Muunnetut kasvaimeen tunkeutuvat lymfosyytit metastaattista melanoomaa varten

Tausta:

• Kasvaimeen infiltroivan lymfosyytin (TIL) antaminen ja suuriannoksinen interleukiini (IL)-2 lymfodepletion jälkeen voivat välittää kestäviä täydellisiä vasteita potilailla, joilla on refraktaarinen melanooma. Tämän hoidon antamisen esteitä ovat TIL:n määrittäminen in vitro noin 20 %:lla potilaista, pitkät viiveet kasvaimen resektion ja TIL:n muodostamisen välillä, mikä johtaa huonoihin TIL-ominaisuuksiin hoitoon ja potilaan kelpaamattomuuteen etenemisen vuoksi sekä vaatimukset suurelle syöttäjäsolumäärälle. TIL:n laajentamiseksi terapeuttisiin lukuihin.
• K562-solulinja suunniteltiin ekspressoimaan 4-1BBL:n kostimulatorista molekyyliä ja CD64:ää (korkean affiniteetin Fc-reseptori, joka ladataan vasta-aineilla, kuten OKT3). K562.CD64.4-1BBL Engineered Cells with Costimulation Enhancement (ECCE) korvasi jopa 75 % syöttösoluista suurissa TIL-laajennuksissa. Kasvainsolususpensioihin lisätty ECCE sai aikaan kostimulaation transissa, mikä johti nopeaan ja luotettavaan lymfosyyttien kasvuun jopa kasvaimista, joissa ei ollut TIL-kasvua standardiolosuhteissa.
• Kloonattu K562.CD64.4-1BBL-7F11 ECCE-linja on tuotettu hyvän valmistustavan (GMP) olosuhteissa ja pääsolupankki on luotu. Optimoitu protokolla luotiin nuoren TIL:n nopeaan laajentamiseen (REP) käyttämällä minimisyöttölaitteita ja 7F11:tä. Nämä ECCE REPed TIL säilyttivät kasvaimen tunnistuksen ja joitain muita standardin TIL:n ominaisuuksia, mutta erosivat standardista TIL:stä sisältämällä vähemmän CD4+-soluja ja enemmän luonnollisia tappajasoluja.

Kun 7F11ECCE:tä lisättiin suoraan yksisoluisiin kasvainsuspensioihin, nuoret TIL-viljelmät tuotettiin luotettavasti jopa potilaista, joilla ei muuten olisi tavanomaista nuorta TIL-viljelmää hoitoa varten.

Tavoitteet:

Ensisijaiset tavoitteet:

• Kohortissa 1, sen arvioimiseksi, johtavatko nuoret TIL:t, joita kasvatetaan nopeasti käyttämällä 7F11 ECCE:tä korvaamaan joitain syöttäjäsoluja ja jotka annetaan IL-2:lla potilaille, jotka noudattavat ei-myeloablatiivista hoito-ohjelmaa, kliiniseen kasvaimen regressioon potilailla, joilla on refraktorinen metastaattinen melanooma.
• Kohortissa 2 sen arvioimiseksi, voiko nuori TIL, joka on syntynyt käyttämällä in trans-kostimulaatiota 7F11 ECCE:n kanssa potilailla, joille tavallinen nuori TIL ei kasvanut, välittää kasvaimen regressiota ei-myeloablatiivisen hoidon jälkeen suurella annoksella IL-2:ta potilailla, joilla on refraktorinen metastaattinen melanooma.
• Määritä ECCE-nuoren TIL:n toksisuus näissä hoito-ohjelmissa

Kelpoisuus:

18 vuotta täyttäneillä potilailla tulee olla:

• metastaattinen melanooma;
• Eastern Cooperative Oncology Groupin (ECOG) suorituskykytila ​​0 tai 1
• Yksi tai useampi 2 cm tai suurempi leesio, joka sopii resektioon TIL-viljelyä varten

Potilailla ei välttämättä ole:

• Samanaikaiset vakavat lääketieteelliset sairaudet;
• Mikä tahansa immuunipuutos;
• Vaikea yliherkkyys jollekin tässä tutkimuksessa käytetylle aineelle;
• Vasta-aiheet suurten IL-2-annosten antamiselle.

