Biomarkers bij ontvangers van transplantaties

Alle ontvangers van een transplantaat worden periodiek gecontroleerd op de medicijnspiegels en laboratoriumtests om de toereikendheid van de immunosuppressie en de functie van het transplantaat te beoordelen. Deze worden uitgevoerd wanneer de ontvanger in het ziekenhuis wordt opgenomen na transplantatie of voor een complicatie zoals acute afstoting of toxiciteit, of wanneer de ontvanger een poliklinische patiënt is.

1. Bloedmonsters: deelnemers kunnen worden gevraagd om bloedmonsters voor onderzoek te verstrekken tijdens reguliere klinische tests, en ze kunnen tot 7 keer tot 15 milliliter bloed afnemen in het eerste jaar van de transplantatie, en daarna minder vaak. Het totale verzamelde volume houdt rekening met de lengte, het gewicht en de leeftijd van de patiënt op het moment van de verzameling. Als de deelnemer echter om welke reden dan ook niet in staat is om een ​​monster te verstrekken tijdens de reguliere klinische test, kan het op een ander moment worden afgenomen. Deelnemers wordt gevraagd om deze monsters voor onbepaalde tijd te verstrekken. Dit zal longitudinale beoordeling mogelijk maken van de stabiliteit van biomarkerexpressie als een weerspiegeling van klinische geneesmiddelconcentraties in herhaalde metingen.
2. Speekselverzameling: Maximaal 5 ml van het speeksel van de proefpersoon wordt maximaal vier keer verzameld, als het vorige monster geen adequate informatie geeft. Op het moment van toestemming of zo snel mogelijk nadat de toestemming is verkregen, worden monsters verzameld in een container voor zelfafname en worden ze bij kamertemperatuur bewaard in het Pediatric Transplantation Laboratory, 3344 Forbes Ave. Bij ontvangers waar beide beschikbaar zijn, zullen de genotyperingsresultaten als DNA uit speeksel worden vergeleken tussen gepaarde bloedmonsters. Speekselafname wordt voortaan alleen aangeboden aan deelnemers die geen bloed kunnen doneren voor genotypering. Speekselafname wordt beschouwd als een aanvaardbare alternatieve standaard voor genotypering van volbloed. Er wordt alleen een speekselmonster afgenomen als de patiënt of de ouder of voogd van de patiënt deze optie verkiest boven bloedafname.
3. Opvang van urine, uitwerpselen en gal: vijf ml van elke lichaamsvloeistof wordt opgevangen in steriele urinebekers voor toepassing van proteomics-technologieën. Verzamelingen kunnen tot vier keer worden herhaald, als het eerste exemplaar suboptimale informatie geeft.
4. Verzameling van resterende allograft-standaardbiopsiespecimens, en weefsel van explantaten: Elk stuk allograft-biopsie dat door de patholoog als residuaal wordt beschouwd, zal worden onderworpen aan genenarray-testen. Dit zal gebeuren wanneer de deelnemer is ingepland voor zijn standaardbiopsie, of tijdens een operatie. Genetisch materiaal dat uit het kleinste weefsel wordt geëxtraheerd, kan op verschillende manieren worden geamplificeerd.
5. Metingen: Biomarker-expressie zal worden geëvalueerd na mitogeen- en antigeenstimulatie van perifere mononucleaire bloedcellen. (1-3). In het kort worden perifere mononucleaire bloedcellen (PBMC) uit volbloed geëxtraheerd door middel van Ficoll-gradiëntscheiding. Daarna worden ofwel mitogenen zoals fytohemaglutinine, pokeweed-mitogen of forbol-myristinezuur-ionomycine, of virale en major histocompatibiliteitscomplex (MHC) peptide-antigenen, of intacte allo-antigene cellen zullen worden gebruikt om ontvangende PBMC te stimuleren. Cellulaire responsen die kunnen worden gemeten omvatten, maar zijn niet beperkt tot, tot expressie gebrachte pro-inflammatoire of anti-inflammatoire markers, cytokinen, proliferatie, cytotoxiciteit en apoptose.