Linfocitos infiltrantes tumorales modificados para el melanoma metastásico

Fondo:

• La administración de linfocitos infiltrantes de tumores (TIL) y dosis altas de interleucina (IL)-2 después del agotamiento de los linfocitos puede mediar respuestas completas duraderas en pacientes con melanoma refractario. Los obstáculos para la administración de esta terapia incluyen la imposibilidad de establecer TIL in vitro en aproximadamente el 20 % de los pacientes, largas demoras entre la resección del tumor y el establecimiento de TIL que dan como resultado atributos deficientes de TIL para la terapia y la inelegibilidad del paciente debido a la progresión, y los requisitos de un gran número de células alimentadoras para la expansión de TIL a números terapéuticos.
• La línea celular K562 se diseñó para expresar la molécula coestimuladora 4-1BBL y CD64 (el receptor Fc de alta afinidad para la carga con anticuerpos como OKT3). El K562.CD64.4-1BBL Las células diseñadas con mejora de la coestimulación (ECCE) reemplazaron hasta el 75 % de las células alimentadoras en expansiones TIL a gran escala. ECCE agregado a las suspensiones de células tumorales proporcionó coestimulación en trans, lo que resultó en un crecimiento de linfocitos rápido y confiable incluso de tumores sin crecimiento de TIL en condiciones estándar.
• Un K562.CD64.4-1BBL-7F11 clonado La línea ECCE se produjo bajo condiciones de Buenas Prácticas de Manufactura (GMP) y se generó un banco de células maestras. Se estableció un protocolo optimizado para expandir rápidamente (REP) los TIL jóvenes utilizando alimentadores mínimos y 7F11. Estos ECCE REPed TIL conservaron el reconocimiento del tumor y algunos otros atributos del TIL estándar, pero diferían del TIL estándar porque contenían menos células CD4+ y más células asesinas naturales.

Cuando se añadió 7F11ECCE directamente a las suspensiones de tumores de células individuales, se generaron cultivos TIL jóvenes de forma fiable incluso a partir de pacientes que, de otro modo, no tendrían un cultivo TIL joven estándar para el tratamiento.

Objetivos:

Objetivos principales:

• En la cohorte 1, para evaluar si los TIL jóvenes que se expanden rápidamente usando 7F11 ECCE para reemplazar algunas células alimentadoras y se administran con IL-2 en pacientes que siguen un régimen de acondicionamiento no mieloablativo dará como resultado la regresión clínica del tumor en pacientes con melanoma metastásico refractario.
• En la Cohorte 2, para evaluar si los TIL jóvenes generados mediante coestimulación trans con 7F11 ECCE en pacientes en los que los TIL jóvenes estándar no crecieron pueden mediar la regresión tumoral después de un condicionamiento no mieloablativo con dosis altas de IL-2 en pacientes con melanoma metastásico refractario.
• Determinar la toxicidad de ECCE young TIL en estos regímenes de tratamiento

Elegibilidad:

Los pacientes mayores de 18 años deben tener:

• melanoma metastásico;
• Estado funcional del Grupo Oncológico Cooperativo del Este (ECOG) 0 o 1
• Una o más lesiones de 2 cm o más aptas para resección para cultivo TIL

Los pacientes pueden no tener:

• Enfermedades médicas importantes concurrentes;
• Cualquier forma de inmunodeficiencia;
• Hipersensibilidad grave a cualquiera de los agentes utilizados en este estudio;
• Contraindicaciones para la administración de altas dosis de IL-2.

Diseño:

• Los pacientes se someterán a una resección para obtener el tumor para la generación de cultivos autólogos de TIL jóvenes.
• Se establecerán cultivos TIL paralelos usando a) la técnica estándar con IL-2 solamente yb) el protocolo de Células diseñadas con mejora de la coestimulación (ECCE) usando K562.CD64.4-1BBL-7F11 irradiado (7F11) células.
• Después de 10 a 20 días, los cultivos se evaluarán para el establecimiento de TIL. Se utilizará preferentemente la TIL estándar y los pacientes que tengan una TIL establecida mediante métodos estándar se asignarán a la Cohorte 1

• Cohorte 1:

  • TIL se someterá a ECCE REP por exposición a OKT-3, IL-2, células alimentadoras y 7F11 irradiado.
  • Los pacientes recibirán un régimen preparatorio para la depleción de linfocitos no mieloablativo de ciclofosfamida (60 mg/kg/día por vía intravenosa (IV)) los días -7 y -6 y fludarabina (25 mg/m^2/día IV) los días -5 a -1.
  • El día 0, los pacientes recibirán la infusión de TIL joven autólogo y luego comenzarán con una dosis alta de aldesleucina (720 000 UI/kg IV cada 8 horas hasta 15 dosis).
  • La respuesta clínica e inmunológica se evaluará alrededor de 4 a 6 semanas después del tratamiento.
  • Con un diseño óptimo de Fase II en dos etapas, inicialmente se inscribirán 18 pacientes, y si tres o más de los primeros 18 pacientes tienen una respuesta clínica (respuesta parcial (PR) o respuesta completa (RC)), la acumulación continuará hasta 35 pacientes, apuntando a una meta del 30% para una respuesta objetiva.
• Si los TIL jóvenes estándar no crecen, se evaluarán los TIL jóvenes de ECCE y los pacientes que tengan TIL de ECCE disponibles se asignarán a la Cohorte 2.

• Cohorte 2:

  • Se evaluarán los cultivos de los pacientes de la Cohorte 2 para el establecimiento de ECCE TIL. Si se dispone de ECCE TIL adecuado, TIL se someterá a ECCE REP mediante exposición a OKT-3, IL-2, células alimentadoras y 7F11 irradiado.
  • Los pacientes recibirán un régimen preparatorio para la depleción de linfocitos no mieloablativo de ciclofosfamida (60 mg/kg/día IV) los días -7 y -6 y fludarabina (25 mg/m^2/día IV) los días -5 a -1.
  • El día 0, los pacientes recibirán la infusión de TIL joven autólogo y luego comenzarán con una dosis alta de aldesleucina (720 000 UI/kg IV cada 8 horas hasta 15 dosis).
  • La respuesta clínica e inmunológica se evaluará alrededor de 4 a 6 semanas después de la infusión de TIL.
  • Usando un diseño de Fase II pequeño y óptimo de dos etapas, inicialmente se inscribirán 9 pacientes, y si uno o más de los primeros 9 pacientes tiene una respuesta clínica (PR o CR), la acumulación continuará hasta 24 pacientes, con un objetivo del 25 %. para una respuesta objetiva.
• Si los cultivos de TIL no se establecieron mediante métodos estándar o protocolos de TIL joven de ECCE, los pacientes serán elegibles para una nueva resección y evaluación de TIL desde un sitio diferente.