用于转移性黑色素瘤的改良肿瘤浸润淋巴细胞

背景：

• 肿瘤浸润淋巴细胞 (TIL) 给药和淋巴细胞清除后的高剂量白细胞介素 (IL)-2 可以介导难治性黑色素瘤患者的持久完全反应。 实施该疗法的障碍包括：约 20% 的患者未能在体外建立 TIL，肿瘤切除和 TIL 建立之间的长时间延迟导致 TIL 治疗属性差，患者因进展不合格，以及需要大量饲养细胞用于 TIL 扩展到治疗数量。
• K562 细胞系被设计用于表达 4-1BBL 共刺激分子和 CD64（高亲和力 Fc 受体，用于加载 OKT3 等抗体）。 K562.CD64.4-1BBL 在大规模 TIL 扩增中，具有共刺激增强 (ECCE) 的工程细胞取代了多达 75% 的饲养细胞。 添加到肿瘤细胞悬液中的 ECCE 提供反式共刺激，导致淋巴细胞快速可靠地生长，即使在标准条件下没有 TIL 生长的肿瘤也是如此。
• 克隆的 K562.CD64.4-1BBL-7F11 ECCE 系是在良好生产规范 (GMP) 条件下生产的，并已生成主细胞库。 建立了一个优化的协议，以使用最少的馈线和 7F11 快速扩展 (REP) 年轻的 TIL。 这些 ECCE REPed TIL 保留了肿瘤识别和标准 TIL 的一些其他属性，但与标准 TIL 的不同之处在于包含更少的 CD4+ 细胞和更多的自然杀伤细胞。

当将 7F11ECCE 直接添加到单细胞肿瘤悬液中时，年轻的 TIL 培养物甚至可以从没有标准年轻 TIL 培养物进行治疗的患者中可靠地生成。

目标：

主要目标：

• 在队列 1 中，评估使用 7F11 ECCE 快速扩增的年轻 TIL 替代一些饲养细胞并在接受非清髓性预处理方案的患者中给予 IL-2 是否会导致难治性转移性黑色素瘤患者的临床肿瘤消退。
• 在队列 2 中，为了评估使用 7F11 ECCE 反式共刺激产生的年轻 TIL 是否可以在难治性转移性黑色素瘤患者中使用高剂量 IL-2 进行非清髓性调节后，在标准年轻 TIL 未生长的患者中介导肿瘤消退。
• 确定 ECCE young TIL 在这些治疗方案中的毒性

合格：

18 岁或以上的患者必须具备：

• 转移性黑色素瘤；
• 东部肿瘤合作组 (ECOG) 表现状态 0 或 1
• 一个或多个 2 cm 或更大的病灶适合 TIL 培养切除

患者可能没有：

• 并发重大疾病；
• 任何形式的免疫缺陷；
• 对本研究中使用的任何药物严重过敏；
• 高剂量 IL-2 给药的禁忌症。

设计：

• 患者将接受切除以获得肿瘤，用于生成自体年轻 TIL 培养物。
• 将使用 a) 仅使用 IL-2 的标准技术和 b) 使用辐照 K562.CD64.4-1BBL-7F11 的共刺激增强工程细胞 (ECCE) 方案建立平行 TIL 培养 (7F11) 细胞。
• 10 到 20 天后，将对培养物进行 TIL 建立评估。 将优先使用标准 TIL，通过标准方法建立 TIL 的患者将被分配到队列 1

• 队列 1：

  • TIL 将通过暴露于 OKT-3、IL-2、饲养细胞和辐照的 7F11 进行 ECCE REP。
  • 患者将在第 -7 天和第 -6 天接受环磷酰胺（60 mg/kg/天静脉注射 (IV)）和第 -5 天至第 -5 天氟达拉滨（25 mg/m^2/天 IV）的非清髓性淋巴细胞耗竭制备方案-1。
  • 在第 0 天，患者将接受自体年轻 TIL 输注，然后开始大剂量阿地白介素（720,000 IU/kg 静脉注射，每 8 小时一次，最多 15 剂）。
  • 治疗后约 4-6 周将评估临床和免疫反应。
  • 使用最佳的两阶段 II 期设计，最初将招募 18 名患者，如果前 18 名患者中有 3 名或更多患者出现临床反应（部分反应 (PR) 或完全反应 (CR)），则应计将继续至 35患者，以 30% 的客观反应目标为目标。
• 如果标准的年轻 TIL 无法生长，则将评估 ECCE 年轻 TIL，并将具有可用 ECCE TIL 的患者分配到队列 2。

• 队列 2：

  • 来自队列 2 患者的培养物将被评估用于 ECCE TIL 的建立。 如果有足够的 ECCE TIL，TIL 将通过暴露于 OKT-3、IL-2、饲养细胞和受辐射的 7F11 进行 ECCE REP。
  • 患者将在第-7 天和第-6 天接受非清髓性淋巴细胞耗竭制备方案，即在第-7 天和第-6 天接受环磷酰胺（60 mg/kg/天IV），并在第-5 天至第-1 天接受氟达拉滨（25 mg/m^2/天IV）。
  • 在第 0 天，患者将接受自体年轻 TIL 输注，然后开始大剂量阿地白介素（720,000 IU/kg 静脉注射，每 8 小时一次，最多 15 剂）。
  • TIL 输注后约 4-6 周将评估临床和免疫反应。
  • 使用小型优化的两阶段 II 期设计，最初将招募 9 名患者，如果前 9 名患者中有一名或多名患者出现临床反应（PR 或 CR），则招募将继续增加至 24 名患者，目标为 25%为了客观的反应。
• 如果 TIL 培养不是通过标准方法或 ECCE 年轻 TIL 方案建立的，则患者将有资格从不同部位重新切除和评估 TIL。