Modifizierte tumorinfiltrierende Lymphozyten bei metastasiertem Melanom

Hintergrund:

• Die Verabreichung von tumorinfiltrierenden Lymphozyten (TIL) und hochdosiertem Interleukin (IL)-2 nach Lymphodepletion kann bei Patienten mit refraktärem Melanom zu dauerhaften vollständigen Reaktionen führen. Zu den Hindernissen für die Verabreichung dieser Therapie gehören das Versäumnis, bei etwa 20 % der Patienten eine TIL in vitro zu etablieren, lange Verzögerungen zwischen der Tumorresektion und der TIL-Etablierung, die zu schlechten TIL-Eigenschaften für die Therapie und der Nichtzulassung des Patienten aufgrund der Progression führen, sowie der Bedarf an einer großen Anzahl von Feeder-Zellen für die TIL-Erweiterung auf therapeutische Zahlen.
• Die K562-Zelllinie wurde so konstruiert, dass sie das kostimulatorische Molekül 4-1BBL und CD64 (den hochaffinen Fc-Rezeptor zur Beladung mit Antikörpern wie OKT3) exprimiert. Der K562.CD64.4-1BBL „Engineered Cells with Costimulation Enhancement“ (ECCE) ersetzten bei groß angelegten TIL-Erweiterungen bis zu 75 % der Feeder-Zellen. Zu Tumorzellsuspensionen hinzugefügtes ECCE sorgte für eine Kostimulation in trans, was zu einem schnellen und zuverlässigen Lymphozytenwachstum führte, selbst bei Tumoren ohne TIL-Wachstum unter Standardbedingungen.
• Ein geklontes K562.CD64.4-1BBL-7F11 Die ECCE-Linie wurde unter Good Manufacturing Practice (GMP)-Bedingungen hergestellt und eine Masterzellbank erstellt. Es wurde ein optimiertes Protokoll erstellt, um junge TIL unter Verwendung von Minimalfuttermitteln und 7F11 schnell zu vermehren (REP). Diese ECCE REPed TIL behielten die Tumorerkennung und einige andere Eigenschaften des Standard-TIL bei, unterschieden sich jedoch vom Standard-TIL dadurch, dass sie weniger CD4+-Zellen und mehr natürliche Killerzellen enthielten.

Bei direkter Zugabe von 7F11ECCE zu Einzelzelltumorsuspensionen wurden zuverlässig junge TIL-Kulturen erzeugt, selbst bei Patienten, die andernfalls keine standardmäßige junge TIL-Kultur zur Behandlung zur Verfügung hätten.

Ziele:

Hauptziele:

• In Kohorte 1 soll untersucht werden, ob junge TIL, die unter Verwendung von 7F11 ECCE zum Ersetzen einiger Feeder-Zellen und bei Verabreichung von IL-2 bei Patienten nach einem nicht-myeloablativen Konditionierungsschema schnell expandiert werden, bei Patienten mit refraktärem metastasiertem Melanom zu einer klinischen Tumorregression führen.
• In Kohorte 2 soll untersucht werden, ob junges TIL, das durch Transkostimulation mit 7F11 ECCE bei Patienten erzeugt wurde, bei denen standardmäßiges junges TIL nicht wuchs, eine Tumorregression nach einer nichtmyeloablativen Konditionierung mit hochdosiertem IL-2 bei Patienten mit refraktärem metastasiertem Melanom vermitteln kann.
• Bestimmen Sie die Toxizität von ECCE young TIL in diesen Behandlungsschemata

Teilnahmeberechtigung:

Patienten, die 18 Jahre oder älter sind, müssen Folgendes haben:

• metastasiertes Melanom;
• Leistungsstatus der Eastern Cooperative Oncology Group (ECOG) 0 oder 1
• Eine oder mehrere Läsionen von 2 cm oder mehr, die für die Resektion für die TIL-Kultur geeignet sind

Patienten haben möglicherweise nicht:

• Gleichzeitige schwere medizinische Erkrankungen;
• Jede Form von Immunschwäche;
• Schwere Überempfindlichkeit gegen einen der in dieser Studie verwendeten Wirkstoffe;
• Kontraindikationen für die Verabreichung von hochdosiertem IL-2.

