Modificerede tumorinfiltrerende lymfocytter til metastatisk melanom

Baggrund:

• Administration af tumorinfiltrerende lymfocytter (TIL) og højdosis interleukin (IL)-2 efter lymfodepletion kan mediere varige fuldstændige responser hos patienter med refraktært melanom. Forhindringer for administration af denne terapi omfatter manglende etablering af TIL in vitro for omkring 20 % af patienterne, lange forsinkelser mellem tumorresektion og TIL-etablering, hvilket resulterer i dårlige TIL-egenskaber for terapi og patientens uegnethed på grund af progression, og krav til et stort antal fødeceller for TIL-udvidelse til terapeutiske tal.
• K562-cellelinjen blev konstrueret til at udtrykke det 4-1BBL-costimulerende molekyle og CD64 (højaffinitets-Fc-receptoren til belastning med antistoffer såsom OKT3). K562.CD64.4-1BBL Engineered Cells with Costimulation Enhancement (ECCE) erstattede op til 75 % af fødeceller i TIL-udvidelser i stor skala. ECCE tilsat til tumorcellesuspensioner gav co-stimulering i trans, hvilket resulterede i hurtig og pålidelig lymfocytvækst selv fra tumorer uden TIL-vækst under standardbetingelser.
• En klonet K562.CD64.4-1BBL-7F11 ECCE-linjen blev produceret under Good Manufacturing Practice (GMP) betingelser, og en mastercellebank er blevet genereret. En optimeret protokol blev etableret til hurtigt at udvide (REP) unge TIL ved hjælp af minimumsfodere og 7F11. Disse ECCE REPed TIL bevarede tumorgenkendelse og nogle andre egenskaber ved standard TIL, men adskilte sig fra standard TIL ved at indeholde færre CD4+ celler og flere naturlige dræberceller.

Når 7F11ECCE blev tilsat direkte til enkeltcellede tumorsuspensioner, blev unge TIL-kulturer pålideligt genereret selv fra patienter, som ellers ikke ville have en standard ung TIL-kultur til behandling.

Mål:

Primære mål:

• I kohorte 1, for at evaluere, om unge TIL, der hurtigt udvides ved hjælp af 7F11 ECCE til at erstatte nogle fødeceller og administreret med IL-2 hos patienter efter et ikke-myeloablativt konditioneringsregime, vil resultere i klinisk tumorregression hos patienter med refraktært metastatisk melanom.
• I kohorte 2, for at evaluere, om ung TIL genereret ved hjælp af transcostimulering med 7F11 ECCE hos patienter, for hvem standard ung TIL ikke voksede, kan mediere tumorregression efter en ikke-myeloablativ konditionering med høj dosis IL-2 hos patienter med refraktær metastatisk melanom.
• Bestem toksiciteten af ​​ECCE ung TIL i disse behandlingsregimer

Berettigelse:

Patienter, der er 18 år eller ældre, skal have:

• metastatisk melanom;
• Eastern Cooperative Oncology Group (ECOG) præstationsstatus 0 eller 1
• En eller flere læsioner på 2 cm eller mere egnet til resektion til TIL-dyrkning

Patienter har muligvis ikke:

• Samtidige større medicinske sygdomme;
• Enhver form for immundefekt;
• Alvorlig overfølsomhed over for et hvilket som helst af midlerne anvendt i denne undersøgelse;
• Kontraindikationer for høj dosis IL-2 administration.

Design:

• Patienter vil gennemgå resektion for at opnå tumor til generering af autologe unge TIL-kulturer.
• Parallelle TIL-kulturer vil blive etableret ved hjælp af a) standardteknikken med kun IL-2 og b) ECCE-protokollen Engineered Cells with Costimulation Enhancement (ECCE) ved brug af bestrålet K562.CD64.4-1BBL-7F11 (7F11) celler.
• Efter 10 til 20 dage vil kulturer gennemgå evaluering for TIL-etablering. Standard TIL vil blive brugt fortrinsvis, og patienter, der har TIL etableret ved standardmetoder, vil blive tildelt kohorte 1

• Kohorte 1:

  • TIL vil gennemgå ECCE REP ved eksponering for OKT-3, IL-2, fødeceller og bestrålet 7F11.
  • Patienterne vil modtage en ikke-myeloablativ lymfocytdepleterende præparativ kur med cyclophosphamid (60 mg/kg/dag intravenøst ​​(IV)) på dag -7 og -6 og fludarabin (25 mg/m^2/dag IV) på dag -5 til og med -1.
  • På dag 0 vil patienter modtage infusion af autolog ung TIL og derefter begynde højdosis aldesleukin (720.000 IE/kg IV hver 8. time i op til 15 doser).
  • Klinisk og immunologisk respons vil blive evalueret omkring 4-6 uger efter behandlingen.
  • Ved at bruge et optimalt to-trins fase II-design vil der i første omgang blive indskrevet 18 patienter, og hvis tre eller flere af de første 18 patienter har et klinisk respons (delvis respons (PR) eller komplet respons (CR)), vil optjeningen fortsætte til 35 patienter, med et mål på 30 % for objektiv respons.
• Hvis standard ung TIL ikke vokser, vil ECCE ung TIL blive evalueret, og patienter, der har ECCE TIL tilgængelig, vil blive tildelt kohorte 2.

• Kohorte 2:

  • Kulturer fra patienter i kohorte 2 vil blive evalueret for etablering af ECCE TIL. Hvis tilstrækkelig ECCE TIL er tilgængelig, vil TIL gennemgå ECCE REP ved eksponering for OKT-3, IL-2, fødeceller og bestrålet 7F11.
  • Patienterne vil modtage en ikke-myeloablativ lymfocytdepleterende præparativ kur af cyclophosphamid (60 mg/kg/dag IV) på dag -7 og -6 og fludarabin (25 mg/m^2/dag IV) på dag -5 til -1.
  • På dag 0 vil patienter modtage infusion af autolog ung TIL og derefter begynde højdosis aldesleukin (720.000 IE/kg IV hver 8. time i op til 15 doser).
  • Klinisk og immunologisk respons vil blive evalueret omkring 4-6 uger efter TIL-infusion.
  • Ved at bruge et lille, optimalt fase II-design i to trin, vil der i første omgang blive indskrevet 9 patienter, og hvis en eller flere af de første 9 patienter har en klinisk respons (PR eller CR), vil akkumuleringen fortsætte til 24 patienter med et mål på 25 %. for objektiv reaktion.
• Hvis TIL-kulturer ikke blev etableret ved enten standardmetoder eller ECCE-ung TIL-protokoller, vil patienter være berettiget til re-resektion og evaluering af TIL fra et andet sted.