Biomarkörer hos transplantationsmottagare

Alla transplantationsmottagare får periodisk övervakning av läkemedelsnivåer och laboratorietester för att bedöma tillräckligheten av immunsuppression och allotransplantatfunktion. Dessa utförs när mottagaren läggs in på sjukhuset efter transplantation eller för en komplikation som akut avstötning eller toxicitet, eller när mottagaren är öppenvårdspatient.

1. Blodprover: Deltagarna kan bli ombedda att ge forskningsblodprover under regelbundna kliniska tester och kan samla upp till 15 milliliter blod så många som 7 gånger under det första året av transplantationen, och sedan mindre ofta därefter. Den totala volymen som samlas in kommer att ta hänsyn till patientens längd, vikt och ålder vid tidpunkten för insamlingen. Men om deltagaren av någon anledning inte kan ge ett prov under det vanliga kliniska testet kan det hämtas vid ett annat tillfälle. Deltagarna kommer att uppmanas att tillhandahålla dessa prover på obestämd tid. Detta kommer att möjliggöra longitudinell bedömning av stabiliteten av biomarköruttryck som en återspegling av kliniska läkemedelskoncentrationer i upprepade mätningar.
2. Salivinsamling: Upp till 5 ml av försökspersonens saliv kommer att samlas in högst fyra gånger, om det tidigare provet inte ger adekvat information. Prover kommer att samlas in i självinsamlingsbehållare vid tidpunkten för samtycke eller så tidigt som möjligt efter att samtycke har erhållits, och kommer att förvaras i rumstemperatur i Pediatric Transplantation Laboratory, 3344 Forbes Ave. Hos mottagare där båda är tillgängliga kommer genotypningsresultaten som DNA från saliv att jämföras mellan parade blodprover. Framöver kommer salivinsamling endast att erbjudas deltagare som inte kan donera blodprover för genotypning. Salivprovtagning anses vara en acceptabel alternativ standard för genotypning av helblod. Ett salivprov tas endast om patienten eller patientens förälder eller vårdnadshavare föredrar detta alternativ framför blodprov.
3. Uppsamling av urin, avföring och galla: fem ml av vilken kroppsvätska som helst kommer att samlas upp i sterila urinbägare för tillämpning av proteomikteknik. Samlingar kan upprepas upp till fyra gånger om det första provet ger suboptimal information.
4. Insamling av återstående allotransplantatbiopsiprover av standardvård och vävnad från explantat: Varje del av allotransplantatbiopsi som bedöms vara kvar av patologen kommer att utsättas för genarraytestning. Detta inträffar när deltagaren är schemalagd för sin standardvårdsbiopsi eller under operation. Genetiskt material extraherat från den minsta vävnaden kan amplifieras med hjälp av flera metoder.
5. Mätningar: Biomarköruttryck kommer att utvärderas efter mitogen- och antigenstimulering av perifera mononukleära blodceller. (1-3). Kortfattat, perifera mononukleära blodceller (PBMC) extraheras från helblod genom Ficoll-gradientseparation. Därefter, antingen mitogener såsom fytohemaglutinin, pokeweed-mitogen eller forbol-myristinsyra-ionomycin, eller virala och stora histokompatibilitetskomplex (MHC) peptidantigener, eller intakta alloantigena celler kommer att användas för att stimulera mottagar-PBMC. Cellulära svar som kan mätas inkluderar men är inte begränsade till uttryckta pro-inflammatoriska eller antiinflammatoriska markörer, cytokiner, proliferation, cytotoxicitet och apoptos.