Design:

• Die Patienten werden einer Resektion unterzogen, um einen Tumor für die Erzeugung autologer junger TIL-Kulturen zu erhalten.
• Parallele TIL-Kulturen werden unter Verwendung a) der Standardtechnik nur mit IL-2 und b) des Protokolls „Engineered Cells with Costimulation Enhancement“ (ECCE) unter Verwendung von bestrahltem K562.CD64.4-1BBL-7F11 etabliert (7F11) Zellen.
• Nach 10 bis 20 Tagen werden die Kulturen auf die Etablierung von TIL untersucht. Standard-TIL wird bevorzugt verwendet und Patienten, deren TIL durch Standardmethoden ermittelt wurde, werden Kohorte 1 zugeordnet

• Kohorte 1:

  • TIL wird einer ECCE-REP unterzogen, indem es OKT-3, IL-2, Feederzellen und bestrahltem 7F11 ausgesetzt wird.
  • Die Patienten erhalten an den Tagen -7 und -6 eine nicht-myeloablative lymphozytendepletierende präparative Therapie mit Cyclophosphamid (60 mg/kg/Tag intravenös (IV)) und an den Tagen -5 bis -6 Fludarabin (25 mg/m²/Tag IV). -1.
  • Am Tag 0 erhalten die Patienten die Infusion von autologem jungem TIL und beginnen dann mit der hochdosierten Aldesleukin-Therapie (720.000 IE/kg i.v. alle 8 Stunden für bis zu 15 Dosen).
  • Das klinische und immunologische Ansprechen wird etwa 4–6 Wochen nach der Behandlung beurteilt.
  • Unter Verwendung eines optimalen zweistufigen Phase-II-Designs werden zunächst 18 Patienten aufgenommen. Wenn drei oder mehr der ersten 18 Patienten ein klinisches Ansprechen zeigen (partielles Ansprechen (PR) oder vollständiges Ansprechen (CR)), wird die Zahl der Patienten auf 35 erhöht Patienten, wobei ein Ziel von 30 % für ein objektives Ansprechen angestrebt wird.
• Wenn die standardmäßige junge TIL nicht wächst, wird die junge ECCE-TIL ausgewertet und Patienten, für die ECCE-TIL verfügbar ist, werden der Kohorte 2 zugeordnet.

• Kohorte 2:

  • Kulturen von Patienten in Kohorte 2 werden für die Etablierung von ECCE TIL ausgewertet. Wenn ausreichend ECCE-TIL verfügbar ist, wird TIL einer ECCE-REP durch Exposition gegenüber OKT-3, IL-2, Feeder-Zellen und bestrahltem 7F11 unterzogen.
  • Die Patienten erhalten an den Tagen -7 und -6 eine nicht-myeloablative lymphozytendepletierende präparative Therapie mit Cyclophosphamid (60 mg/kg/Tag IV) und an den Tagen -5 bis -1 Fludarabin (25 mg/m²/Tag IV).
  • Am Tag 0 erhalten die Patienten die Infusion von autologem jungem TIL und beginnen dann mit der hochdosierten Aldesleukin-Therapie (720.000 IE/kg i.v. alle 8 Stunden für bis zu 15 Dosen).
  • Die klinische und immunologische Reaktion wird etwa 4–6 Wochen nach der TIL-Infusion bewertet.
  • Unter Verwendung eines kleinen, optimalen zweistufigen Phase-II-Designs werden zunächst 9 Patienten aufgenommen. Wenn einer oder mehrere der ersten 9 Patienten ein klinisches Ansprechen (PR oder CR) zeigen, wird die Zahl der Patienten auf 24 Patienten erhöht, wobei ein Ziel von 25 % angestrebt wird für eine objektive Antwort.
• Wenn TIL-Kulturen weder mit Standardmethoden noch mit ECCE-Young-TIL-Protokollen etabliert wurden, haben Patienten Anspruch auf eine erneute Resektion und Beurteilung der TIL an einer anderen Stelle.