Gemodificeerde tumor-infiltrerende lymfocyten voor gemetastaseerd melanoom

Achtergrond:

• Toediening van tumor-infiltrerende lymfocyten (TIL) en hoge doses interleukine (IL)-2 na lymfodepletie kunnen duurzame complete reacties mediëren bij patiënten met refractair melanoom. Obstakels bij de toediening van deze therapie zijn onder meer het niet in vitro vaststellen van TIL voor ongeveer 20% van de patiënten, lange vertragingen tussen tumorresectie en het instellen van TIL, resulterend in slechte TIL-attributen voor therapie en het niet in aanmerking komen van de patiënt vanwege progressie, en vereisten voor grote aantallen voedingscellen voor TIL-uitbreiding naar therapeutische nummers.
• De K562-cellijn werd ontwikkeld om het 4-1BBL co-stimulerende molecuul en CD64 (de Fc-receptor met hoge affiniteit voor belading met antilichamen zoals OKT3) tot expressie te brengen. De K562.CD64.4-1BBL Engineered Cells with Costimulation Enhancement (ECCE) verving tot 75% van de voedingscellen in grootschalige TIL-uitbreidingen. ECCE toegevoegd aan tumorcelsuspensies zorgde voor costimulatie in trans, wat resulteerde in een snelle en betrouwbare groei van lymfocyten, zelfs van tumoren zonder TIL-groei onder standaardomstandigheden.
• Een gekloonde K562.CD64.4-1BBL-7F11 De ECCE-lijn is geproduceerd onder Good Manufacturing Practice (GMP)-omstandigheden en er is een hoofdcelbank gegenereerd. Er werd een geoptimaliseerd protocol opgesteld om jonge TIL snel uit te breiden (REP) met behulp van minimale feeders en 7F11. Deze ECCE REPed TIL behielden tumorherkenning en enkele andere kenmerken van standaard TIL, maar verschilden van standaard TIL doordat ze minder CD4+-cellen en meer natural killer-cellen bevatten.

Wanneer 7F11ECCE rechtstreeks aan eencellige tumorsuspensies werd toegevoegd, werden op betrouwbare wijze jonge TIL-kweken gegenereerd, zelfs van patiënten die anders geen standaard jonge TIL-kweek voor behandeling zouden hebben.

Doelstellingen:

Primaire doelen:

• In cohort 1, om te evalueren of jonge TIL die snel worden uitgebreid met behulp van 7F11 ECCE ter vervanging van enkele voedingscellen en die worden toegediend met IL-2 bij patiënten die een niet-myeloablatief conditioneringsregime volgen, zullen resulteren in klinische tumorregressie bij patiënten met refractair gemetastaseerd melanoom.
• In cohort 2, om te evalueren of jonge TIL gegenereerd met behulp van transco-stimulatie met 7F11 ECCE bij patiënten voor wie standaard jonge TIL niet groeide, tumorregressie kan mediëren na een niet-myeloablatieve conditionering met hoge dosis IL-2 bij patiënten met refractair gemetastaseerd melanoom.
• Bepaal de toxiciteit van ECCE young TIL in deze behandelingsregimes

Geschiktheid:

Patiënten van 18 jaar of ouder moeten beschikken over:

• gemetastaseerd melanoom;
• Eastern Cooperative Oncology Group (ECOG) prestatiestatus 0 of 1
• Een of meer laesies van 2 cm of groter geschikt voor resectie voor TIL-kweek

Patiënten hebben mogelijk niet:

• Gelijktijdige ernstige medische ziekten;
• Elke vorm van immunodeficiëntie;
• Ernstige overgevoeligheid voor een van de middelen die in dit onderzoek zijn gebruikt;
• Contra-indicaties voor toediening van hoge doses IL-2.

Ontwerp:

• Patiënten zullen resectie ondergaan om een ​​tumor te verkrijgen voor het genereren van autologe jonge TIL-culturen.
• Parallelle TIL-culturen zullen worden opgezet met behulp van a) de standaardtechniek met alleen IL-2 en b) het Engineered Cells with Costimulation Enhancement (ECCE)-protocol met behulp van bestraalde K562.CD64.4-1BBL-7F11 (7F11) cellen.
• Na 10 tot 20 dagen zullen de culturen worden geëvalueerd voor TIL-vestiging. Standaard TIL zal bij voorkeur worden gebruikt en patiënten bij wie TIL is vastgesteld met standaardmethoden, worden toegewezen aan cohort 1

• Cohort 1:

  • TIL zal ECCE REP ondergaan door blootstelling aan OKT-3, IL-2, voedingscellen en bestraald 7F11.
  • Patiënten zullen een niet-myeloablatief lymfocyten depletie preparatief regime krijgen van cyclofosfamide (60 mg/kg/dag intraveneus (IV)) op dag -7 en -6 en fludarabine (25 mg/m^2/dag IV) op dag -5 tot en met -1.
  • Op dag 0 krijgen de patiënten de infusie van autologe jonge TIL en beginnen ze met een hoge dosis aldesleukin (720.000 IE/kg IV elke 8 uur voor maximaal 15 doses).
  • De klinische en immunologische respons zal ongeveer 4-6 weken na de behandeling worden geëvalueerd.
  • Met een optimaal fase II-ontwerp in twee fasen zullen in eerste instantie 18 patiënten worden ingeschreven, en als drie of meer van de eerste 18 patiënten een klinische respons hebben (partiële respons (PR) of volledige respons (CR)), wordt de opbouw voortgezet tot 35 patiënten, gericht op een doelstelling van 30% voor objectieve respons.
• Als standaard jonge TIL niet groeit, wordt ECCE jonge TIL geëvalueerd en worden patiënten die ECCE TIL beschikbaar hebben toegewezen aan cohort 2.

• Cohort 2:

  • Culturen van patiënten in cohort 2 zullen worden geëvalueerd voor ECCE TIL-vestiging. Als er voldoende ECCE TIL beschikbaar is, zal TIL ECCE REP ondergaan door blootstelling aan OKT-3, IL-2, voedingscellen en bestraald 7F11.
  • Patiënten krijgen een niet-myeloablatief lymfocyten depletie preparatief regime van cyclofosfamide (60 mg/kg/dag IV) op dag -7 en -6 en fludarabine (25 mg/m^2/dag IV) op dag -5 tot -1.
  • Op dag 0 krijgen de patiënten de infusie van autologe jonge TIL en beginnen ze met een hoge dosis aldesleukin (720.000 IE/kg IV elke 8 uur voor maximaal 15 doses).
  • Klinische en immunologische respons zal ongeveer 4-6 weken na TIL-infusie worden geëvalueerd.
  • Met behulp van een kleine, optimale fase II-opzet in twee fasen, zullen in eerste instantie 9 patiënten worden ingeschreven, en als een of meer van de eerste 9 patiënten een klinische respons (PR of CR) hebben, zal de opbouw doorgaan naar 24 patiënten, gericht op een doel van 25% voor een objectieve reactie.
• Als TIL-kweken niet zijn vastgesteld met behulp van standaardmethoden of ECCE jonge TIL-protocollen, komen patiënten in aanmerking voor herresectie en evaluatie van TIL vanaf een andere locatie.