転移性黒色腫に対する修飾された腫瘍浸潤リンパ球

バックグラウンド：

• リンパ球枯渇後の腫瘍浸潤リンパ球 (TIL) 投与と高用量のインターロイキン (IL)-2 は、難治性黒色腫患者における持続的な完全寛解を媒介する可能性があります。 この療法の実施に対する障害としては、患者の約20％がin vitroでTILを確立できないこと、腫瘍切除とTIL確立の間に長い遅延が生じ、その結果治療に対するTIL属性が低くなり、進行により患者が不適格となること、および多数のフィーダー細胞が必要であることが挙げられる。 TIL を治療数まで拡大するために。
• K562 細胞株は、4-1BBL 共刺激分子および CD64 (OKT3 などの抗体を負荷するための高親和性 Fc 受容体) を発現するように操作されました。 K562.CD64.4-1BBL 共刺激増強機能を備えた改変細胞 (ECCE) は、大規模な TIL 拡張においてフィーダー細胞の最大 75% を置き換えました。 腫瘍細胞懸濁液に ECCE を添加すると、イントランスで共刺激が得られ、標準条件下では TIL 増殖のない腫瘍からも迅速かつ信頼性の高いリンパ球増殖がもたらされました。
• クローン化された K562.CD64.4-1BBL-7F11 ECCE 株は適正製造基準 (GMP) 条件下で生産され、マスター細胞バンクが生成されました。 最小フィーダーと 7F11 を使用して若い TIL を急速に拡大 (REP) するための最適化されたプロトコルが確立されました。 これらの ECCE REPed TIL は、標準 TIL の腫瘍認識およびその他のいくつかの特性を保持していましたが、CD4+ 細胞が少なく、ナチュラルキラー細胞が多かったという点で標準 TIL とは異なりました。

7F11ECCEを単細胞腫瘍懸濁液に直接添加すると、治療用の標準的な若いTIL培養物を持たない患者からも若いTIL培養物が確実に生成されました。

目的:

主な目的:

• コホート 1 では、一部のフィーダー細胞を置換するために 7F11 ECCE を使用して急速に拡張し、非骨髄破壊的前処置療法を受けた患者に IL-2 を投与した若い TIL が、難治性転移性黒色腫患者の臨床腫瘍退縮をもたらすかどうかを評価します。
• コホート2では、標準的な若年TILが成長しなかった患者において、7F11 ECCEによるトランス共刺激を使用して生成された若年TILが、難治性転移性黒色腫患者における高用量のIL-2による非骨髄破壊的前処置後の腫瘍退縮を媒介できるかどうかを評価する。
• これらの治療計画における ECCE 若い TIL の毒性を決定する

資格:

18 歳以上の患者は以下を備えている必要があります。

• 転移性黒色腫。
• Eastern Cooperative Oncology Group (ECOG) のパフォーマンス ステータス 0 または 1
• TIL培養のための切除に適した2cm以上の1つ以上の病変

患者には次のような症状がない可能性があります。

• 重篤な病気の併発。
• あらゆる形態の免疫不全。
• この研究で使用された薬剤のいずれかに対する重度の過敏症。
• 高用量のIL-2投与の禁忌。

デザイン：

• 患者は切除を受けて、自己の若い TIL 培養物を生成するための腫瘍を取得します。
• 平行した TIL 培養は、a) IL-2 のみを使用した標準技術、および b) 照射された K562.CD64.4-1BBL-7F11 を使用した共刺激増強 (ECCE) プロトコルを使用して確立されます。 (7F11) 細胞。
• 10 ～ 20 日後、培養物は TIL 確立の評価を受けます。 標準的な TIL が優先的に使用され、標準的な方法によって TIL が確立された患者はコホート 1 に割り当てられます。

• コホート 1:

  • TIL は、OKT-3、IL-2、フィーダー細胞および照射された 7F11 への曝露によって ECCE REP を受けます。
  • 患者は、-7日目と-6日目にシクロホスファミド（60 mg/kg/日静脈内（IV））の非骨髄破壊的リンパ球除去準備レジメンを受け、-5日目から-5日目までフルダラビン（25 mg/m^2/日IV）を受ける。 -1。
  • 0日目に患者は自家若年TILの注入を受け、その後高用量のアルデスロイキンを開始する（720,000 IU/kg IVを8時間ごとに最大15回投与）。
  • 臨床的および免疫学的反応は、治療後約 4 ～ 6 週間で評価されます。
  • 最適な 2 段階の第 II 相デザインを使用して、最初に 18 人の患者が登録され、最初の 18 人の患者のうち 3 人以上が臨床応答 (部分奏効 (PR) または完全奏効 (CR)) を示した場合、累積は 35 人まで継続されます。患者の客観的な反応を 30% の目標に設定します。
• 標準的な若い TIL が成長しない場合は、ECCE の若い TIL が評価され、ECCE TIL が利用可能な患者はコホート 2 に割り当てられます。

• コホート 2:

  • コホート 2 の患者からの培養物は、ECCE TIL の確立に関して評価されます。 適切な ECCE TIL が利用できる場合、TIL は OKT-3、IL-2、フィーダー細胞および放射線照射された 7F11 への曝露によって ECCE REP を受けます。
  • 患者は、-7日目と-6日目にシクロホスファミド(60mg/kg/日IV)の非骨髄破壊的リンパ球除去準備レジメンを受け、-5日目から-1日目にフルダラビン(25mg/m^2/日IV)を受ける。
  • 0日目に患者は自家若年TILの注入を受け、その後高用量のアルデスロイキンを開始する（720,000 IU/kg IVを8時間ごとに最大15回投与）。
  • 臨床的および免疫学的反応は、TIL 注入後約 4 ～ 6 週間で評価されます。
  • 小規模で最適な 2 段階の第 II 相デザインを使用して、最初に 9 人の患者が登録され、最初の 9 人の患者のうち 1 人以上が臨床反応 (PR または CR) を示した場合、25% の目標を目指して 24 人の患者まで増加が続きます。客観的な対応をするために。
• TIL 培養が標準方法または ECCE 若い TIL プロトコールによって確立されなかった場合、患者は別の部位からの TIL の再切除および評価の対象となります。