Linfócitos Infiltrantes de Tumores Modificados para Melanoma Metastático

Fundo:

• A administração de Linfócitos Infiltrantes Tumorais (TIL) e altas doses de interleucina (IL)-2 após linfodepleção podem mediar respostas completas duradouras em pacientes com melanoma refratário. Obstáculos à administração desta terapia incluem falha em estabelecer TIL in vitro para cerca de 20% dos pacientes, longos atrasos entre a ressecção do tumor e o estabelecimento de TIL, resultando em atributos ruins de TIL para terapia e inelegibilidade do paciente devido à progressão e requisitos para um grande número de células alimentadoras para expansão de TIL para números terapêuticos.
• A linha celular K562 foi projetada para expressar a molécula co-estimuladora 4-1BBL e CD64 (o receptor Fc de alta afinidade para carregamento com anticorpos como OKT3). O K562.CD64.4-1BBL Células projetadas com aprimoramento de coestimulação (ECCE) substituíram até 75% das células alimentadoras em expansões TIL de grande escala. A ECCE adicionada às suspensões de células tumorais forneceu co-estimulação em trans, resultando em crescimento rápido e confiável de linfócitos, mesmo de tumores sem crescimento de TIL sob condições padrão.
• Um K562.CD64.4-1BBL-7F11 clonado A linha ECCE foi produzida sob condições de Boas Práticas de Fabricação (GMP) e um banco de células mestre foi gerado. Um protocolo otimizado foi estabelecido para expandir rapidamente (REP) TIL jovem usando alimentadores mínimos e 7F11. Esses ECCE REPed TIL mantiveram o reconhecimento do tumor e alguns outros atributos do TIL padrão, mas diferiram do TIL padrão por conter menos células CD4+ e mais células natural killer.

Quando 7F11ECCE foram adicionados diretamente a suspensões de tumor de célula única, culturas jovens de TIL foram geradas de forma confiável, mesmo de pacientes que, de outra forma, não teriam uma cultura padrão de TIL jovem para tratamento.

Objetivos.

Objetivos primários:

• Na coorte 1, avaliar se os TIL jovens que são rapidamente expandidos usando 7F11 ECCE para substituir algumas células alimentadoras e administrados com IL-2 em pacientes seguindo um regime de condicionamento não mieloablativo resultarão em regressão clínica do tumor em pacientes com melanoma metastático refratário.
• Na Coorte 2, para avaliar se o TIL jovem gerado usando a coestimulação trans com 7F11 ECCE em pacientes para os quais o TIL jovem padrão não cresceu pode mediar a regressão do tumor após um condicionamento não mieloablativo com alta dose de IL-2 em pacientes com melanoma metastático refratário.
• Determinar a toxicidade do ECCE jovem TIL nesses regimes de tratamento

Elegibilidade:

Os pacientes com 18 anos de idade ou mais devem ter:

• melanoma metastático;
• Status de desempenho do Eastern Cooperative Oncology Group (ECOG) 0 ou 1
• Uma ou mais lesões de 2 cm ou mais adequadas para ressecção para cultura TIL

Os pacientes podem não ter:

• Principais doenças médicas concomitantes;
• Qualquer forma de imunodeficiência;
• Hipersensibilidade grave a qualquer um dos agentes utilizados neste estudo;
• Contra-indicações para administração de altas doses de IL-2.

Projeto:

• Os pacientes serão submetidos à ressecção para obtenção do tumor para geração de culturas autólogas de TIL jovens.
• Culturas paralelas de TIL serão estabelecidas usando a) a técnica padrão apenas com IL-2 e b) o protocolo Engineered Cells with Costimulation Enhancement (ECCE) usando K562.CD64.4-1BBL-7F11 irradiado (7F11).
• Após 10 a 20 dias as culturas serão avaliadas para estabelecimento do TIL. O TIL padrão será usado preferencialmente e os pacientes que tiverem TIL estabelecido por métodos padrão serão designados para a Coorte 1

• Coorte 1:

  • TIL passará por ECCE REP por exposição a OKT-3, IL-2, células alimentadoras e 7F11 irradiado.
  • Os pacientes receberão um regime preparativo de depleção de linfócitos não mieloablativo de ciclofosfamida (60 mg/kg/dia intravenoso (IV)) nos dias -7 e -6 e fludarabina (25 mg/m^2/dia IV) nos dias -5 a -1.
  • No dia 0, os pacientes receberão a infusão de TIL jovem autólogo e, em seguida, iniciarão altas doses de aldesleucina (720.000 UI/kg IV a cada 8 horas por até 15 doses).
  • A resposta clínica e imunológica será avaliada cerca de 4-6 semanas após o tratamento.
  • Usando um projeto ideal de Fase II de dois estágios, inicialmente 18 pacientes serão inscritos e, se três ou mais dos primeiros 18 pacientes tiverem uma resposta clínica (resposta parcial (PR) ou resposta completa (CR)), o acréscimo continuará até 35 pacientes, visando uma meta de 30% para resposta objetiva.
• Se o TIL jovem padrão não crescer, o TIL jovem ECCE será avaliado e os pacientes que tiverem ECCE TIL disponíveis serão designados para a Coorte 2 .

• Coorte 2:

  • Culturas de pacientes da Coorte 2 serão avaliadas para estabelecimento de ECCE TIL. Se ECCE TIL adequado estiver disponível, o TIL passará por ECCE REP por exposição a OKT-3, IL-2, células alimentadoras e 7F11 irradiado.
  • Os pacientes receberão um regime preparativo de depleção de linfócitos não mieloablativo de ciclofosfamida (60 mg/kg/dia IV) nos dias -7 e -6 e fludarabina (25 mg/m^2/dia IV) nos dias -5 a -1.
  • No dia 0, os pacientes receberão a infusão de TIL jovem autólogo e, em seguida, iniciarão altas doses de aldesleucina (720.000 UI/kg IV a cada 8 horas por até 15 doses).
  • A resposta clínica e imunológica será avaliada cerca de 4-6 semanas após a infusão de TIL.
  • Usando um pequeno projeto ideal de Fase II de dois estágios, inicialmente 9 pacientes serão inscritos e, se um ou mais dos 9 primeiros pacientes tiverem uma resposta clínica (PR ou CR), o acréscimo continuará para 24 pacientes, visando uma meta de 25% para uma resposta objetiva.
• Se as culturas de TIL não forem estabelecidas por métodos padrão ou protocolos ECCE de TIL jovem, os pacientes serão elegíveis para nova ressecção e avaliação de TIL de um local diferente.