Biomarkører i transplantationsmodtagere

Alle transplanterede modtagere modtager periodisk overvågning af lægemiddelniveauer og laboratorietests for at vurdere tilstrækkeligheden af ​​immunsuppression og allotransplantatfunktion. Disse udføres, når modtageren er indlagt på hospitalet efter transplantation eller for en komplikation såsom akut afstødning eller toksicitet, eller når modtageren er ambulant.

1. Blodprøver: Deltagerne kan blive bedt om at give forskningsblodprøver under regelmæssige kliniske tests og kan indsamle op til 15 milliliter blod så mange som 7 gange inden for det første år af transplantationen, og derefter sjældnere derefter. Det samlede opsamlede volumen vil tage hensyn til patientens højde, vægt og alder på tidspunktet for indsamlingen. Men hvis deltageren af ​​en eller anden grund ikke er i stand til at levere en prøve under almindelig klinisk test, kan den blive indsamlet på et andet tidspunkt. Deltagerne vil blive bedt om at give disse prøver på ubestemt tid. Dette vil tillade en longitudinel vurdering af stabiliteten af ​​biomarkørekspression som en afspejling af kliniske lægemiddelkoncentrationer i gentagne målinger.
2. Spytopsamling: Op til 5 ml af forsøgspersonens spyt vil ikke blive opsamlet mere end fire gange, hvis den tidligere prøve ikke giver tilstrækkelig information. Prøver vil blive indsamlet i selvindsamlingsbeholder på tidspunktet for samtykke eller så tidligt som muligt efter opnåelse af samtykke, og vil blive opbevaret ved stuetemperatur i Pediatric Transplantation Laboratory, 3344 Forbes Ave. Hos modtagere, hvor begge er tilgængelige, vil genotyperesultaterne som DNA fra spyt blive sammenlignet mellem parrede blodprøver. Fremover vil spytindsamling kun blive tilbudt deltagere, der ikke kan donere blodprøver til genotypebestemmelse. Spytprøvetagning anses for at være en acceptabel alternativ standard for fuldblodsgenotypebestemmelse. En spytprøve vil kun blive indsamlet, hvis patienten eller patientens forælder eller værge foretrækker denne mulighed frem for blodprøvetagning.
3. Opsamling af urin, afføring og galde: Fem ml af enhver kropsvæske vil blive opsamlet i sterile urinbægre til anvendelse af proteomikteknologier. Indsamlinger kan gentages op til fire gange, hvis den første prøve giver suboptimal information.
4. Indsamling af resterende allograft-standardbehandlingsbiopsiprøver og væv fra eksplantater: Ethvert stykke allotransplantatbiopsi, som patologen vurderer at være tilbageværende, vil blive udsat for genarray-test. Dette vil ske, når deltageren er planlagt til deres standardbehandlingsbiopsi, eller under operation. Genetisk materiale ekstraheret fra det mindste væv kan amplificeres ved hjælp af flere tilgange.
5. Målinger: Biomarkørekspression vil blive evalueret efter mitogen- og antigenstimulering af mononukleære celler i perifert blod. (1-3). Kort fortalt ekstraheres perifere blodmononukleære celler (PBMC) fra fuldblod ved Ficoll-gradientseparation. Derefter kan enten mitogener såsom phytohæmaglutinin, pokeweed-mitogen eller phorbol-myristinsyre-ionomycin eller virale og større histokompatibilitetskompleks (MHC) peptidantigener, eller intakte alloantigene celler vil blive brugt til at stimulere recipient PBMC. Cellulære responser, der kan måles, omfatter, men er ikke begrænset til, udtrykte pro-inflammatoriske eller anti-inflammatoriske markører, cytokiner, proliferation, cytotoksicitet og apoptose.