Biomarkører i transplantasjonsmottakere

Alle transplanterte mottakere mottar periodisk overvåking av medikamentnivåer og laboratorietester for å vurdere tilstrekkeligheten av immunsuppresjon og allograftfunksjon. Disse utføres når mottakeren legges inn på sykehus etter transplantasjon eller for en komplikasjon som akutt avstøtning eller toksisitet, eller når mottakeren er poliklinisk.

1. Blodprøver: Deltakerne kan bli bedt om å gi forskningsblodprøver under vanlige kliniske tester, og kan samle opptil 15 milliliter blod så mange som 7 ganger i løpet av det første året av transplantasjonen, og deretter sjeldnere etterpå. Det totale volumet som samles inn vil ta hensyn til pasientens høyde, vekt og alder på tidspunktet for innsamlingen. Men hvis deltakeren av en eller annen grunn ikke er i stand til å gi en prøve under vanlig klinisk test, kan den hentes på et annet tidspunkt. Deltakerne vil bli bedt om å gi disse prøvene på ubestemt tid. Dette vil tillate longitudinell vurdering av stabiliteten til biomarkøruttrykk som en refleksjon av kliniske legemiddelkonsentrasjoner i gjentatte målinger.
2. Spyttsamling: Inntil 5 ml av forsøkspersonens spytt tas ikke mer enn fire ganger, dersom den forrige prøven ikke gir tilstrekkelig informasjon. Prøver vil bli samlet i selvinnsamlingsbeholder på tidspunktet for samtykke eller så tidlig som mulig etter at samtykke er innhentet, og vil bli lagret ved romtemperatur i Pediatric Transplantation Laboratory, 3344 Forbes Ave. Hos mottakere hvor begge er tilgjengelige, vil genotypingsresultatene som DNA fra spytt sammenlignes mellom sammenkoblede blodprøver. Heretter vil spyttinnsamling kun tilbys deltakere som ikke kan donere blodprøver for genotyping. Spyttprøvetaking anses som en akseptabel alternativ standard for genotyping av fullblod. En spyttprøve vil bare bli samlet inn hvis pasienten eller pasientens forelder eller verge foretrekker dette alternativet fremfor blodprøvetaking.
3. Innsamling av urin, avføring og galle: fem ml av all kroppsvæske samles i sterile urinkopper for bruk av proteomikkteknologier. Samlinger kan gjentas opptil fire ganger, hvis den første prøven gir suboptimal informasjon.
4. Innsamling av gjenværende allograft-standardbehandlingsbiopsiprøver og vev fra eksplantater: Ethvert stykke allograftbiopsi som anses som gjenværende av patologen, vil bli gjenstand for genarray-testing. Dette vil skje når deltakeren er planlagt for sin standardbehandlingsbiopsi, eller under operasjon. Genetisk materiale ekstrahert fra det minste vevet kan forsterkes ved hjelp av flere tilnærminger.
5. Målinger: Biomarkøruttrykk vil bli evaluert etter mitogen- og antigenstimulering av mononukleære celler i perifert blod. (1-3). Kort fortalt ekstraheres perifere blodmononukleære celler (PBMC) fra fullblod ved Ficoll-gradientseparasjon, deretter, enten mitogener som fytohemaglutinin, pokeweed-mitogen eller forbol-myristinsyre-ionomycin, eller virale og store histokompatibilitetskompleks (MHC) peptidantigener, eller intakte alloantigene celler vil bli brukt for å stimulere mottaker-PBMC. Cellulære responser som kan måles inkluderer, men er ikke begrenset til, uttrykte pro-inflammatoriske eller anti-inflammatoriske markører, cytokiner, proliferasjon, cytotoksisitet og apoptose.