Modifiserte tumorinfiltrerende lymfocytter for metastatisk melanom

Bakgrunn:

• Administrering av tumorinfiltrerende lymfocytter (TIL) og høydose interleukin (IL)-2 etter lymfodeplesjon kan formidle varig fullstendig respons hos pasienter med refraktært melanom. Hindringer for administrering av denne terapien inkluderer unnlatelse av å etablere TIL in vitro for omtrent 20 % av pasientene, lange forsinkelser mellom tumorreseksjon og TIL-etablering som resulterer i dårlige TIL-egenskaper for terapi og pasientens manglende valgbarhet på grunn av progresjon, og krav til et stort antall materceller for TIL-utvidelse til terapeutiske tall.
• K562-cellelinjen ble konstruert for å uttrykke det 4-1BBL-kostimulerende molekylet og CD64 (Fc-reseptoren med høy affinitet for belastning med antistoffer som OKT3). K562.CD64.4-1BBL Konstruerte celler med Costimulering Enhancement (ECCE) erstattet opptil 75 % av matecellene i TIL-utvidelser i stor skala. ECCE tilsatt til tumorcellesuspensjoner ga samstimulering i trans, noe som resulterte i rask og pålitelig lymfocyttvekst selv fra svulster uten TIL-vekst under standardbetingelser.
• En klonet K562.CD64.4-1BBL-7F11 ECCE-linjen ble produsert under Good Manufacturing Practice (GMP)-betingelser og en mastercellebank er generert. En optimalisert protokoll ble etablert for å raskt utvide (REP) unge TIL ved bruk av minimumsmatere og 7F11. Disse ECCE REPed TIL beholdt tumorgjenkjenning og noen andre attributter til standard TIL, men skilte seg fra standard TIL ved å inneholde færre CD4+-celler og flere naturlige dreperceller.

Når 7F11ECCE ble tilsatt direkte til enkeltcellet tumorsuspensjoner, ble unge TIL-kulturer pålitelig generert selv fra pasienter som ellers ikke ville ha en standard ung TIL-kultur for behandling.

Mål:

Primære mål:

• I kohort 1, for å evaluere om unge TIL som raskt utvides ved hjelp av 7F11 ECCE for å erstatte noen mateceller og administrert med IL-2 hos pasienter etter et ikke-myeloablativt kondisjonsregime, vil resultere i klinisk tumorregresjon hos pasienter med refraktært metastatisk melanom.
• I kohort 2, for å evaluere om ung TIL generert ved bruk av transcostimulering med 7F11 ECCE hos pasienter som standard ung TIL ikke vokste kan mediere tumorregresjon etter en ikke-myeloablativ kondisjonering med høy dose IL-2 hos pasienter med refraktært metastatisk melanom.
• Bestem toksisiteten til ECCE ung TIL i disse behandlingsregimene

Kvalifisering:

Pasienter som er 18 år eller eldre må ha:

• metastatisk melanom;
• Eastern Cooperative Oncology Group (ECOG) ytelsesstatus 0 eller 1
• En eller flere lesjoner 2 cm eller større egnet for reseksjon for TIL-kultur

Pasienter har kanskje ikke:

• Samtidig store medisinske sykdommer;
• Enhver form for immunsvikt;
• Alvorlig overfølsomhet overfor noen av midlene brukt i denne studien;
• Kontraindikasjoner for administrering av høy dose IL-2.

Design:

• Pasienter vil gjennomgå reseksjon for å oppnå tumor for generering av autologe unge TIL-kulturer.
• Parallelle TIL-kulturer vil bli etablert ved å bruke a) standardteknikken med kun IL-2 og b) ECCE-protokollen Engineered Cells with Costimulation Enhancement (ECCE) ved bruk av bestrålt K562.CD64.4-1BBL-7F11 (7F11) celler.
• Etter 10 til 20 dager vil kulturer gjennomgå evaluering for TIL-etablering. Standard TIL vil bli brukt fortrinnsvis og pasienter som har TIL etablert etter standardmetoder vil bli tilordnet kohort 1

• Kohort 1:

  • TIL vil gjennomgå ECCE REP ved eksponering for OKT-3, IL-2, mateceller og bestrålt 7F11.
  • Pasienter vil motta et ikke-myeloablativt lymfocytt-depleterende preparativt regime av cyklofosfamid (60 mg/kg/dag intravenøst ​​(IV)) på dag -7 og -6 og fludarabin (25 mg/m^2/dag IV) på dag -5 til og med -1.
  • På dag 0 vil pasienter få infusjon av autolog ung TIL og deretter begynne høydose aldesleukin (720 000 IE/kg IV hver 8. time i opptil 15 doser).
  • Klinisk og immunologisk respons vil bli evaluert ca. 4-6 uker etter behandling.
  • Ved å bruke et optimalt to-trinns fase II-design, vil i utgangspunktet 18 pasienter bli registrert, og hvis tre eller flere av de første 18 pasientene har en klinisk respons (delvis respons (PR) eller fullstendig respons (CR)), vil akkumuleringen fortsette til 35 pasienter, med et mål på 30 % for objektiv respons.
• Hvis standard ung TIL ikke vokser, vil ECCE ung TIL bli evaluert og pasienter som har ECCE TIL tilgjengelig vil bli tildelt kohort 2.

• Kohort 2:

  • Kulturer fra pasienter i kohort 2 vil bli evaluert for etablering av ECCE TIL. Hvis tilstrekkelig ECCE TIL er tilgjengelig, vil TIL gjennomgå ECCE REP ved eksponering for OKT-3, IL-2, materceller og bestrålt 7F11.
  • Pasienter vil motta et ikke-myeloablativt lymfocytt-depleterende preparativt regime med cyklofosfamid (60 mg/kg/dag IV) på dag -7 og -6 og fludarabin (25 mg/m^2/dag IV) på dag -5 til -1.
  • På dag 0 vil pasienter få infusjon av autolog ung TIL og deretter begynne høydose aldesleukin (720 000 IE/kg IV hver 8. time i opptil 15 doser).
  • Klinisk og immunologisk respons vil bli evaluert ca. 4-6 uker etter TIL-infusjon.
  • Ved å bruke et lite optimalt to-trinns fase II-design, vil i utgangspunktet 9 pasienter bli registrert, og hvis en eller flere av de første 9 pasientene har en klinisk respons (PR eller CR), vil opptjeningen fortsette til 24 pasienter, med et mål på 25 %. for objektiv respons.
• Hvis TIL-kulturer ikke ble etablert ved verken standardmetoder eller ECCE young TIL-protokoller, vil pasienter være kvalifisert for reseksjon og evaluering av TIL fra et annet sted.