Модифицированная опухоль, инфильтрирующая лимфоциты при метастатической меланоме

Фон:

• Введение опухолевых инфильтрирующих лимфоцитов (TIL) и высокие дозы интерлейкина (IL)-2 после лимфодеплеции могут обеспечить устойчивый полный ответ у пациентов с рефрактерной меланомой. Препятствия для проведения этой терапии включают неспособность установить TIL in vitro примерно у 20% пациентов, длительные задержки между резекцией опухоли и созданием TIL, что приводит к плохим атрибутам TIL для терапии и непригодности пациента из-за прогрессирования, а также требования к большому количеству питающих клеток. для расширения TIL до терапевтических чисел.
• Клеточная линия K562 была сконструирована для экспрессии костимулирующей молекулы 4-1BBL и CD64 (высокоаффинный Fc-рецептор для загрузки антителами, такими как OKT3). К562.CD64.4-1ББЛ Спроектированные ячейки с усилением костимуляции (ECCE) заменили до 75% фидерных ячеек в крупномасштабных расширениях TIL. ECCE, добавленный к суспензиям опухолевых клеток, обеспечивал костимуляцию in trans, что приводило к быстрому и надежному росту лимфоцитов даже из опухолей без роста TIL в стандартных условиях.
• Клонированный K562.CD64.4-1BBL-7F11 Линия ECCE была произведена в соответствии с правилами надлежащей производственной практики (GMP), и был создан основной банк клеток. Был разработан оптимизированный протокол для быстрого размножения (REP) молодых TIL с использованием минимальных кормушек и 7F11. Эти ECCE REPed TIL сохранили распознавание опухоли и некоторые другие атрибуты стандартного TIL, но отличались от стандартного TIL тем, что содержали меньше клеток CD4+ и больше естественных клеток-киллеров.

Когда 7F11ECCE добавляли непосредственно к суспензиям одиночных опухолей, молодые культуры TIL надежно генерировались даже у пациентов, которые в противном случае не имели бы стандартной молодой культуры TIL для лечения.

Цели:

Основные цели:

• В когорте 1, чтобы оценить, приведут ли молодые TIL, которые быстро размножаются с использованием 7F11 ECCE для замены некоторых фидерных клеток и вводят IL-2 пациентам после немиелоаблативного режима кондиционирования, к клинической регрессии опухоли у пациентов с рефрактерной метастатической меланомой.
• В когорте 2, чтобы оценить, может ли молодой TIL, созданный с использованием транскостимуляции с 7F11 ECCE, у пациентов, у которых стандартный молодой TIL не вырос, опосредовать регрессию опухоли после немиелоаблативного кондиционирования с высокой дозой IL-2 у пациентов с рефрактерной метастатической меланомой.
• Определить токсичность ECCE молодых TIL в этих схемах лечения

Право на участие:

Пациенты в возрасте 18 лет и старше должны иметь:

• метастатическая меланома;
• Статус эффективности Восточной кооперативной онкологической группы (ECOG) 0 или 1
• Одно или несколько поражений размером 2 см или более, пригодных для резекции для посева TIL.

У пациентов может отсутствовать:

• Сопутствующие серьезные медицинские заболевания;
• Любая форма иммунодефицита;
• Тяжелая гиперчувствительность к любому из агентов, используемых в этом исследовании;
• Противопоказания для введения высоких доз ИЛ-2.

Дизайн:

• Пациенты будут подвергнуты резекции, чтобы получить опухоль для создания аутологичных молодых культур TIL.
• Параллельные культуры TIL будут созданы с использованием а) ​​стандартной методики только с ИЛ-2 и б) протокола сконструированных клеток с усилением костимуляции (ECCE) с использованием облученного K562.CD64.4-1BBL-7F11. (7F11) клетки.
• Через 10-20 дней культуры будут оцениваться на установление TIL. Стандартный TIL будет использоваться предпочтительно, и пациенты, у которых TIL установлен стандартными методами, будут отнесены к когорте 1.

• Группа 1:

  • TIL будет проходить ECCE REP путем воздействия OKT-3, IL-2, фидерных клеток и облученного 7F11.
  • Пациенты будут получать немиелоаблативную препаративную схему, истощающую лимфоциты, циклофосфамид (60 мг/кг/день внутривенно (в/в)) в дни -7 и -6 и флударабин (25 мг/м^2/день в/в) в дни с -5 по -1.
  • В день 0 пациенты получат инфузию аутологичной молодой TIL, а затем начнут вводить высокие дозы альдеслейкина (720 000 МЕ/кг внутривенно каждые 8 ​​часов, до 15 доз).
  • Клинический и иммунологический ответ будет оцениваться примерно через 4-6 недель после лечения.
  • Используя оптимальный двухэтапный план Фазы II, первоначально будут зарегистрированы 18 пациентов, и если у трех или более из первых 18 пациентов будет клинический ответ (частичный ответ (PR) или полный ответ (CR)), набор будет продолжаться до 35. пациентов, ориентируясь на цель 30% для объективного ответа.
• Если стандартный молодой TIL не растет, тогда будет оцениваться ECCE молодых TIL, и пациенты, у которых есть доступный ECCE TIL, будут отнесены к когорте 2.

• Когорта 2:

  • Культуры от пациентов в когорте 2 будут оцениваться для установления ECCE TIL. Если доступны адекватные ECCE TIL, TIL будет подвергаться ECCE REP путем воздействия OKT-3, IL-2, фидерных клеток и облученного 7F11.
  • Пациенты будут получать немиелоаблативную препаративную схему лечения с истощением лимфоцитов циклофосфамидом (60 мг/кг/день в/в) в дни -7 и -6 и флударабином (25 мг/м^2/день в/в) в дни с -5 по -1.
  • В день 0 пациенты получат инфузию аутологичной молодой TIL, а затем начнут вводить высокие дозы альдеслейкина (720 000 МЕ/кг внутривенно каждые 8 ​​часов, до 15 доз).
  • Клинический и иммунологический ответ будет оцениваться примерно через 4-6 недель после инфузии TIL.
  • Используя небольшую оптимальную двухэтапную схему Фазы II, первоначально будут зарегистрированы 9 пациентов, и если у одного или нескольких из первых 9 пациентов будет клинический ответ (PR или CR), набор продолжится до 24 пациентов, ориентируясь на цель 25%. для объективного ответа.
• Если культуры TIL не были получены ни стандартными методами, ни протоколами молодых TIL ECCE, пациенты будут иметь право на повторную резекцию и оценку TIL из другого места.