Biomarkkerit transplantaatin vastaanottajissa

Kaikki elinsiirron saajat saavat määräajoin lääkeainetasojen seurantaa ja laboratoriotestejä immunosuppression ja allograftin toiminnan riittävyyden arvioimiseksi. Nämä suoritetaan, kun vastaanottaja joutuu sairaalaan elinsiirron jälkeen tai komplikaatioiden, kuten akuutin hyljintäreaktion tai toksisuuden vuoksi, tai kun vastaanottaja on avohoidossa.

1. Verinäytteet: Osallistujia voidaan pyytää toimittamaan tutkimusverinäytteitä säännöllisten kliinisten testien aikana, ja he voivat kerätä jopa 15 millilitraa verta jopa 7 kertaa ensimmäisen elinsiirron vuoden aikana ja harvemmin sen jälkeen. Kerätyssä kokonaistilavuudessa otetaan huomioon potilaan pituus, paino ja ikä keräyshetkellä. Jos osallistuja ei kuitenkaan jostain syystä pysty antamaan näytettä tavallisen kliinisen testin aikana, se voidaan kerätä muulloinkin. Osallistujia pyydetään toimittamaan nämä näytteet toistaiseksi. Tämä mahdollistaa biomarkkerin ilmentymisen stabiilisuuden pitkittäisen arvioinnin heijastuksena kliinisistä lääkeainepitoisuuksista toistuvissa mittauksissa.
2. Syljenkeräys: Enintään 5 ml koehenkilön sylkeä kerätään enintään neljä kertaa, jos edellinen näyte ei anna riittävää tietoa. Näytteet kerätään itsekeräysastiaan suostumuksen ajankohtana tai mahdollisimman pian luvan saamisen jälkeen, ja niitä säilytetään huoneenlämmössä Pediatric Transplantation Laboratoryssa, 3344 Forbes Ave. Vastaanottajilla, joissa molemmat ovat saatavilla, genotyypitystuloksia syljen DNA:na verrataan parillisten verinäytteiden välillä. Tästä eteenpäin syljenkeräystä tarjotaan vain niille osallistujille, jotka eivät voi luovuttaa verinäytteitä genotyypin määritystä varten. Sylkinäytteenottoa pidetään hyväksyttävänä vaihtoehtoisena standardina kokoveren genotyypitykseen. Sylkinäyte otetaan vain, jos potilas tai potilaan vanhempi tai huoltaja pitää tätä vaihtoehtoa parempana kuin verinäytteenottoa.
3. Virtsan, ulosteiden ja sapen kerääminen: viisi ml kehon nestettä kerätään steriileihin virtsakuppeihin proteomiikan tekniikoiden soveltamista varten. Keräys voidaan toistaa enintään neljä kertaa, jos ensimmäinen näyte antaa epäoptimaalista tietoa.
4. Jäljellä olevien allograft-standardin hoitobiopsianäytteiden ja eksplanttien kudosten kerääminen: Kaikille allograft-biopsian palasille, jotka patologi arvioi jäljelle jääneen, suoritetaan geeniryhmätestaus. Tämä tapahtuu, kun osallistujalle on varattu tavallinen hoitobiopsia tai leikkauksen aikana. Pienimmästä kudoksesta uutettua geneettistä materiaalia voidaan monistaa useilla lähestymistavoilla.
5. Mittaukset: Biomarkkerin ilmentyminen arvioidaan perifeerisen veren mononukleaarisolujen mitogeeni- ja antigeenistimulaation jälkeen. (1-3). Lyhyesti sanottuna perifeerisen veren mononukleaarisolut (PBMC) uutetaan kokoverestä Ficoll-gradienttierottelulla. Tämän jälkeen joko mitogeenejä, kuten fytohemaglutiniinia, pokeweed-mitogeeniä tai forboli-myristihappo-ionomysiiniä tai virus- ja päähistoyhteensopivuuskompleksin (MHC) peptidiantigeenejä. tai ehjiä alloantigeenisiä soluja käytetään stimuloimaan vastaanottajan PBMC:tä. Soluvasteet, joita voidaan mitata, sisältävät, mutta eivät rajoitu, ilmentyneet tulehdusta edistävät tai anti-inflammatoriset markkerit, sytokiinit, proliferaatio, sytotoksisuus ja apoptoosi.