Design:

• Potilaille tehdään resektio kasvaimen saamiseksi autologisten nuorten TIL-viljelmien muodostamiseksi.
• Rinnakkaiset TIL-viljelmät muodostetaan käyttämällä a) standarditekniikkaa vain IL-2:lla ja b) Engineered Cells with Costimulation Enhancement (ECCE) -protokollaa käyttämällä säteilytettyä K562.CD64.4-1BBL-7F11 (7F11) solut.
• 10-20 päivän kuluttua viljelmille suoritetaan TIL:n muodostumisen arviointi. Normaalia TIL:ää käytetään ensisijaisesti ja potilaat, joilla on standardimenetelmillä määritetty TIL, luokitellaan kohorttiin 1

• Kohortti 1:

  • TIL käy läpi ECCE REP:n altistamalla OKT-3:lle, IL-2:lle, syöttösoluille ja säteilytetylle 7F11:lle.
  • Potilaat saavat ei-myeloablatiivista lymfosyyttejä tuhoavaa preparatiivista hoito-ohjelmaa: syklofosfamidia (60 mg/kg/vrk suonensisäisesti (IV)) päivinä -7 ja -6 ja fludarabiinia (25 mg/m^2/vrk IV) päivinä -5 -1.
  • Päivänä 0 potilaat saavat autologisen nuoren TIL:n infuusion ja sitten aloittavat suuren annoksen aldesleukiinia (720 000 IU/kg IV 8 tunnin välein enintään 15 annosta).
  • Kliininen ja immunologinen vaste arvioidaan noin 4-6 viikkoa hoidon jälkeen.
  • Optimaalista kaksivaiheista II-vaiheen suunnittelua käyttämällä otetaan aluksi mukaan 18 potilasta, ja jos kolmella tai useammalla ensimmäisestä 18 potilaasta on kliininen vaste (osittainen vaste (PR) tai täydellinen vaste (CR)), kertyminen jatkuu 35:een. 30 %:n tavoite objektiiviselle vasteelle.
• Jos tavallinen nuori TIL ei kasva, ECCE-nuori TIL arvioidaan ja potilaat, joilla on ECCE TIL:tä saatavilla, jaetaan kohorttiin 2.

• Kohortti 2:

  • Kohortin 2 potilaiden viljelmät arvioidaan ECCE TIL:n määrittämiseksi. Jos riittävä ECCE TIL on saatavilla, TIL käy läpi ECCE REP:n altistamalla OKT-3:lle, IL-2:lle, syöttösoluille ja säteilytetylle 7F11:lle.
  • Potilaat saavat ei-myeloablatiivista lymfosyyttejä tuhoavaa preparatiivista hoito-ohjelmaa, jossa on syklofosfamidia (60 mg/kg/vrk IV) päivinä -7 ja -6 ja fludarabiinia (25 mg/m^2/vrk IV) päivinä -5 - -1.
  • Päivänä 0 potilaat saavat autologisen nuoren TIL:n infuusion ja sitten aloittavat suuren annoksen aldesleukiinia (720 000 IU/kg IV 8 tunnin välein enintään 15 annosta).
  • Kliininen ja immunologinen vaste arvioidaan noin 4-6 viikkoa TIL-infuusion jälkeen.
  • Pienellä optimaalisella kaksivaiheisella II vaiheen suunnittelulla otetaan aluksi mukaan 9 potilasta, ja jos yhdellä tai useammalla ensimmäisestä 9 potilaasta on kliininen vaste (PR tai CR), karttumista jatketaan 24 potilaaseen, jolloin tavoite on 25 %. objektiivista vastausta varten.
• Jos TIL-viljelmiä ei ole muodostettu standardimenetelmillä tai ECCE:n nuorilla TIL-protokollalla, potilaat ovat kelvollisia uudelleenresektioon ja TIL:n arviointiin toisesta paikasta.