Modifierade tumörinfiltrerande lymfocyter för metastaserande melanom

Bakgrund:

• Administrering av tumörinfiltrerande lymfocyter (TIL) och högdos interleukin (IL)-2 efter lymfodpletion kan förmedla varaktiga kompletta svar hos patienter med refraktärt melanom. Hinder för administrering av denna terapi inkluderar misslyckande att etablera TIL in vitro för cirka 20 % av patienterna, långa förseningar mellan tumörresektion och TIL-etablering som resulterar i dåliga TIL-egenskaper för terapi och patientens olämplighet på grund av progression och krav på ett stort antal matarceller för TIL-expansion till terapeutiska nummer.
• K562-cellinjen konstruerades för att uttrycka den 4-1BBL-samstimulerande molekylen och CD64 (den högaffinitets-Fc-receptorn för laddning med antikroppar såsom OKT3). K562.CD64.4-1BBL Konstruerade celler med Costimulation Enhancement (ECCE) ersatte upp till 75 % av matarcellerna i storskaliga TIL-expansions. ECCE tillsatt till tumörcellsuspensioner gav samstimulering i trans vilket resulterade i snabb och tillförlitlig lymfocyttillväxt även från tumörer utan TIL-tillväxt under standardförhållanden.
• En klonad K562.CD64.4-1BBL-7F11 ECCE-linjen producerades under Good Manufacturing Practice (GMP)-förhållanden och en mastercellbank har skapats. Ett optimerat protokoll etablerades för att snabbt expandera (REP) unga TIL med hjälp av minimatare och 7F11. Dessa ECCE REPed TIL behöll tumörigenkänning och några andra attribut av standard TIL, men skilde sig från standard TIL genom att innehålla färre CD4+-celler och fler naturliga mördarceller.

När 7F11ECCE tillsattes direkt till encellstumörsuspensioner genererades unga TIL-kulturer tillförlitligt även från patienter som annars inte skulle ha en standard ung TIL-kultur för behandling.

Mål:

Primära mål:

• I kohort 1, för att utvärdera om unga TIL som snabbt expanderas med 7F11 ECCE för att ersätta vissa matarceller och administreras med IL-2 hos patienter som följer en icke-myeloablativ konditioneringsregim kommer att resultera i klinisk tumörregression hos patienter med refraktärt metastaserande melanom.
• I kohort 2, för att utvärdera huruvida ung TIL genererad med hjälp av in transsamstimulering med 7F11 ECCE hos patienter för vilka standard ung TIL inte växte kan mediera tumörregression efter en icke-myeloablativ konditionering med hög dos IL-2 hos patienter med refraktärt metastaserande melanom.
• Bestäm toxiciteten av ECCE ung TIL i dessa behandlingsregimer

Behörighet:

Patienter som är 18 år eller äldre måste ha:

• metastaserande melanom;
• Eastern Cooperative Oncology Group (ECOG) prestationsstatus 0 eller 1
• En eller flera lesioner 2 cm eller mer lämpliga för resektion för TIL-odling

Patienter kanske inte har:

• Samtidiga allvarliga medicinska sjukdomar;
• Alla former av immunbrist;
• Allvarlig överkänslighet mot något av de medel som används i denna studie;
• Kontraindikationer för administrering av hög dos IL-2.

Design:

• Patienterna kommer att genomgå resektion för att erhålla tumör för generering av autologa unga TIL-kulturer.
• Parallella TIL-kulturer kommer att etableras med a) standardtekniken med endast IL-2 och b) ECCE-protokollet Engineered Cells with Costimulation Enhancement (ECCE) med bestrålad K562.CD64.4-1BBL-7F11 (7F11) celler.
• Efter 10 till 20 dagar kommer kulturer att utvärderas för TIL-etablering. Standard TIL kommer att användas i första hand och patienter som har TIL etablerat med standardmetoder kommer att tilldelas Cohort 1

• Kohort 1:

  • TIL kommer att genomgå ECCE REP genom exponering för OKT-3, IL-2, matarceller och bestrålad 7F11.
  • Patienterna kommer att få en icke-myeloablativ lymfocytutarmande preparativ regim av cyklofosfamid (60 mg/kg/dag intravenöst (IV)) dagarna -7 och -6 och fludarabin (25 mg/m^2/dag IV) dagarna -5 till och med -1.
  • På dag 0 kommer patienter att få infusion av autolog ung TIL och sedan påbörja högdos aldesleukin (720 000 IE/kg IV var 8:e timme i upp till 15 doser).
  • Kliniskt och immunologiskt svar kommer att utvärderas cirka 4-6 veckor efter behandlingen.
  • Genom att använda en optimal tvåstegs fas II-design kommer initialt 18 patienter att registreras, och om tre eller fler av de första 18 patienterna har ett kliniskt svar (partiellt svar (PR) eller fullständigt svar (CR)), kommer ackumuleringen att fortsätta till 35 patienter, med ett mål på 30 % för objektiv respons.
• Om standard ung TIL inte växer kommer ECCE ung TIL att utvärderas och patienter som har ECCE TIL tillgänglig kommer att tilldelas Cohort 2 .

• Kohort 2:

  • Kulturer från patienter i kohort 2 kommer att utvärderas för etablering av ECCE TIL. Om tillräcklig ECCE TIL finns tillgänglig kommer TIL att genomgå ECCE REP genom exponering för OKT-3, IL-2, matarceller och bestrålad 7F11.
  • Patienterna kommer att få en icke-myeloablativ lymfocytutarmande preparativ regim av cyklofosfamid (60 mg/kg/dag IV) dagarna -7 och -6 och fludarabin (25 mg/m^2/dag IV) dagarna -5 till -1.
  • På dag 0 kommer patienter att få infusion av autolog ung TIL och sedan påbörja högdos aldesleukin (720 000 IE/kg IV var 8:e timme i upp till 15 doser).
  • Kliniskt och immunologiskt svar kommer att utvärderas cirka 4-6 veckor efter TIL-infusion.
  • Genom att använda en liten optimal tvåstegs fas II-design, kommer initialt 9 patienter att registreras, och om en eller flera av de första 9 patienterna har ett kliniskt svar (PR eller CR), kommer ackumuleringen att fortsätta till 24 patienter, med ett mål på 25 %. för objektivt svar.
• Om TIL-kulturer inte etablerades med vare sig standardmetoder eller ECCE-ung TIL-protokoll, kommer patienter att vara berättigade till omresektion och utvärdering av TIL från en annan plats.