Modifikované tumor infiltrující lymfocyty pro metastatický melanom

Pozadí:

• Podávání lymfocytů infiltrujících nádor (TIL) a vysoká dávka interleukinu (IL)-2 po lymfodepleci může zprostředkovat trvalou kompletní odpověď u pacientů s refrakterním melanomem. Překážky podávání této terapie zahrnují selhání stanovení TIL in vitro u asi 20 % pacientů, dlouhé prodlevy mezi resekcí nádoru a stanovením TIL, což má za následek špatné vlastnosti TIL pro terapii a nezpůsobilost pacienta kvůli progresi a požadavky na velký počet podpůrných buněk pro rozšíření TIL na terapeutická čísla.
• Buněčná linie K562 byla upravena tak, aby exprimovala kostimulační molekulu 4-1BBL a CD64 (vysokoafinitní Fc receptor pro naplnění protilátkami, jako je OKT3). K562.CD64.4-1BBL Engineered Cells with Costimulation Enhancement (ECCE) nahradily až 75 % podpůrných buněk ve velkých expanzích TIL. ECCE přidaná k suspenzím nádorových buněk poskytla kostimulaci in trans vedoucí k rychlému a spolehlivému růstu lymfocytů i z nádorů bez růstu TIL za standardních podmínek.
• Klonovaný K562.CD64.4-1BBL-7F11 ECCE linie byla vyrobena za podmínek správné výrobní praxe (GMP) a byla vytvořena hlavní buněčná banka. Byl vytvořen optimalizovaný protokol pro rychlou expanzi (REP) mladých TIL pomocí minimálních podavačů a 7F11. Tyto ECCE REPed TIL si zachovaly rozpoznání nádoru a některé další atributy standardního TIL, ale lišily se od standardního TIL tím, že obsahovaly méně CD4+ buněk a více přirozených zabíječských buněk.

Když byly 7F11ECCE přidány přímo do suspenzí jednobuněčných nádorů, byly mladé kultury TIL spolehlivě generovány i od pacientů, kteří by jinak neměli standardní mladou kulturu TIL pro léčbu.

Cíle:

Primární cíle:

• V kohortě 1 vyhodnotit, zda mladý TIL, který je rychle expandován pomocí 7F11 ECCE k nahrazení některých podpůrných buněk a podávaný s IL-2 u pacientů po nemyeloablativním kondicionačním režimu, povede ke klinické regresi nádoru u pacientů s refrakterním metastatickým melanomem.
• V kohortě 2 zhodnotit, zda mladý TIL generovaný pomocí trans kostimulace s 7F11 ECCE u pacientů, u kterých standardní mladý TIL nerostl, může zprostředkovat regresi nádoru po nemyeloablativním kondicionování vysokou dávkou IL-2 u pacientů s refrakterním metastatickým melanomem.
• Určete toxicitu ECCE young TIL v těchto léčebných režimech

Způsobilost:

Pacienti ve věku 18 let nebo starší musí mít:

• metastatický melanom;
• Stav výkonnosti Eastern Cooperative Oncology Group (ECOG) 0 nebo 1
• Jedna nebo více lézí o velikosti 2 cm nebo větší vhodných k resekci pro kultivaci TIL

Pacienti nemusí mít:

• Souběžná hlavní zdravotní onemocnění;
• Jakákoli forma imunodeficience;
• Závažná přecitlivělost na kteroukoli z látek použitých v této studii;
• Kontraindikace podávání vysokých dávek IL-2.

Design:

• Pacienti podstoupí resekci, aby se získal nádor pro vytvoření autologních mladých kultur TIL.
• Paralelní kultury TIL budou založeny pomocí a) standardní techniky pouze s IL-2 ab) protokolu Engineered Cells with Costimulation Enhancement (ECCE) s použitím ozářeného K562.CD64.4-1BBL-7F11 (7F11) buňky.
• Po 10 až 20 dnech budou kultury podrobeny hodnocení pro vytvoření TIL. Přednostně bude používán standardní TIL a pacienti, kteří mají TIL stanovený standardními metodami, budou zařazeni do kohorty 1

• Kohorta 1:

  • TIL podstoupí ECCE REP vystavením OKT-3, IL-2, podpůrným buňkám a ozářenému 7F11.
  • Pacienti dostanou nemyeloablativní preparativní režim s deplecí lymfocytů cyklofosfamidu (60 mg/kg/den intravenózně (IV)) ve dnech -7 a -6 a fludarabin (25 mg/m^2/den IV) ve dnech -5 až -1.
  • V den 0 dostanou pacienti infuzi autologního mladého TIL a poté začnou podávat vysoké dávky aldesleukinu (720 000 IU/kg IV každých 8 hodin až do 15 dávek).
  • Klinická a imunologická odpověď bude hodnocena asi 4-6 týdnů po léčbě.
  • Při použití optimálního dvoufázového designu fáze II bude zpočátku zařazeno 18 pacientů, a pokud tři nebo více z prvních 18 pacientů mají klinickou odpověď (částečná odpověď (PR) nebo úplná odpověď (CR)), přírůstek bude pokračovat na 35 pacientů s cílem dosáhnout 30% cíle pro objektivní odpověď.
• Pokud standardní mladý TIL neroste, bude ECCE mladý TIL vyhodnocen a pacienti, kteří mají ECCE TIL k dispozici, budou zařazeni do kohorty 2.

• Kohorta 2:

  • Kultury od pacientů v kohortě 2 budou hodnoceny pro založení ECCE TIL. Pokud je k dispozici adekvátní ECCE TIL, TIL podstoupí ECCE REP vystavením OKT-3, IL-2, podpůrným buňkám a ozářenému 7F11.
  • Pacienti budou dostávat nemyeloablativní preparativní režim s deplecí lymfocytů cyklofosfamidu (60 mg/kg/den IV) ve dnech -7 a -6 a fludarabin (25 mg/m^2/den IV) ve dnech -5 až -1.
  • V den 0 dostanou pacienti infuzi autologního mladého TIL a poté začnou podávat vysoké dávky aldesleukinu (720 000 IU/kg IV každých 8 hodin až do 15 dávek).
  • Klinická a imunologická odpověď bude hodnocena asi 4-6 týdnů po infuzi TIL.
  • Při použití malého optimálního dvoufázového designu fáze II bude zpočátku zařazeno 9 pacientů, a pokud jeden nebo více z prvních 9 pacientů bude mít klinickou odpověď (PR nebo CR), bude přírůstek pokračovat u 24 pacientů s cílem 25 % cíle za objektivní odpověď.
• Pokud kultury TIL nebyly založeny ani standardními metodami, ani protokoly ECCE pro mladé TIL, budou pacienti způsobilí pro resekci a hodnocení TIL z jiného místa.