętnicza jest prostą, powtarzalną metodą pomiaru, nieinwazyjnego, sztywności tętnic. Ustaliliśmy już pomiary sztywności centralnej aorty – wskaźnik augmentacji i prędkość fali tętna aorty – za pomocą systemu Sphygmocor do tonometrii aplanacyjnej (AtCor Medical, Australia). Matematyczna transformacja promieniowego kształtu fali tętna jest wykorzystywana do określenia wskaźnika augmentacji. Różnica w czasie, w jakim kształt fali tętna dociera do tętnicy szyjnej w porównaniu z tętnicą udową, mierzy prędkość fali tętna w dół aorty, z szybszym przejściem związanym z „sztywniejszą” aortą .

Ogólnoustrojowy stres oksydacyjny: Będziemy badać wpływ statyn na ogólnoustrojowy stres oksydacyjny przy użyciu ogólnoustrojowego markera stresu oksydacyjnego, takiego jak nadtlenki lipidów. Bardziej szczegółowo, nadtlenki lipidów będą oznaczane ilościowo w osoczu pacjentów za pomocą testu dialdehydu malonowego (ΜDA-TBARS).

Naczyniowy stres oksydacyjny: Wytwarzanie ROS w segmentach naczyniowych uzyskanych podczas CABG zostanie określone za pomocą chemiluminescencji wzmocnionej lucygeniną. Takie same pomiary zostaną wykonane również w odcinkach mięśnia sercowego uzyskanych podczas CABG z miejsca nacięcia prawego przedsionka, w którym wprowadza się kaniulę do krążenia pozaustrojowego. Naszym celem jest określenie wpływu statyn na wytwarzanie RFT w naczyniach i mięśniu sercowym.

Posiewy tkanki tłuszczowej: Podczas operacji kardiochirurgicznych pobierane będą próbki tkanki tłuszczowej. Bardziej szczegółowo podskórna tkanka tłuszczowa zostanie pobrana z miejsca nacięcia mostka; tkanka tłuszczowa osierdziowa zostanie pobrana z miejsca blisko prawej komory; oraz tkanka tłuszczowa kości udowej zostanie pobrana z obszaru pobrania żyły odpiszczelowej (jeśli jest dostępna). Próbki tkanki tłuszczowej pobrane podczas operacji będą hodowane ex vivo przy użyciu standardowego protokołu tkanki tłuszczowej.

Markery biochemiczne i zapalne: Oprócz typowych laboratoryjnych badań przesiewowych (morfologia krwi, AST, ALT, γGT, ALP, mocznik, kreatynina, glukoza, cholesterol całkowity, trójglicerydy, LDL, HDL, Na+, K+, Ca2+, CRP), określi dodatkowe biomarkery prozapalne i prozakrzepowe w osoczu pacjentów. Dokładniej, za pomocą testu immunoenzymatycznego (ELISA) będziemy oznaczać ilościowo interleukinę-6 i inne adipokiny zarówno w osoczu pacjentów, jak i supernatantach hodowli tkanki tłuszczowej. Za pomocą wysokoprecyzyjnej chromatografii cieczowej (HPLC) będziemy oznaczać ilościowo poziom biopteryny w osoczu i naczyniach (tetrahydrobiopteryna, dihydrobiopteryna i całkowita biopteryna). Badania wykazały, że powyższe markery mogą mieć wartość prognostyczną u pacjentów z wysokim ryzykiem sercowo-naczyniowym.

Analiza statystyczna: Analiza statystyczna wyników zostanie przeprowadzona oddzielnie w zależności od badanej grupy klinicznej. Dlatego osobna analiza statystyczna zostanie przeprowadzona dla grupy pacjentów z niedokrwienną niewydolnością serca (ramię A) oraz dla pacjentów poddawanych zabiegom kardiochirurgicznym (ramię B). Specjalnie dla ramienia B porównamy wytwarzanie reaktywnych form tlenu ze ściany naczynia i mięśnia sercowego pomiędzy pacjentami losowo przydzielonymi do grupy otrzymującej placebo lub atorwastatynę w dawce 40 mg/dobę.